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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
RT
- 保质期:
12个月
- 英文名:
Western Blot Wash Buffer(10×) in PBS
- 库存:
567
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
100ml
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销售10×WB洗涤液(PBS)品牌,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:10×WB洗涤液(PBS)品牌
产地:国产|进口
英文名:Western Blot Wash Buffer(10×) in PBS
规格:100ml
品牌:百奥莱博
WB洗涤液可以用于Western Blot时一抗或二抗孵育后的洗涤。适当的洗涤可降低背景,增强信噪比。
使用说明
1. 取适量10×WB 洗涤液,用去离子水10 倍稀释。在一抗或二抗孵育结束后,加入适量的WB 洗涤液,使之能盖住杂交膜,在摇床上缓慢摇动洗涤10-15 分钟后,吸尽洗涤液,再加入新的WB 洗涤液。共洗涤3 次,每次10-15 分钟。然后进行后续的操作。
2. 如果按照上述洗涤条件,WB 的染色结果背景仍然较高,可以适当延长洗涤时间,并增加洗涤次数。通常,延长洗涤时间或增加洗涤次数不会对WB 的结果产生负面影响。
注意事项
1. WB洗涤液经过滤除菌处理,使用过程中应尽量避免细菌污染。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
储存:RT,有效期12个月。
欲咨询购买10×WB洗涤液(PBS)品牌,请致电北京百奥莱博科技有限公司,为您提供最全面周到的产品服务,除此之外,我公司正在促销以下产品:
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文献和实验【原创】实验方法分享:用某品牌rProtein A填料有效纯化小鼠腹水单抗
(PBS+1M NaCL,pH7.5-8) 的缓冲液置换0.3ml该品牌rProteinA填料的storage buffer。 2,用binding buffer等体积稀释小鼠腹水1ml(15ml离心管),10000RPM离心15分钟 3,取离心上清,把步骤1中的填料加入,室温在摇床上晃匀5-60分钟(时间越长,温度37度,能提高抗体和填料的结合率,此次实验中就晃了5分钟,导致流穿中还有一点点抗体残留;) 4,3-5000RPM离心1-3分钟,沉降填料,吸去上清(流穿) 5,加入10
和靶蛋白 Y 来自细胞裂解液,那么裂解液配方建议选择非变性裂解液,NaCl 浓度<150 nM,SDS 浓度<0.2% 洗涤液---去除非特异结合蛋白,顾及互作蛋白间的结合强度优化配方 如果互作蛋白作用较弱,建议选择 PBS 或者 TBS 进行洗涤 通常会加入去垢剂降低背景,比如 0.5-1% NP-40/TritonX-100/CHAPS 如果效果还不佳,还可增加盐离子浓度,比如<250 nM NaCl,以及加入1-2 nM DTT/β-ME 还可增加洗涤次数,比如 3-5 次 洗脱液---
。(1)本次洗涤目的在于:除去预湿用的乙醇。因此应该尽量洗涤干净,减少残留。(2)包被:按说明书操作。50μL/孔加入用1×PBS稀释好的包被抗体,4°C包被过夜。5、 封闭:(次日)倾倒包被液,用无菌1×PBS洗涤3次。最后一次,在灭菌的吸水纸上扣干。200μL/孔加入稀释好的封闭液,37°C封闭1h。6、倾倒封闭液,无须洗涤,直接加入检测细胞进行ELISPOT检测。二、Magi™ Coating Buffer润湿包被程序该方案中,用Magi™ Coating Buffer润湿PVDF孔后,直接加入
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