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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
Second Strand cDNA Synthesis Kit
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海联迈生物工程有限公司
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
10次
| 产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
| LM7172 | cDNA第二链合成试剂盒 | 10次 | 246.00元 |
本试剂盒采用RNase H使RNA-DNA杂合链中的RNA产生切口,此时DNA Polymerase I可以通过切口平移(nick
translation)反应催化形成cDNA第二链。
使用本试剂盒合成的双链cDNA,可以直接用于后续的常规PCR、real-time PCR、cDNA文库的构建等。
本试剂盒用于体积为20微升的cDNA第一链合成反应的后续反应时,足够进行20个cDNA第二链样品的合成。
包装清单:
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| LM7172-1 | RNase H(1U/μl) | 10μl |
| LM7172-2 | DNA Polymerase I(10U/μl) | 30μl |
| LM7172-3 | Reaction Buffer(10X) | 100μl |
| - | 说明书 | 1份 |
-20℃保存。
注意事项:
进行第二链合成时,dNTP比较适当的最终浓度约为0.2mM。如果最终浓度过低,在反应体系中需要适当补充dNTP。
如果希望获得平末端的双链cDNA,可以用T4 DNA Polymerase(LM7051)或DNA末端平滑试剂盒(LM7012)处理。
酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后宜立即放置于-20℃保存。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验1)离心沉淀cDNA第一链,并重悬在50μl水中,加50μl 2×第二链缓冲液(0.2mol/L Hepes,pH6.9,20m mol/L MgCl2,5 m mol/L DTT,0.14 mol/L KCl,1 m mol/L 4种Dntp),混合均匀。 2)每微克底物加大肠杆菌DNA聚合酶K1enow片段20~50单位,15℃反应20小时,此酶能识别cDNA 3’末端发卡环,并以其为引物,cDNA第一链为模板,开始第二链的合成。 3)加0.5 mol/L EDTA 2μl
M-MLV第一链cDNA合成试剂盒-技术手册一、 试剂盒组成 Components SK2027 SK2028 5×M-MLV Reaction Buffer 100µl
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