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蛋白质组学技术服务-质谱鉴定LC-MS/MS
- 提供商:
辉骏生物
质谱是将待测物质变为气态离子并将离子按质荷比(m/z)进行分离和分析的一种方法。液质联用技术(LC-MS/MS)结合数据库检索可以进行蛋白定性,蛋白样本可以是溶液、胶条或胶点等。
LC-MS/MS蛋白鉴定技术原理
蛋白先经胰蛋白酶消化成肽段,肽段在质谱仪中离子化后,会带上一定量的电荷,通过检测器分析,可得到各肽段的质荷比(m/z),即一级质谱图;为获得肽段更详细的序列信息,部分肽段再次被破碎和分析,产生二级质谱图。最后采用质谱检索软件选择相应的蛋白数据库,对获得的全部质谱数据进行分析,同时以打分的形式将鉴定到的蛋白依次排列。
LC-MS/MS蛋白鉴定技术流程

辉骏生物技术优势
1. 适用于相对复杂的蛋白质样本鉴定,可以一次性鉴定成百上千种蛋白质;
2. 鉴定准确性和灵敏度高。
LC-MS/MS蛋白鉴定应用范围
★IP,Co-IP,Pull-down类蛋白相互作用样本(胶条或溶液)的鉴定;
★细胞器,外泌体等简单样本中的所有表达蛋白质的鉴定(全谱分析)。
LC-MS/MS蛋白鉴定服务信息
| 项目名称 |
客户提供 |
结果交付 |
实验周期 |
|
LC-MS/MS蛋白鉴定 |
蛋白溶液(干冰运输) 蛋白胶条/胶点(冰袋运输) 广州地区可上门取样 样本信息表 |
蛋白及肽段鉴定结果表 质谱检索网页 指定肽段的质谱图 质谱原始数据 实验报告 |
2周 |
LC-MS/MS蛋白鉴定—客户发表文献
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★ LC-MS/MS蛋白修饰位点鉴定
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文献和实验上。称为X染色体的剂量补偿(参考Lyon假说)。 正常男性核型为46,XY。在男性间期细胞核中,可见位于细胞核边缘或核中央处有一极小的黄色荧光亮点,就是Y染色质(Y小体),大小约0.25~0.3μm。是Y染色体 长臂特异性着色而形成。 人的性别是由X和Y染色体决定的。需要对人的性别进行鉴定时,除进行染色体核型分析和临床生殖器官的检查外,还可以通过细胞学方法,如检查期间体细胞(口腔上皮,皮肤,羊水和血细胞等)的核内染色质——X和Y染色质来鉴定。 【实验用品】 显微镜、荧
的方法是使用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺(SDS-PAGE ) 凝胶电泳分离部分蛋白质和利用 LC-MS/MS 进行蛋白质鉴定 [ 4~6 ] 。 蛋白质组学的 MS/MS 主要采用配备一个电喷雾源的离子阱(IT ) 和四极杆飞行时间(Q-TOF) 仪器。电喷雾是利用质谱仪的金属喷针(needle) 和入口之间的电位差而产生的。这会导致喷针出口处的液滴带电。液滴蒸发成细小的喷射流后,质谱仪根据质荷比(m/Z) 可以检测离子(带电肽段)。在 Q-TOF 质谱仪中,第一个样品池将电喷雾源的离子转移到四
膜蛋白的分离、鉴定及其功能分析—GFC/IEC/SDS-PAGE 和 MALDI-TOF-MS 方法
膜蛋白微囊可能会不恰当地去除膜镶嵌蛋白质。判断膜分离过程的好坏,需要鉴定被去除掉的蛋白质。另外,如果无法去除膜外周蛋白质,那就跳过膜分离步骤,直接应用图 22-4 和 图 22-5 中表示的连续两步色谱层析(先是 GFC,然后是 AEC ) [7]。 ( 2 ) 膜蛋白增溶是一步值得花时间仔细优化的实验步骤,首先,DM 已经被越来越广泛,而且也越来越成功地应用于增溶不同生物材料中具有功能活性的膜蛋白 [ 8,9] ,因此 ,它常常被推荐用做第一个测试实验。第二,DM/蛋白质的比例以及低速搅拌
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