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- 文献和实验
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- 保存条件:
低温运输,-20℃保存
- 保质期:
1年
- 英文名:
pBNsp-Neo-T
- 库存:
大量
- 供应商:
信裕生物
质粒编号:
质粒名称: pBNsp-Neo-T
其他名称:
质粒大小(bp): 6200
抗性:
质粒类型: Unspecified
是否病毒:
启动子:
稳转或瞬转:
组成型或诱导性:
表达水平:
蛋白标签:
测序引物:
GenBank号:
其他属性: Restriction digests of the clone give the following sizes (kb): HindIII, BamHI–3.5,2.7; EcoRI, BglII–5.6,0.6; BamHI–6.2; MluI–6.2. (ATCC staff) Constructed from the PARP promoter and 3' splice site from BNsp-CAT, neo (BglII/BamHI fragment) from pSV2neo, and a tubulin intergenic region (639 bp, blunted EcoRI/BglII) inserted into the SmaI site 3' to the termination codon of neo. Linearizing with MluI before transfection is essential for efficient integration. The MluI site is in the center of the tubulin intergenic sequence. Shuttle vector for integration by homologous recombination targeted to the beta- alpha-tubulin intergenic region of Trypanosoma brucei. (ATCC staff) Medium is 1227 LB plus ampicillin. Hosts: E.coli HB101, Trypanosoma brucei, E.coli.
质粒图谱:
质粒序列:
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文献和实验1mmol/L Hepes液中,加H2 O至10mL过滤除菌4℃保存。 (5)G418选择培养基:用含10%胎牛血清的DMEM培养液配制G418,G418浓度为200~ 800mg/L 注意:对受体细胞先做预试验,选用浓度为在10~14天内能杀死细胞50%以上的最低浓度。 2. 操作步骤 (1)供体DNA制备:方法按前介绍的DNA提取法提取,溶于TE中,40mg/L。 (2)受体细胞的培养:研究癌基因转移应选择不含人类Alu序列的动物细胞系作为受体细胞。如小鼠NIH3T3胚成纤维
2)、哺乳动物/真核表达载体 pcDNA3.1+ 不含任何标签的真核表达载体 amp/neo 5.4kb E. coli/mammals pcDNA3.1- 不含任何标签的真核表达载体 amp/neo 5.4kb E. coli/mammals pcDNA4/V5-His A, amp 含His标签的真核表达载体 amp/neo pcDNA 3.1(-) myc-hisA 含His标签的真核表达载体 amp/neo pcDNA 3.1(-) myc-hisB 含His标签
EcoR1位点存在。 2、pEGFP, 增强型绦色荧光蛋白表达载体(Enhanced Fluorecent Protein Vector) 特点: pEGFP表达载体中含有绿色荧光蛋白,在PCMV启动子驱动下,在真核细胞中高水平表达。载体骨架中的SV40 origin使该载体在任何表达SV40 T 抗原的真核细胞内进行复制。Neo抗性盒由SV40早期启动子、Tn5的neomycin/kanamycin抗性基因以及HSV-TK基因的聚腺嘌呤信号组成,能应用G418筛选稳定转染的真核
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