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- 泽叶生物
- 中国/美国
- ZY100811-10
- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
常温运输及保存
- 保质期：
一年
- 英文名：
MS-Compatible Silver Stain for Protein
- 库存：
60
- 供应商：
泽叶生物
- 规格：
10次
银染是目前检测PAGE电泳分离后的蛋白质的最灵敏的方法，MS（质谱）是确 定未知蛋白最常用和最快捷的方法，但将银染得到的蛋白直接用于MS分析有很多问 题，其中最主要问题是常规银染所使用的试剂（包括强氧化剂和醛类）容易使蛋白 质发生化学修饰，这样MS分析得到的氨基酸信息跟蛋白质实际的氨基酸信息并不相 同。为了使银染得到的蛋白质可以用于MS分析，为此本公司开发MS兼容型银染试 剂盒，其特点如下：
1. 跟MS兼容，原理是避免使用能化学修饰蛋白质的试剂，所得蛋白质没有发生化 学修饰，故可直接用于后续的MS（包括MALDI-TOF-MS和ESI-MS）分析。
2. 银染的灵敏度比考马斯亮蓝染色高100倍左右，可达0.2-0.6 ng蛋白质/条带。
3. 可用于各种PAGE胶，包括变性PAGE胶（如SDS-PAGE，尿素-PAGE），非 变性PAGE胶，IEF胶（等电电泳胶），2D胶等。
4. 四种溶液都是现用现配，实验结果的可重复性好。
质谱兼容型蛋白银染试剂盒使用及效果
将PAGE胶固定后放入溶液A中固定30min后移入水中漂洗3次，每次5min。 然后放入B溶液中染色20分钟，用水快速漂洗2次，再在溶液C中显色至条带清晰可 辨，取出固定后即可照相。银染之后可进行后续MS分析。
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。 2）RNA 提取 外泌体 RNA 可以用专用的外泌体 RNA 提取试剂盒提取，也可以用 Trizol 法提取，建议 Trizol 与外泌体的体积比不小于 4:1（也可以用 Trizol 直接裂解外泌体沉淀）。 具体操作：取 200 μl 外泌体于 1.5 ml EP 管中，加入 800 μl Trizol 试剂，充分混合，裂解 10 min，12000 rpm 离心 10 min 取上清。 3）反转录 采用 Umibio 4× 预混型快速逆转录试剂盒：适用于长片段 RNA（如 mRNA、LncRNA
基于质谱的蛋白质鉴定，第6节：MALDI-TOF-MS蛋白和肽样品的制备
物干燥，连续洗涤使用预制型的薄层基质。该方法为精确和灵敏的MALDI检测创造了最佳条件。然而，这种样品制备方法制备的样品不能承受激光辐射，会被迅速漂洗。因此，该方法不适用于PSD光谱的蛋白质谱鉴定，因为PSD光谱法通常每个片段质量范围需要多达100甚至以上次数反复的激光辐射。 如果在分析之前，使用小型吸附柱对较大体积的肽混合物进行浓缩，抑或通过向肽混合物中添加少量反相色谱珠的方式进行批量吸附。而进行批量吸附，只需要将磁珠吸附到的肽混合物进行洗涤，即可获得肽混合物，然后转移至上样处并干燥即可。这种
用PlusOne蛋白银染试剂盒染Ettan DALT凝胶的优化方法... 98 参考文献... 99 其它读物和参考材料... 104 推荐的其它耗材... 104 订购信息... 105
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