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- 北京
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- 2025年07月12日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
12个月
- 英文名：
Rnase A；Ribonuclease A
- 库存：
760
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格：
2ml|0.5ml
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文献和实验2 溶于双蒸水，定容至1000ml）和1份B液（3.04g Na2 HPO4 ?12H2 O，1.2g KH2 PO4 ，20g葡萄糖，溶于双蒸水，定容至1000m）与18份双蒸水混合，调节pH至7.2~7.4，高压灭菌后，于4℃保存备用。 （2） 0.5%胰蛋白酶，HBSS溶解后分装，于-20℃保存。 （3） 200mg/ml核糖核酸酶，HBSS溶解后分装，于-20℃保存。 【操作步骤】 （1） 于4℃离心收集细胞并重新悬浮于0.2ml HBSS中， 使其浓度位106 /ml；
核糖核酸酶保护实验（Ribonuclease protection assay，RPA）是近十年发展起来的一种全新的mRNA定量分析方法。其基本原理是将标记的特异RNA探针（32P或生物素）与待测的RNA样品液相杂交，标记的特异RNA探针按碱基互补的原则与目的基因特异性结合，形成双链RNA;未结合的单链RNA经RNA酶A或RNA酶T1消化形成寡核糖核酸，而待测目的基因与特异RNA探针结合后形成双链RNA，免受RNA酶的消化，故该方法命名为RNA酶保护实验。对于32P标记的探针，杂交
用 100 μ l 1mol/L 乙酸铵重悬沉淀小团，重复 d ～ e 步骤。 g. 真空（真空旋转蒸发 / 浓缩仪）干燥沉淀小团，用 DEPC 水重悬沉淀小团，取 1 μ l 置液闪仪计数。 4． 若需做凝胶纯化，则： a. 将无 RQ1 RNA 酶的 DNA 酶处理步骤省去。 b. 制备测序凝胶（ 5 ％聚丙烯酰胺 /6mol/L 尿素） c. 加 DEPC 水将核糖核酸
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