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- 泽叶生物
- 中国/美国
- ZY130634-1000
- 2025年07月15日
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一年
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APE 1
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60
- 供应商：
泽叶生物
- 规格：
1000U
人源脱嘌呤/脱嘧啶 (AP) 核酸内切酶 APE1（Apurinic-Apyrimidinic Endonuclease I），也称为 HAP 1 或 Ref-1，与大肠杆菌外切酶 III 蛋白具有同源 性。APE 1水解断裂脱嘌呤/脱嘧啶位点 5' 端的磷酸二酯键，产生单链 DNA 断裂， 留下3' 羟基和 5' 脱氧核糖磷酸末端。除具有 AP 核酸内切酶活性外，据报道 APE1 还具有弱的 DNA 3' 二酯酶、3' 到 5' 外切酶和 RNase H 活性。除 DNA 修复活性 外，APE 1 还能通过一种氧化还原机制，体外调控许多转录因子的 DNA 结合活性。 作为这个功能的一部分，APE 1 已被证实能刺激 Fos-Jun 异源二聚体、Jun-Jun 同源二聚体、Hela 细胞AP-1 蛋白以及包括 NF-kB、Myb 和 ATF/CREB 家族成员 在内的其它几种转录因子的 DNA 结合活性。
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文献和实验1．光敏生物素标记核酸 目前使用的光标生物素试剂有两种：光生物素（乙酸盐）和补骨脂素生物素。它们都是由一个光敏基团、一个连接臂和一个生物素基团组成。光生物素的光敏基团是-N3，它在光作用下可与核酸中的碱基结合。补骨脂素生物素中的光敏基团补骨脂素在光照（320～400μm）下，可与单链或双链核酸发生反应，反应主要在T上，C上也有一定程度的反应。光敏生物素的连接臂含6～12个碳原子，用以减少探针杂交时的空间位阻。光敏生物素标记核酸，方法简单，灵敏度也可达到pg水平，可用于外源
核酸杂交技术是根据两条互补的核苷酸单链可以杂交结合成双链的原理所建立，用一段已知序列的放射性或非放射性标记的核苷酸单链做探针，与待检标本中的DNA杂交来探查待检标本中有无与之相互补的核酸。该方法特异性高，但敏感性低于PCR方法。 本实验学习用非放射性标记物-地高辛(DIG)标记DNA片段作探针，用斑点杂交法检测病原微生物DNA的方法。 【原理】 用地高辛（DIG）类固醇半抗原标记特异DNA片段做探针，与待检标本中DNA杂交，然后加入碱性磷酸酶标记的抗－DIG抗体
热至95 ℃,变性10min 即可。如果杂交液中含有甲酰胺,则需68 ℃变性10min。 此外,在杂交这一环节中,为了避免探针浓度过高而产生干扰背景,有必要在正式杂交前先进行一次模拟杂交,以筛选最适的浓度。 4 地高辛标记探针的显色检测 4. 1 化学发光检测化学发光检测能通过X 光片记录下很轻微的信号,其检测过程分四个步骤完成。首先使用封闭剂对杂交后的膜进行处理,以阻止抗体对膜的特异性吸引,然后加入结合有碱性磷酸酶的抗地高辛半抗原的抗体(Anti-DIG-AP
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