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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输,-20℃保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
Biotin-AP
- 库存:
60
- 供应商:
泽叶生物
- 规格:
1 mg
本产品为生物素标记的碱性磷酸酶,其灵 敏性高,推荐用于利用亲和素、链亲和素 或中性亲和素蛋白的三明治技术。
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文献和实验检测方法 对于探针和靶序列杂交之后的检测,我们通常使用碱性磷酸酶(AP)耦联的抗体,采用显色法或化学发光法检测。在碱性磷酸酶的底物中,我们使用CDP-Star或CSPD用于化学发光法检测,NBT/BCIP用于显色法检测。同时,对于膜杂交中的化学发光信号的检测,建议使用Lumi-Film以获得最理想的信号。 检测底物 即用型CDP
一般使用辣根过氧化物酶 HRP-ECL 发光法或碱性磷酸酶 AP-NBT/BICP 显色法。 1.HRP-ECL 发光法: 将 A、B 发光液按比例稀释混合。膜用去离子水稍加漂洗,滤纸贴角吸干,反贴法覆于 A、B 混合液滴上,熄灯至可见淡绿色荧光条带(5 min 左右)后滤纸贴角吸干,置于保鲜膜内固定于片盒中,迅速盖上胶片,关闭胶盒,根据所见荧光强度曝光。取出胶片立即完全浸入显影液中 1~2 min,清水漂洗一下后放在定影液中至底片完全定影,清水冲净晾干,标定
pH值时,酶分子应稳定;(5)在酶标过程中,酶连接在抗体上,不影响两者的活性。符合上述要求的最为常用的酶是辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AP)。HRP存在于植物辣根中,由无色酶蛋白和深棕色的铁卟啉结合成一种糖蛋白.分子量约40kD,稳定性好,其底物为过氧化物和供氢体,前者常用过氧化氢和过氧化氢尿素,后者常用二氨基联苯胺(diaminobenzidine,DAB)。DAB是无色还原型染料,能被氧化生成不溶
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