2.5mM dNTP混合溶液

常用贮存液的配制之脱氧核苷三磷酸（dNTP）溶液

脱氧核苷三磷酸（dNTP）溶液 　　【配制方法】 　　把每一种dNTP溶解于水至浓度各为100mmol/L左右，用微量移液器吸取0.05mol/l Tris碱分别调节　每一dNTP溶液的pH值7.0（用pH试纸检测），把中和后的每种dNTP溶液各取一份作适当稀释，在下表中给出的波长下读取光密度计算出每种dNTP的实际浓度，然后用水稀释成终浓度为50

RT-PCR 引物的选择

，从1mM 到 3mM，间隔 0.5mM 进行一系列反应，确定对于每个模板和引物对的最佳镁离子浓度。 耐热聚合酶 酶量过多 以 0.5U 为间隔适当减少酶量 退火温度 退火温度过低 适当提高退火温度或采用二阶段温度法 PCR 循环次数 PCR 循环次数过多 减少 PCR 循环次数 操作多份样品时，制备反应混合液，先将 dNTP、缓冲液、引物和酶混合好，然后分装，这样即可以减少操作，避免污染，又可以增加反应的精确度； 最后加入反应模板

PCR 不必“摸条件”

PCR 是分子生物学科研人员必做的实验，为了扩增目的基因，经常要对 PCR 的体系进行“摸条件”，特别是一些 GC 含量高的目的基因或者 DNA 纯度不高的样本! “摸条件”成为 PCR 实验最费时费力的工作！ 虽然市场上有很多 PCR 的 MasterMix 试剂，将酶、dNTP、反应缓冲液混合在一起，很方便客户的使用，但仅仅是简单的混合，极少公司对MIX的应用范围进行广泛的实验和优化，只能做一些不复杂的 PCR。 百泰克通过长时间、无数次的实验优化，终于推出了适用范围广、稳定性良好