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- 2025年07月06日
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大量
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信裕生物
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20次
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文献和实验细菌不能利用arginine。 F’ 一个低拷贝可移动的质粒，当被M13噬菌体侵染时，可产生单链DNA。 LacI 编码lac抑制子，用于蓝白斑筛选时需加入IPTG，才可启动表达β-gal。 dam/dcm 消除了内源腺苷和鸟苷的甲基化。在此种细菌中繁殖的DNA不被甲基化 附:关于大肠杆菌 http://www.dxy.cn/bbs/thread/4335511 关于T载体 http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/1286939_1.html
的商业性试剂盒，它用于PCR 产物的克隆 和测序。其原理是利用Taq酶能够在PCR 产物的3’末端加上一个非模板依赖的A，而T载体是一种带有3’T突出端的载体，在连接酶作用下，可以快速地、一步到位地把PCR 产物直接插入到质粒载体的多克隆 位点（MCS）中。2.操作步骤⑴ 连接反应一般在灭菌的0.5ml离心管中进行。⑵ 10μl体积反应体系如下：①取T载体1μl (50ng)，加入等摩尔数PCR 产物 。②加入含ATP的10×Buffer 1μl，T4 DNA连接酶合适单位，用ddH2O 补足至10
安排】 第一天下午：配制6×电泳加样缓冲液、TAE等缓冲液，将各种耗材灭菌。 第二天上午：制备琼脂糖凝（1%），电泳检测，切胶回收DNA片段 第二天下午：大肠杆菌制备感受态细胞；DNA与T载体连接转化大肠杆菌。 第三天上午：观察转化结果（蓝白斑情况），计算重组率。 【实验报告要求与思考
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