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-20℃
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长期
- 英文名:
C-Myc plasmid(with CMV promoter)
- 库存:
785
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博供应的C端Myc标签融合蛋白质粒 克隆与表达用于科研目的生化试验项目,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多C端Myc标签融合蛋白质粒等克隆与表达产品请联系我司咨询订购。
名称:C端Myc标签融合蛋白质粒 克隆与表达
品牌:百奥莱博
规格:1μg
编号:YT472
英文名:C-Myc plasmid(with CMV promoter)
本质粒是用于在哺乳动物细胞中表达C端和Myc tag(Myc标签)融合的目的蛋白的表达质粒。含有CMV启动子可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达;在多克隆位点的3"端含有一个可以编码Myc标签的序列,因此可以表达出含有Myc标签的融合蛋白,可以方便地使用抗Myc的抗体来识别目的蛋白,有利于目的蛋白检测和分离纯化。质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后,可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
本质粒质粒的主要信息如下:
| Feature Nucleotide | Position |
| CMV promoter | 1-602 |
| T3 promoter and T3 primer binding site | 620-639 |
| multiple cloning site | 680-740 |
| c-Myc tag | 741-770 |
| T7 promoter and T7 primer binding site | 823-844 |
| SV40 polyA signal | 856-1239 |
| f1 origin of ss-DNA replication | 1377-1681 |
| bla promoter | 1706-1830 |
| SV40 promoter | 1850-2188 |
| neomycin/kanamycin resistance ORF | 2223-3014 |
| HSV-thymidine kinase(TK)polyA signal | 3015-3473 |
| pUC origin | 3602-4269 |
本质粒的图谱如下:
使用说明:
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. 本质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因,需注意插入基因片段和tag之间的读码框要一致,即需要避免发生移码突变。构建的质粒可以用常规方法转染细胞。
储存条件:-20℃。
除C端Myc标签融合蛋白质粒 克隆与表达外,我公司正在打折促销以下产品:
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C端Myc标签融合蛋白质粒 克隆与表达关键词:C-Myc plasmid(with CMV promoter),C端Myc标签融合蛋白质粒,YT472
·结晶紫染色液
编号:YT913
英文名称:Crystal Violet Staining Solution
规格:100ml
本染色液是一种组织或细胞染色时常用的可以把细胞核染成深紫色的染色液。结晶紫是一种碱性染料,可以和细胞核中的DNA结合,从而产生细胞核染色。一个包装的本染色液至少可以染色200个样品。
注意事项:
1. 需自备4%多聚甲醛。如果需要脱水、透明和封片处理,还需自备二甲*,中性树胶或其它封片剂。如果样品是石蜡切片,需自备70%和90%乙醇,无水乙醇以及二甲*。
2. 第一次使用本试剂盒时建议先取1-2个样品做预实验。
储存条件:室温避光,有效期一年。
·10×YTM Buffer(与NEB CutSmart Buffer成分相同)
编号:YT488
英文名称:10×YTM Buffer(For Restriction Enzyme)
规格:5ml
百奥莱博的10× YTM Buffer是一种能让超过200种限制性内切酶的活性达到100%的缓冲液。使用YTM Buffer,可以免去内切酶酶切时选择buffer的麻烦,特别是在双酶切时会变得更加简单易行。此外,许多DNA修饰酶在YTM Buffer中也保留了100%酶活性,这样在酶切后进行DNA修饰酶处理就无需进行DNA纯化了。
各种内切酶和修饰酶在1× YTM buffer中的活性,请参考附录1和附录2。不同来源的限制性内切酶对于YTM Buffer的兼容性可能略有不同。1× YTM Buffer的组分为50 mM Potassium acetate, 20 mM Tris-acetate, 10 mM Magnesium acetate, 100 μg/ml BSA, pH 7.9 @ 25℃,与NEB公司的CutSmart™ Buffer完全一致。一个包装的本产品,如果用于20μl的酶切反应体系,共可以用于2500个酶切反应。
储存条件:-20℃。
附录1:
常用限制性内切酶在 YTM Buffer 中的活性和效能表如下:
附录2:
DNA 修饰酶在 YTM Buffer 中的活性表格如下:
我公司正在优惠促销克隆与表达等系列产品,期待您的咨询选购C端Myc标签融合蛋白质粒 克隆与表达。
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文献和实验用传统的限制酶切和连接的方法产生入门克隆。这些载体配合合适的目的载体,可以用于表达天然蛋白或带有N端或C端融合标签的重组蛋白。为了在真核细胞中有效地翻译蛋白,所有的5个Gateway入门载体提供了Kozak 序列。此外,pENTR11提供了SD (Shine-Dalgarno)序列,便于在大肠杆菌中有效的翻译。2、PCR重组克隆 重组是从PCR产物创建Gateway入门克隆的另一种方法。这种方法是通过合并attB位点到上游和下游引物上,然后共同孵育PCR扩增产物和pDONR载体(包含attP位点
。当基因在目的表达载体 之间快速简便的穿梭时,还可以保证正确的方向和阅读框。Gateway也有助于进行带不同数目纯化和检测标签蛋白的表达。 图1 Gateway技术的灵活性 目的基因克隆进入门载体 后,可以同时转移目的基因到多个目的载体。 Gateway利用了位点特异重组,所以在构建入门载体后,不再需要使用限制性内切酶和连接酶。一旦您拥有了一个入门克隆,就可以多次使用它,转移您的目的基因到Gateway改造过的各种表达载体(目的载体)。
比起其它公司的原核表达系列来说Invitrogen有个非常突出的地方就是它的重组克隆技术。像之前Novagen大部分载体都是用传统的酶切、链接方式做重组质粒,但是Invitrogen的表达系统大量运用了它的TOPO技术和Gateway技术。 虽然现在在许多做科研的学生看来,能出实验结果是最重要的,中间的过程不是那么重要。可是只有创新的技术才能推动科学不断的进步,比如:如果我们一直采用手工法测序,那真是不知道要猴年马月才能有人类基因组测序图谱,更难以进行
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