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- Vazyme
- 南京
- N102-01
- 2026年01月07日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃保存。
- 英文名：
T4 Polynucleotide Kinase
- 库存：
充足
- 供应商：
南京诺唯赞生物科技有限公司
- 规格：
10000 U
T4 Polynucleotide Kinase
用于5’磷酸化
DNA 或 RNA 5´ 末端的磷酸化；DNA 或 RNA 的末端标记；除去 3´ 磷酸基团；建库中主要进行插入片段5' 磷酸化； 3´ 去磷酸化
DNA或RNA 5′末端磷酸化，以便进行连接反应
DNA或RNA的末端标记，用作探针和进行DNA测序
T4 Polynucleotide Kinase能够催化ATP的γ-磷酸基团转移到寡核苷酸链(双链或单链DNA或RNA)的5´-羟基末端以及3´-单磷酸核苷上。T4 Polynucleotide Kinase还具有3´-磷酸酶活性，将3´-磷酸基团从寡核苷酸的3´磷酸末端、脱氧3´-单磷酸核苷和脱氧3´-二磷酸核苷上水解掉。
贮存缓冲液
50 mM Tris-HCl pH 7.5, 50 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 μM ATP, 50% glycerol
反应缓冲液 (10 × T4 PNK Buffer)
700 mM Tris-HCl pH 7.6, 100 mM MgCl2, 50 mM DTT
来源
克隆有来自T4噬菌体Polynucleotide Kinase基因的重组E. coli菌株。
单位定义
37℃、30分钟内使1 nmol的[γ-32P] ATP掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位 (U)。
-20℃保存。
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文献和实验大鼠甲状腺素 (T4) 酶联免疫分析 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定大鼠血清，血浆及相关液体样本中 甲状腺素(T4) 的 含量。 实验原理： 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中 大鼠甲状腺素 (T4) 水平。用纯化的 大鼠甲状腺素 (T4) 抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入 甲状腺素 (T4) 抗原，再与 HRP 标记的 甲状腺素 (T4) 抗体
1. 探针的标记：（1） 如下设置探针标记的反应体系：待标记探针 （1.75pmol/微升） 2微升T4 Polynucleotide Kinase Buffer （10X） 1微升Nuclease-Free Water 5微升[γ-32P]ATP（3，000Ci/mmol at 10mCi/ml） 1微升T4 Polynucleotide Kinase （5-10u/微升） 1微升总体积 10微升按照上述反应体系依次加入各种试剂，加入同位素后，Vortex混匀，再加入T4
标记效率需要使用高浓度、过量的ATP。另外，即使同为平滑末端，富含AT的末端标记效率较高。 进行非标记的磷酸化反应时，请在反应液中加入终浓度1 mM的ATP。但本制品中不另添附ATP。 ↑TOP Q-3: T4 Polynucleotide Kinase的失活方法。 A-3: 本酶在70℃加热5分钟即可失活。 ↑TOP Q-4: 使用T4 PNK标记DNA时，能用〔γ-35S〕代替〔γ-35P〕ATP吗？
