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cDNA第二链合成试剂盒

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  • ¥190 - 1980
  • KALANG
  • 中国大陆
  • 2025年07月14日
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      长期

    • 英文名

      Second Strand cDNA Synthesis Kit

    • 库存

      大量

    • 供应商

      康朗生物

    • 规格

      10次

    cDNA第二链合成试剂盒

    英文名:Second Strand cDNA Synthesis Kit
    编号:KL398
    规格:10次
    本试剂盒是一种在合成了cDNA第一链的基础上去除RNA-DNA杂合链中的RNA链并合成cDNA第二链,最终形成双链cDNA的试剂盒。本试剂盒包含了进行cDNA第二链合成所需的各种试剂。

    本试剂盒采用RNase H使RNA-DNA杂合链中的RNA产生切口,此时DNA Polymerase I可以通过切口平移(nick translation)反应催化形成cDNA第二链。

    使用本试剂盒合成的双链cDNA,可以直接用于后续的常规PCR、real-time PCR、cDNA文库的构建等。

    本试剂盒用于体积为20微升的cDNA第一链合成反应的后续反应时,足够进行20个cDNA第二链样品的合成。

    产品组份:
    RNase H(1U/μl)————————10μl
    DNA Polymerase I(10U/μl)———30μl
    Reaction Buffer(10X)——————100μl

    储存条件:-20℃。

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      1)离心沉淀cDNA第一链,并重悬在50μl水中,加50μl 2×第二链缓冲液(0.2mol/L Hepes,pH6.9,20m mol/L MgCl2,5 m mol/L DTT,0.14 mol/L KCl,1 m mol/L 4种Dntp),混合均匀。 2)每微克底物加大肠杆菌DNA聚合酶K1enow片段20~50单位,15℃反应20小时,此酶能识别cDNA 3’末端发卡环,并以其为引物,cDNA第一链为模板,开始第二链的合成。 3)加0.5 mol/L EDTA 2μl

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