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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
室温
- 保质期:
6个月
- 英文名:
Tissue Cell microRNA Extraction Kit
- 库存:
284
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
50次
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销售北京现货组织细胞miRNA提取试剂盒哪里买,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京现货组织细胞miRNA提取试剂盒哪里买
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
编号:ALH072
规格:50次
本试剂盒采用独特的裂解液/β-巯基乙醇迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶,强烈有机抽提去除蛋白和DNA,RNA包括微小分子RNA吸附于离心柱内特殊硅基质膜, 再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质进一步去除, 最后低盐的洗脱液将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。
近年来对RNA干扰和调节性小RNA的广泛研究迫切需要一种能有效提取15~30核苷酸左右大小RNA(包括siRNA和miRNA)的试剂盒。但是传统的RNA提取方法如硅胶膜不能有效吸附回收,酚/胍抽提和乙醇沉淀并不能有效沉淀回收微小分子RNA。本试剂盒的出现很好的解决了这一问题。
产品组分:
Lysis/Binding buffer————50ml
70%乙醇——————————9ml
Wash Solution 1——————12ml
Wash Solution 2/3—————10ml
RNase-free H2O——————10ml
吸附柱和收集———————50套
microRNA吸附柱和收集管——50套
产品特点:
1. 离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。 克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2. 也不需要乙醇沉淀等容易丧失微小分子RNA的步骤。
3. 快速,简捷,单个样品操作一般可在30分钟内完成。
4. 多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.9~2.0,基本无DNA残留,可用于RNAi,RT-PCR,Northern-blot和各种实验。
注意事项:
1. 第一次使用前请先在70%乙醇、Wash Solution 1瓶和Wash Solution 2/3瓶中加入指定量乙醇,加入后请及时打钩标记已加入乙醇,以免多次加入!
2. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13000rpm 的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
3. 需要自备乙醇,氯*(代"仿"),一次性注射器,研钵。
4. Lysis/Binding buffer 和Wash Solution 1含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
5. 预防RNase 污染,应注意以下几方面:
1) 经常更换新手套。因为皮肤经常带有细菌,可能导致RNase 污染。
2) 使用无RNase 的塑料制品和枪头避免交叉污染。
3) RNA 在裂解液中时不会被RNase 降解。但提取后继续处理过程中应使用不含RNase 的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在150℃烘烤4小时,塑料器皿可在0.5M NaOH 中浸泡10 分钟,然后用水彻底清洗,再灭菌,即可去除RNase。
4) 配制溶液应使用无RNase 的水。(将水加入到干净的玻璃瓶中,加入DEPC至终浓度0.1%( v/v),37℃放置过夜,高压灭菌。)
6. RNA 纯度及浓度检测:
完整性:RNA 可用普通琼脂糖凝胶电泳(电泳条件:胶浓度1.2%;0.5×TBE 电泳缓冲液;150v,15 分钟)检测完整性。由于细胞中70%-80%的RNA 为rRNA,电泳后UV 下应能看到非常明显的rRNA 条带。动物rRNA 大小分别约为5kb和2kb,分别相当于28S 和18S rRNA。动物RNA 样品中最大rRNA 亮度应为次大rRNA 亮度的1.5-2.0 倍,否则表示RNA 样品的降解。出现弥散片状或条带消失表明样品严重降解。
纯度:OD260/OD280 比值是衡量蛋白质污染程度的指标。高质量的RNA,OD260/OD280 读数(10mMTris, pH7.5)在1.8-2.1 之间。OD260/OD280 读数受测定所用溶液的pH 值影响。同一个RNA 样品,假定在10mM Tris,pH7.5 溶液中测出的OD260/OD280 读数1.8-2.1 之间,在水溶液中所测读数则可能在1.5-1.9之间,但这并不表示RNA 不纯。
浓度:取一定量的RNA 提取物,用RNase-free 水稀释n 倍,用RNase-free 水将分光光度计调零,取稀释液进行OD260, OD280 测定,按照以下公式进行RNA浓度的计算:终浓度(ng/μl)= (OD260)×(稀释倍数n)×40。
储存条件:室温,有效期6个月。(Lysis/Binding buffer需4℃避光保存)
本品别名:组织细胞miRNA提取试剂盒|细胞miRNA纯化试剂盒|细胞miRNA分离试剂盒|细胞microRNA提取试剂盒|细胞microRNA分离试剂盒|细胞microRNA纯化试剂盒|组织miRNA纯化试剂盒|组织miRNA分离试剂盒|组织microRNA提取试剂盒|组织microRNA分离试剂盒|组织microRNA纯化试剂盒
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·荧光定量用第一链反转录预混合液
编号:ALH264
英文名称:First strand RT-PCR premix for fluorescent quantitation
规格:20μl×50次
本品为一管式反转录预混Mix,5×RT MasterMix 中含有反转录第一链合所需的所有试剂(RTase、RNase Inhibitor、Random primers、Oligo dT Primer、dNTP Mixture、反应Buffer),加入模板RNA 和RNase-Free H2O 即可进行反应。使得cDNA 的合成更加的方便快捷,特别适合cDNA 合成以后的两步法Real Time PCR 检测。
试剂盒组分:
5 ×RT MasterMix————————0.2ml
RNase free H2O—————————1ml
产品特点:
1.体系配制简单:本产品为预混Mix形式,只需加入模板RNA和水便可以进行反应。
2.反转录效率高:特殊优化的oligo dT和N6随机引物配比,反转录效率高。
3.反转录速度快:只需42℃,20 min即可完成cDNA第一链的合成。
4.通读复杂模板:能够用于GC含量高,二级结构复杂的RNA模板,合成cDNA*(代"片")段长度最高可达12 kb。
5.后续兼容性好:后续配合荧光定量检测产品,灵敏度高、稳定性好。
储存条件:-20℃,有效期一年。
北京现货组织细胞miRNA提取试剂盒哪里买关键词:细胞miRNA纯化试剂盒,细胞miRNA分离试剂盒,细胞microRNA提取试剂盒,组织细胞miRNA提取试剂盒
·PAGE胶DNA纯化回收试剂盒
编号:ALH106
英文名称:Polyacrylamide gel DNA Recovery Kit
规格:50次
本试剂盒适用于聚丙烯酰胺凝胶DNA回收。采用新型硅基质膜离心柱及特殊的缓冲液系统,可从聚丙烯酰胺凝胶中简捷高效回收20bp-500bp的短片段DNA 片段,回收效率可高达85%。并可最大限度去除杂质,获得高纯度的DNA,所得到的 DNA 可直接用于酶切、连接、测序等后续的分子生物学试验。
试剂盒组份(50次):
平衡液————————————5ml
结合液————————————100ml
扩散缓冲液——————————30ml
漂洗液WB———————————15ml
洗脱缓冲液EB—————————15ml
吸附柱和收集管(2ml)-—————50套
试剂盒特点:
1.适用范围广泛,可以回收20bp-2kb的单链或者双链DNA。
2.使用了优质结合液,不含传统结合液的碘化*(代"钠")和高氯酸盐,不抑制回收后酶切、连接克隆等下游反应。
3.独特的配方保证了该试剂盒比一般试剂盒回收效率大大提高。
4.快速、方便离心柱型,不需要使用有毒的苯酚、氯*(代"仿")等试剂,也不需要乙醇沉淀。
注意事项
1. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机。
2. 结合液中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要立即用大量清水或者生理盐水冲洗。
3. 电泳时最好使用新的电泳缓冲液,以免影响电泳和回收效果。
4. 切胶时,紫外照射时间应尽量短,以免对DNA造成损伤。也可以选择可见光染料染色后在可见光下切胶会避免紫外对DNA损伤。
5. 回收率与片段大小、凝胶浓度、初始DNA量和洗脱体积有关。
储存条件:室温,有效期12个月。
北京现货组织细胞miRNA提取试剂盒哪里买关键词:细胞miRNA纯化试剂盒,细胞miRNA分离试剂盒,细胞microRNA提取试剂盒,组织细胞miRNA提取试剂盒
·RNA提取试剂盒(富含纤维的组织)
编号:ALH031
英文名称:RNA extraction kit for fibrous tissue
规格:20次|50次
本试剂盒适用于快速提取心脏、骨骼肌、血管、气管、皮肤和其它纤维丰富的组织RNA,采用独特的裂解液/β-巯基乙醇迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶,然后用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜, 再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除, 最后低盐的RNase free H20将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。
试剂盒特点:
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.不需要使用有毒的苯酚,氯*(代"仿")等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
3.快速,简捷,单个样品操作一般可在30分钟内完成。
4.多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.9~2.0,基本无DNA残留,可用于RT-PCR,Northern-blot和各种实验。
试剂盒组份:
| 组份 | 20次 | 50次 |
| 裂解液RLT | 20ml | 50ml |
| 去蛋白液RW1 | 15ml | 40ml |
| 漂洗液RW | 5ml | 10ml |
| RNase-free H2O | 20ml | 40ml |
| 蛋白酶K(40mg/ml)(可选) | 10mg | 20mg |
| 吸附柱和收集管 | 20套 | 50套 |
注意事项:
1. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 需要自备乙醇, β-巯基乙醇,一次性注射器,研钵,水浴锅等。
3. 裂解液RLT 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4. 预防RNase 污染,应注意以下几方面:
1) 经常更换新手套。因为皮肤经常带有细菌,可能导致RNase 污染。
2) 使用无RNase的塑料制品和枪头避免交叉污染。
3) RNA 在裂解液RLT中时不会被RNase降解。但提取后继续处理过程中应使用不含RNase的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在150℃烘烤4小时,塑料器皿可在0.5M NaOH中浸泡10分钟,然后用水彻底清洗,再灭菌,即可去除RNase。
4) 配制溶液应使用无RNase的水。(将水加入到干净的玻璃瓶中,加入DEPC 至终浓度0.1%( v/v),37℃放置过夜,高压灭菌。)
5. 关于DNA 的微量残留:
一般说来任何总RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA 的微量残留,本试剂盒RNA提取产品,由于采取了本公司独特的缓冲体系和选择了特殊吸附能力的吸附膜,在大多数RT-PCR 扩增过程中极其微量的DNA 残留(一般电泳EB 染色紫外灯下观察不可见)影响不是很大, 如果要进行严格的mRNA 表达量分析如荧光定量PCR,我们建议在进行模板和引物的选择时:
1) 选用跨内含子的引物,以穿过mRNA 中的连接区,这样DNA 就不能作为模板参与扩增反应。
2) 选择基因组DNA 和cDNA 上扩增的产物大小不一样的引物对。
3) 将RNA 提取物用RNase-free 的DNase I 处理。本试剂盒还可以用于DNase I 处理后的RNA 清洁(cleanup),请联系我们索取具体操作说明书。
4) 在步骤去蛋白液RW1 漂洗前,直接在吸附柱 上进行DNase I 处理。请联系我们索取具体操作说明书。
6. RNA纯度及浓度检测:
完整性: RNA 可用普通琼脂糖凝胶电泳(电泳条件:胶浓度1.2%;0.5×TBE 电泳缓冲液;150v,15 分钟)检测完整性。由于细胞中70%-80%的RNA 为rRNA,电泳后UV 下应能看到非常明显的rRNA 条带。动物rRNA 大小分别约为5 kb 和2kb,分别相当于28S 和18S rRNA。动物RNA 样品中最大rRNA 亮度应为次大rRNA 亮度的1.5-2.0 倍,否则表示RNA 样品的降解。出现弥散片状或条带消失表明样品严重降解。
纯度:OD260/OD280 比值是衡量蛋白质污染程度的指标。高质量的RNA,OD260/OD280 读数(10mMTris, pH7.5)在1.8-2.1 之间。OD260/OD280 读数受测定所用溶液的pH 值影响。同一个RNA 样品,假定在10mM Tris,pH7.5 溶液中测出的OD260/OD280 读数1.8-2.1 之间,在水溶液中所测读数则可能在1.5-1.9之间,但这并不表示RNA 不纯。
浓度:取一定量的RNA 提取物,用RNase-free 水稀释n 倍,用RNase-free 水将分光光度计调零,取稀释液进行OD260, OD280 测定,按照以下公式进行RNA浓度的计算:终浓度(ng/μl)= (OD260)×(稀释倍数n)×40。
储存条件:室温,有效期6个月
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