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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输,-20℃保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
miRNA First Strand cDNA Synthesis Kit
- 库存:
60
- 供应商:
泽叶生物
- 规格:
25次
本试剂盒采用在miRNA 3’末端加多聚A尾的方法来使miRNA具有Poly(A)尾, 之后再使用Oligo(dT)-Universal tag通用逆转录引物进行逆转录反应,最终合成 miRNA对应的第一链cDNA。
它具有如下特点:
1. 检测通量高,本试剂盒包含miRNA 3’末端Poly(A)尾修饰过程及修饰后逆转录 过程需要的全部试剂,只需最少的RNA样本,即可同时进行多种目标miRNA的 检测。
2. 该试剂盒具有非常高的Poly(A)修饰和逆转录效率,可以从1ng-2μg的total RNA 中有效获得miRNA对应的cDNA第一链。
3. 操作简便、快捷,可以用于从一个反应合成的cDNA中同时检测多种miRNA, 不仅减少了误差、节约了样品,同时还实现了检测的高通量。与miRNA荧光定 量PCR检测试剂盒配合使用简便、快捷完成miRNA的提取与检测。
4. 检测特异性好,独特的miRNA引物设计技术及其优化的反应体系避免了非特异 性扩增、特别是Pre-miRNA的污染。
5. 分辨率高:该系统能分辨单碱基差异的miRNA。
miRNA cDNA第一链合成试剂盒使用及效果
详细使用步骤请参见使用手册。
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文献和实验M-MLV第一链cDNA合成试剂盒-技术手册一、 试剂盒组成 Components SK2027 SK2028 5×M-MLV Reaction Buffer 100µl
通过体外无细胞系统翻译找出目的基因mRNA以后,变可进行cDNA第一链的合成,其步骤包括: 1)在Ependorf管中加50pmol/L的一种α32PdNTP和1mg/ml的mRNA 10μl(10μg),100m mol/L甲基氢氧化汞1μl,室温反应l0分钟,使RNA变性。 2)加100m mol/L的β-巯基乙醇2μl和10m mol/L RNA酶抑制剂2μl,室温放置5分钟。β-巯基乙醇有稳定逆转录酶活性的作用。 3)向上述反应混合物加lmg/ml
相关专题 miRNA RNA一度被认为仅仅是DNA和蛋白质之间的“过渡”,但越来越多的证据清楚的表明,RNA在生命的进程中扮演的角色远比RNA我们早前设想的更为重要。 RNA干扰(RNA interference)的发现使得人们对RNA调控基因表达的功能有了全新的认识,更因为可以简化替代基因敲除而成为研究基因功能的有力工具,因此格外引人注意,在2002年度Science评选的10大科学成就中RNAi名列榜首。 随着对小分子RNA研究的不断深入,研究人员开始认识到:小分子RNA的世界一点都不小
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