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-20°C保存
- 英文名:
DNA Polymerase I Klenow Fragment
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充足
- 供应商:
南京诺唯赞生物科技有限公司
- 规格:
5000 U
DNA Polymerase I Klenow Fragment
用于末端平滑化

Sanger双脱氧法 DNA 测序;切除 3´ 突出末端或补平 5´ 突出端;形成平末端;第二链 cDNA 合成;建库中主要进行插入片段补平

用随机引物制备探针
切除3′ 突出端或补平5′ 突出端,形成平末端

DNA 聚合酶I,大片段 (Klenow 片段)是E.coli DNA聚合酶 I 的蛋白酶水解产物,具有5´→3´ DNA 聚合酶活性和3´→5´核酸外切酶活性,但缺失了5´→3´核酸外切酶活性。Klenow片段既保留了全酶的高保真性,又不会降解 DNA 5´末端。
贮存缓冲液
25 mM Tris-HCl pH 7.4, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 50% glycerol
反应缓冲液 (10 × Blue Buffer)
100 mM Tris-HCl pH 7.9, 500 mM NaCl, 100 mM MgCl2, 10 mM DTT
来源
克隆有来自E.coli DNA Polymerase I Klenow Fragment基因的重组E. coli菌株。
单位定义
37℃、30分钟内使10 nmol的dNTP掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量,定义为1个活性单位 (U)。


反应缓冲液
10 × Blue Buffer
100 mM Tris-HCl pH 7.9 @ 25°C
500 mM NaCl
100 mM MgCl2
10 mM DTT

-20°C保存。
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文献和实验Radiolabeling of DNA with the Klenow Fragment of DNA Polymerase
The Klenow fragment of DNA polymerase I is a proteolytic fragment obtained by the treatment of DNA polymerase I with subtilisin. The fragment still has the polymerase and 3′–5′ exonuclease activity, but lacks the 5′–3′ exonuclease activity
PCR(Polymerase Chain Reaction) 即聚合酶链式反应,对于常年狂奔在实验室的实验狗来说并不陌生。那么,对于 PCR 反应的核心成份,DNA 聚合酶,你选对了吗? 常见的 DNA 聚合酶如 Taq、Phanta、Pfu、KOD、Primerstar、Klenow、Bst、Phi29 等等。根据耐热性来分可分为耐热酶和常温酶。耐热聚合酶如 Taq、Pfu、KOD、Primerstar 等,常温聚合酶包括 Klenow、Bst、Phi29 等。根据保真度来分,高保真聚合酶
Dideoxy Sequencing Reactions Using Klenow Fragment DNA Polymerase 1
Historically, DNA sequencing by primed synthesis and chain terminators has been performed using the Klenow fragment of DNA polymerase 1(1 . This enzyme was derived from E. coli . DNA Pol I which, in addition to polymerase activity, has both 3′–
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