T4 DNA Polymerase（用于末端平滑化的T4 D

T4 DNA Polymerase

用于末端平滑化

      缺口填充；切除 3´ 突出末端或补平 5´ 突出端，形成平末端

缺口填充 (无链置换活性)

切除3′突出末端或补平5′ 突出端，形成平末端

在模板及引物存在的条件下，T4 DNA聚合酶催化沿5´→3´方向合成DNA。此酶还具有3´→5´核酸外切酶的活性，该活性比DNA聚合酶I强。与DNA聚合酶I不同，T4 DNA聚合酶不具有5´→3´核酸外切酶活性。 

贮存缓冲液

10 mM Tris-HCl pH 7.4, 100 mM KCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 0.1% Triton X-100, 50% glycerol

反应缓冲液 (10 × Blue Buffer)

100 mM Tris-HCl pH 7.9, 500 mM NaCl,  100 mM MgCl2, 10 mM DTT

来源

克隆有来自T4噬菌体DNA  Polymerase基因的重组E. coli菌株。

单位定义

37℃、30分钟内使10 nmol的dNTP掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量，定义为1个活性单位 (U)。

反应缓冲液

10X Blue Buffer

100 mM Tris-HCl pH 7.9 @ 25°C

500 mM NaCl

100 mM MgCl2

10 mM DTT