HIF-1α凝胶迁移突变探针(1.75μM)厂家

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北京百奥莱博专业生产销售HIF-1α凝胶迁移突变探针(1.75μM)厂家，我公司供应的细胞生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：HIF-1α凝胶迁移突变探针(1.75μM)厂家
品牌：百奥莱博
英文名：HIF-1α Mutation Probe For EMSA(1.75μM)
编号：YT226
规格：60μl
本探针是用于EMSA(也称gel shift)研究的HIF-1α consensus oligonucleotide的突变体。可以作为EMSA探针－HIF-1α的阴性对照，用于EMSA结合反应中突变探针的冷竞争反应等。一个包装的突变探针，如果用于同位素标记EMSA探针的突变探针冷竞争反应，可以进行30-60个突变探针的冷竞争反应。

HIF-1 α consensus oligo的序列如下：
5"-TCT GTA CGT GAC CAC ACT CAC CTC-3"
3"-AGA CAT GCA CTG GTG TGA GTG GAG-5"

EMSA突变探针－HIF-1α中HIF-1α的公认的结合位点发生了突变，从而使HIF-1α无法和该突变探针结合。在探针冷竞争反应中，正常的标记探针和HIF-1α的结合的条带会被抑制；而在突变探针冷竞争反应中，正常的标记探针和HIF-1α的结合的条带不会被抑制。参考下图。


一个典型的EMSA/Gel- Shift分析图
1,阴性对照反应(标记探针)；
2,常规反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针)；
3,探针冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋标记探针100倍量的未标记探针)；
4,突变探针的冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋标记探针100倍量的未标记突变探针)；
5,Super-shift反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋目的转录因子的特异抗体)。

注意事项：
1. 避免加热到40℃以上，温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
2. 对于EMSA的详细操作可以参考我们的EMSA试剂盒的使用说明。

储存条件：-20℃，有效期一年。

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·琼脂粉(细菌培养用)
编号：YT427
英文名称：Agar
规格：100g|500g
本品是细菌培养级琼脂粉，常用于制备细菌培养用LB平板等，使用量通常为1.5%。

分子式：(C12H18O9)n
分子量：3000～9000

储存条件：室温。

·谷胱甘肽过氧化物酶检测试剂盒
编号：YT298
英文名称：Cellular Glutathione Peroxidase Assay Kit
规格：100次
本试剂盒是一种简单易行的通过紫外比色来检测细胞、组织或其它样品中谷胱甘肽过氧化物酶活性的试剂盒。绝大部分细胞内的谷胱甘肽过氧化物酶都是含硒的，且硒为该酶的活性中性组成部分。细胞内也有很少量的不含硒的谷胱甘肽过氧化物酶存在。本试剂盒检测的是最常见的含硒的谷胱甘肽过氧化物酶。本试剂盒可检测组织匀浆产物、细胞裂解产物等样品中谷胱甘肽过氧化物酶的活性。一个试剂盒可进行100次检测。

本试剂盒如果和总谷胱甘肽过氧化物酶检测试剂盒(YT299)配合使用，可以定量检测出样品中不含硒的谷胱甘肽过氧化物酶。

谷胱甘肽过氧化物酶可以清除活细胞内过氧化物，在保护细胞免受自由基损伤过程中起着关键作用 。细胞内的脂类容易和自由基发生反应，产生脂类过氧化物。谷胱甘肽过氧化物酶可以利用还原型谷胱甘肽(GSH)还原脂类过氧化物，从而消除自由基的毒害作用。

谷胱甘肽过氧化物酶几乎在所有组织中都有分布。在一些病理状况下谷胱甘肽过氧化物酶的活力会发生明显上调或下调。

谷胱甘肽过氧化物酶可以利用还原型谷胱甘肽(GSH)催化过氧化氢以及许多有机过氧化物，产生水或有机醇。如果以过氧化氢为底物进行检测，则同样可以分解过氧化氢的过氧化氢酶的酶活性会干扰谷胱甘肽过氧化物酶的测定。本试剂盒利用了一种间接测定的方法。谷胱甘肽过氧化物酶可以催化GSH产生GSSG，而谷胱甘肽还原酶可以利用NADPH催化GSSG产生GSH，通过检测NADPH的减少量就可以计算出谷胱甘肽过氧化物酶的活力水平。在上述反应中，谷胱甘肽过氧化物酶是整个反应体系的限速步骤，因此NADPH的减少量和谷胱甘肽过氧化物酶的活力线性相关。

本试剂盒利用了如下的反应原理，GPx为谷胱甘肽过氧化物酶，GR为谷胱甘肽还原酶，R-OOH为过氧化物。


本试剂盒提供的有机过氧化物试剂(t-Bu-OOH)在没有谷胱甘肽过氧化物酶存在的情况下不会和GSH产生反应，也不会被细胞内的过氧化氢酶催化而分解。因而可以较为特异地检测出谷胱甘肽过氧化物酶的活力。由于t-Bu-OOH不能被不含硒的谷胱甘肽过氧化物酶所催化，所以本试剂盒可以比较特异地定量检测最常见的含硒的谷胱甘肽过氧化物酶。

试剂盒组份：
样品匀浆液————————————————100ml
谷胱甘肽过氧化物酶检测缓冲液———————50ml
谷胱甘肽还原酶——————————————160μl
NADPH———————————————————15mg
还原型谷胱甘肽(GSH)————————————14mg
过氧化物试剂(t-Bu-OOH)——————————200μl

注意事项：
1. 本试剂盒检测时牵涉到氧化还原反应，所有氧化剂或还原剂都会干扰本试剂盒的测定。如果在样品中的还原剂无法避免，例如DTT、巯基乙醇等，则这些还原剂的总浓度至少低于0.1mM。0.15mM的DTT可以抑制40%的酶活力。
2. 常用的Triton X-100、Tween 20等去垢剂都含有较高水平的过氧化物，会影响本试剂盒的测定。如果必须使用这些去垢剂，最好使用纯度较高并注明含较低过氧化物的去垢剂。
3. 为消除样品中可能含有的可以消耗NADPH的酶的干扰，可以检测不加过氧化物试剂的样品作为对照。
4. 样品可以立即测定，也可以-70℃冻存待以后测定。
5. 一定要严格控制反应时的温度，否则会引起较多误差。
6. NADPH不太稳定，要严格按照后续说明操作，谨防失活。
7. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。

储存条件：-20℃，有效期一年。


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·FoxO4抗体
编号：YT777
英文名称：anti-FoxO4 antibody
规格：>20次
本抗体是用人工合成人FoxO4一段多肽经过适当修饰后免疫rabbit，然后用protein A和抗原多肽亲和柱经过两步纯化得到的高纯度抗体。本抗体如果用于常规的Western检测，至少可以检测20次。

本FoxO4抗体识别的是总FoxO4(total FoxO4)，可以检测内源性的FoxO4蛋白水平。它对磷酸化的FoxO4也敏感，但检测未磷酸化的FoxO4效果更好。

转录因子Forkhead家族蛋白与横纹肌肉瘤、急性白血病等肿瘤发生有关。该转录因子蛋白家族中的FoxO1,FoxO4和FoxO3a，和线虫同源蛋白DAF-16的序列高度相似，介导了包括IGFR1,PI3K和Akt在内的信号转导通路。Forkhead家族蛋白激活后，可通过促进细胞周期阻滞(cell cycle arrest)和细胞凋亡而抑制肿瘤。高表达Forkhead家族蛋白会导致细胞周期抑制蛋白p27Kip1的激活。同时Forkhead家族蛋白在TGF-β介导的p21CIP1上调中起作用，而该过程又可被PI3K所负调控。胰岛素等诱导的增殖信号会导致FoxO蛋白通过Akt介导的Thr24、Ser256和Ser319位点的磷酸化，导致FoxO从细胞核中转运到细胞浆中，从而抑制其转录活性。FoxO还可以被Sirt1、p300等进行乙酰化调控。

FoxO4和FoxO1和FoxO3a相似，都和急性白血病有关，都可以被Akt磷酸化修饰而从细胞核转运到细胞浆中而丧失基因转录活性。FoxO4有三个磷酸化位点，Thr32,Ser197和Ser262。Akt介导的磷酸化和Sirt1等介导的去乙酰化对FoxO4起重要调控作用。FoxO4可结合并抑制myocardin，从而抑制平滑肌细胞分化。FoxO4还可以下调低氧反应中的关键蛋白HIF-1α的蛋白水平。

产品组份：
FoxO4抗体————20μl
Western一抗稀释液————20ml

抗体参数：
免疫原物种：人
免疫原：人FoxO3a Glu50附近一段多肽
宿主：兔
用途：WB
交叉反应性：人，小鼠，大鼠，猴
FoxO4分子量：～65kD
推荐稀释比例：WB(1:1000)

注意事项：
1. 在Western实验后，请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体，包括已经使用过的稀释抗体，4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体，使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象，可以10000g离心1-3分钟，取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况，则可以考虑废弃该抗体。
3. 对于本抗体，Western检测时一抗要4℃缓慢摇动过夜，如果仅短时间与一抗孵育检测效果较差。

储存条件：-20℃，有效期一年。

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