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- Ybscience
- 中国/上海
- hz130911-251
- 2025年07月09日
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- 技术资料
- 保存条件：
低温运输，-20℃保存
- 保质期：
一年
- 英文名：
miRNA First Strand cDNA Synthesis Kit
- 库存：
大量
- 供应商：
上海沪震生物科技有限公司
- 规格：
25次/盒
产品及特点
本试剂盒采用在miRNA 3’末端加多聚A尾的方法来使miRNA具有Poly(A)尾，之后再使用Oligo(dT)-Universal tag通用逆转录引物进行逆转录反应，最终合成miRNA对应的第一链cDNA。其反应流程如下：
miRNA cDNA第一链合成试剂盒-miRNA First Strand cDNA Synthesis Kit它具有如下特点：
1. 检测通量高，本试剂盒包含miRNA 3’末端Poly(A)尾修饰过程及修饰后逆转录过程需要的全部试剂，只需最少的RNA样本，即可同时进行多种目标miRNA的检测。
2. 该试剂盒具有非常高的Poly(A)修饰和逆转录效率，可以从1ng-2μg的total RNA中有效获得miRNA对应的cDNA第一链。
3. 操作简便、快捷，可以用于从一个反应合成的cDNA中同时检测多种miRNA，不仅减少了误差、节约了样品，同时还实现了检测的高通量。与miRNA荧光定量PCR检测试剂盒配合使用简便、快捷完成miRNA的提取与检测。
4. 检测特异性好，独特的miRNA引物设计技术及其优化的反应体系避免了非特异性扩增、特别是Pre-miRNA的污染。
5. 分辨率高：该系统能分辨单碱基差异的miRNA。
miRNA cDNA第一链合成试剂盒-miRNA First Strand cDNA Synthesis Kit使用及效果
详细使用步骤请参见使用手册。10mg/ml鲑鱼精DNA 1ml
10mg/ml鲑鱼精DNA 10ml
10%SDS(杂交用) 100ml
20×SSC溶液 250ml
20×SSC溶液 500ml
50×Denhardt's液 50ml
50×Denhardt's液 100ml
去离子甲酰胺 100ml
去离子甲酰胺 200ml
1M Tris-HCl,pH6.8 100ml
1M Tris-HCl,pH7.4 100ml
1M Tris-HCl,pH7.6 100ml
1M Tris-HCl,pH8.0 100ml
1M Tris-HCl,pH8.8 100ml
1M Tris-HCl,pH9.5 100ml
0.5M EDTA pH8.0 100ml
5M 氯化钠溶液 100ml
GenPrep微量DNA提取产品名称类别 GenPrep 产品中文名 规格 (盒/次)
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文献和实验cDNA Synthesis from MOLT-4 Cells
second strand yield. 11. Add 0.5 ml PN buffer from Qiegen Nucleotide Removal Kit to the remaining reaction, and mix it ,load it into the spin column, and follow the pr℃edures comimg with the kit to purify the double strand DNA. 12. Elute the cDNA
，以SMART 寡苷酸作为模板继续延伸。这样合成得到的单链cDNA 在3"端有一段与SMART 寡苷酸互补的序列，在5"端有一段与oligo(dT)引物互补的序列。这些序列作为下一步进行长距离PCR 的引物合成位点。结果可以得到富集全长序列的双链cDNA。 问：SMART 试剂 盒系列产品之间有什么差别？ 答： SMART cDNA Library Construction Kit 是用来从少量RNA 样本中构建高质量的cDNA 文库。 试剂 盒中包括有SMART cDNA 合成和文
通过实时荧光定量PCR技术实现对miRNA靶向物mRNAs的相对定量分析
公司），按照生产商的建议从HeLa细胞中提取总RNA（每个类似物miRNA三个生物学复制）。同时，使用High Pure miRNA Isolation Kit（罗氏公司），按照使用说明书上的指导，提取包含小分子量RNA在内的总RNA（两个生物学重复）。按照生产商的指导，使用Transcriptor First Strand cDNA Synthesis Kit（罗氏公司）和oligo（dT）18 与随机六聚体引物的混合物，按照每次反应500到1000ng总RNA的量进行第一链cDNA的合成
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