质粒大量抽提试剂盒 克隆与表达

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售")，产品线涵盖质粒大量抽提试剂盒 克隆与表达在内的分子生物学试剂产品，还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。

名称：质粒大量抽提试剂盒 克隆与表达
规格：20次
品牌：百奥莱博
编号：YT003
英文名：Plasmid Maxi Preparation Kit
产地：国产|进口
本试剂盒是一种用于从大肠杆菌中进行大量质粒的快速抽提的试剂盒。本试剂盒采用了一种新型的离子交换柱。在特定条件下，使质粒能在离心过柱的瞬间，结合到质粒纯化柱上，在一定条件下又能将质粒充分洗脱，从而实现质粒的快速纯化。无需酚*仿抽提，无需酒精沉淀，6个样品只需不足90分钟即可完成。

两步过柱纯化，使质粒纯度进一步提高，达到转细胞级要求。每个质粒纯化柱可以结合的质粒量的上限大于500微克。每个纯化柱可用于抽提100毫升左右用LB培养过夜的大肠杆菌。抽提所得质粒的OD值一般在1.80左右。抽提获得的质粒量会受质粒拷贝数等因素影响。抽提获得的质粒DNA的OD值也会因菌种不同等原因而略有波动。

由本试剂盒所得质粒可直接用于转染细胞，DNA测序，PCR，基于PCR的突变，体外转录，转化细菌，内切酶消化等。本试剂盒抽提的含Firefly luciferase或Renila luciferase报告基因的质粒，用Lipofectmine 2000或Fugene 6转细胞，报告基因检测结果表明仅0.5微克受SV40启动子控制的质粒转化12孔板内的一孔原代贴壁细胞，总RLU值约为五百万，测定时间为10秒。

内毒素(endotoxin)含量低。用对内毒素敏感的细胞转染受内毒素响应的报告基因质粒，与进口品牌的大抽试剂盒相比，毫不逊色。

产品组份：
溶液I (悬浮液)———————————105ml
溶液II (裂解液)——————————105ml
溶液III (结合液)——————————150ml
溶液IV (洗涤液)——————————84ml×3 (第一次使用前每瓶加入126ml无水乙醇)
溶液V (洗脱液)——————————90ml
溶液VI (DNA纯化结合液)——————210ml
RNase A (100mg/ml)————————105μl
大抽质粒纯化柱及废液收集管————20套

注意事项：
1）第一次使用前把试剂盒提供的RNase A全部加到溶液I(悬浮液)中，混匀，并在瓶上做好标记。加入RNase A后4℃存放。
2）第一次使用前在每瓶溶液IV(洗涤液)中加入54ml无水乙醇，混匀，并在瓶上做好标记。
3）温度较低时，溶液II和溶液III可能会有沉淀产生。使用前必须检查一遍。如有沉淀，37℃水浴加热溶解，混匀后使用。溶液II请勿过分剧烈混匀，否则会产生大量气泡。
4）溶液II使用完后，一定要盖紧瓶盖，防止被空气中二氧化碳酸化。
5）溶液II有强碱性，溶液II和溶液III对人体都有刺激性，操作时请小心，并注意适当防护。
6）本试剂盒所有操作均在室温进行，操作时无需冰浴。所有离心也均在室温进行。
7）废液收集管在一次抽提中需多次使用，切勿中途丢弃。
8）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

储存条件：室温，有效期一年。

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67-75-5 Tetracyclin HCl  盐*(代"酸")四环素
对羟基*甲*(代"酸") Triton x-100 99-96-7
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NF-222 羊抗人AFP
*化铵溶液(5mol/L)   100ml
9048-46-8 Albumin Bovine 牛血清白蛋白(全组分)
145-42-6 牛磺胆酸*
碳酸**溶液(1mol/L,pH8.3-9.0)   500ml
M0403 兔IgG预装亲和柱                             
BL0966 封闭用鸡血清(原液) 10ml
BL1049 鱼蛋白胨
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·p53抗体
编号：YT834
英文名称：anti-p53 antibody
规格：>20次
本抗体是用经过适当修饰的人重组p53为抗原制备而成的抗p53小鼠单克隆抗体。本抗体如果用于常规的Western检测，至少可以检测20次。

本p53抗体可以识别人、小鼠、大鼠和猴子的p53，其他种属未经测试。本抗体可以检测一些高表达p53的肿瘤细胞内源性的总p53蛋白水平。本抗体较难检测到正常成纤维细胞中的p53。本抗体识别的是p53近N端部分，可以识别p53/T complex。

p53是一种肿瘤抑制蛋白，在细胞对DNA损伤或基因组异常响应过程中起关键作用。p53激活可以导致细胞周期阻滞(cell cyc
le arrest)，DNA修复或细胞凋亡。MDM2是p53的E3 ligase，可以导致p53的泛素化修饰并被蛋白酶体降解。p53可以被多种蛋白激酶在多个位点磷酸化修饰。DNA损伤诱导的p53 Ser15和Ser20磷酸化可以减弱p53和其负调控因子MDM2的结合。p53可以被ATM，ATR和DNA-PK等在Ser15和Ser37位磷酸化，从而抑制p53的泛素化降解，促进p53的激活和积累。Chk1和Chk2可以磷酸化p53的Ser20，促进p53的四聚化，增强其稳定性和活性。p53的Ser46磷酸化和其诱导细胞凋亡密切相关。p53的Ser392可以被CAK磷酸化，该位点磷酸化和p53的抑制生长功能及其DNA结合和转录激活有关。p53可以被p300和CBP乙酰化修饰，可以被Sirt1去乙酰化修饰。p53的乙酰化修饰可以促进其在应激反应中的累积和激活。

产品组份：
p53抗体————20μl
Western一抗稀释液————20ml

抗体参数：
免疫原物种：人
免疫原：经过适当修饰的人重组p53
克隆性：单克隆
宿主：小鼠
用途：WB,IP,IC, IF
可检测样品：H, M, Mk
同种型：IgG2a
p53分子量：53kD
推荐稀释比例：WB(1:1000),IP(1:200),IC(1:500),IF(1:500)

注意事项：
1. 在Western实验后，请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体，包括已经使用过的稀释抗体，4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体，使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象，可以10000g离心1-3分钟，取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况，则可以考虑废弃该抗体。
3. 对于本抗体，Western检测时一抗要4℃缓慢摇动过夜，如果仅短时间与一抗孵育检测效果较差。
4. 本抗体检测的目的蛋白的分子量比较大，需注意选择浓度较低的胶，并需注意大分子量蛋白转膜通常比较困难。

储存条件：-20℃，有效期一年。


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·MgCl2溶液(1M)
编号：YT399
英文名称：MgCl2 Solution
规格：100ml
本品为浓度1M的*化*溶液常用储备液。适合用于各种生化、分子生物学实验。

·RIPA裂解液(弱)
编号：YT611
英文名称：RIPA Lysis Buffer
规格：100ml
本品是一种传统的细胞组织快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等。RIPA的本意是Radio Immunoprecipitation Assay。RIPA裂解液的配方有很多种，根据其裂解液的强度大致可以分为强、中、弱三类。

RIPA裂解液(弱)的主要成分为50mM Tris(pH7.4)，150mM NaCl，1% NP-40，0.25% sodiu*(代"m") deoxycholate，以及sodiu*(代"m") orthovanadate，sodiu*(代"m") fluoride，EDTA，leupeptin等多种抑制剂。可以有效抑制蛋白降解。

用RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品，可以用百奥莱博的BCA蛋白浓度测定试剂盒(YT036/YT037)测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的去垢剂，不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。

储存条件：-20℃，有效期一年。

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