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| 小湿盒(29.5×10.5×4.5cm) | AMEKO | AS | 10片/个 |
上海联硕生物科技有限公司
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文献和实验我的石蜡切片又「团灭」了！没关系，专业技术人员与您并肩推塔！
1. 二甲苯脱蜡：3 × 5 min。（为确保测试时二甲苯新鲜，使用新的二甲苯）2. 乙醇水化：100% 乙醇2 × 10 min；95% 乙醇，2 × 10 min。3. 洗涤：切片浸没于ddH2O中，3 ×5 min。抗原修复4. 修复：使用200 mL ddH2O稀释后的SignalStain® EDTA Unmasking Solution#14747进行修复，根据实验室微波炉的实际情况，高火档加热2 min45sec后煮沸，立即换保温档，保温15 min。修复后切片不冷却，直接进行下一步
分钟（阻滞非特异性染色）； 12、弃去血清，滴加一抗（PBS 液稀释一抗、说明书推荐 1:50-1:500，故取浓度 1:200），置湿盒内 37℃ 孵育 1 小时； 13、PBS 液冲洗，3 分钟×3； 14、滴加 1 滴（50?l）第二抗体，室温下孵育 10 分钟； 15、PBS 冲洗，3 分钟×3； 16、滴加 1 滴（50 ul）链霉菌抗生物素—过氧化物酶溶液，室温下孵育 10 分钟； 17、PBS 冲洗，3 分钟×3； 18、滴加 2 滴（100?l）新鲜
酶（将10mg/ml的RNase A储存液稀释100倍），盖上22×22 mm盖玻片，置于37℃湿盒中孵育1小时；室温下2×SSC中振荡洗涤，5min/次×3次；梯度乙醇脱水后凉干。 2.3 靶DNA的变性 将玻片放入预温至72 ℃（每增加一张玻片，温度要提高1℃）的70 %去离子甲酰胺/2×SSC中变性2分钟后，立即置入预冷至-20 ℃保存的梯度乙醇脱水晾干。 2.4 蛋白酶消化 将50 μl 100 mg/ml
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