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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输,-80℃保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
ER2566 E.coli Strain
- 库存:
60
- 供应商:
泽叶生物
- 规格:
1 mL
本产品为为E. coli K12 ER2566菌种,缺 少lon蛋白酶和ompT外膜蛋白酶,能够有 效避免目的蛋白的降解。 其基因型如下: F- λ- fhuA2 [lon] ompT lacZ::T7 gene 1 gal sulA11 Δ(mcrC-mrr )114::IS10 R(mcr - 73::miniTn10-TetS)2 R(zgb-210::Tn10) (TetS) endA1 [dcm]
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文献和实验的衍生物,不携带有些野生分离株含有的EcoRI或其它II型限制系统。 注意: 已证实,克隆实验中mcr 和mrr 位点可减少哺乳动物(8,9,11,14)和植物(9,15)甲基化序列的回收量。一般说来,从含有甲胞嘧啶有机体中克隆基因组DNA时,明智之举是使用无Mcr 和Mrr系统的菌种[如NEB 10-beta 感受态细胞(NEB #C3019)、NEB表达感受态细胞(NEB #C2523)或者T7 表达感受态细胞(NEB #C2566)]。这些有机体包括所有哺乳动物和高等植物,以及许多原核
IMPACT™-TWIN 蛋白纯化系统,可以不用任何蛋白酶,表达N-Cys的蛋白,一步过柱纯化。
即可将目的蛋白与融合蛋白(内含肽与几丁质结合蛋白)分离。 可介导蛋白质的体外连接、标记和环化。 应用IPTG诱导的T7启动子可使蛋白高水平表达并可对其进行有效调控,有助表达有细胞毒性的蛋白。 IMPACT-TWIN系统包含成分: 三种pTWIN E.coli表达载体:pTWIN1, pTWIN2, pTWIN-MBP1 几丁质珠:与表达的融合蛋白具有亲和性,用于蛋白纯化。(结合容量=2 mg/ml) E.coli菌株 ER2566 兔抗CBD(Chitin Binding
~16 hr;JM101摇7~8 hr;ER2566摇10~12 hr。2、取1.5 ml的菌液于1.5 ml的Eppendorf管(可取未灭菌的新管)中,12000 rpm离心30 sec,弃上清。通常取1.5 ml的菌液再离心一次,弃上清后在纸上扣干。不要忘记将用完的试管及管盖放入指定处以备回收处理。3、加入100 μl溶液Ⅰ振荡使菌体沉淀充分悬浮,务必悬浮充分。4、加入200 μl溶液Ⅱ,立即轻轻翻转几下,使菌体裂解。可观察到原浑浊的菌悬浮液变清变粘。5、加入150 μl溶液Ⅲ,立即上下颠倒
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