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上海净信
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温度探针用于测量液体或气体的温度,标准T型热电偶,符合任何的鲁尔母接头、通用的迷你插座接头。可耐受剧烈振荡。独立无菌包装。一次性耗材。
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文献和实验延伸反应处于优势地位,扩增曲线正常;2. 降低延伸步骤反应温度,使其低于异源双链的熔解温度,比如延伸温度从 77℃ 降到 72℃,扩增曲线也是正常的。 图 3. 嵌入性染料法荧光定量消除「鱼钩效应」的方式 [1] 虽然能够引起「鱼钩效应」的异源双链错配程度无法估计,但单碱基水平错配还不足以引起 PCR 产物熔解温度发生明显改变。 探针法: 除了染料法,探针法荧光定量 PCR 实验也有可能产生「鱼钩效应」。采用杂交探针,扩增子链和探针之间会形成竞争,荧光信号明显下降,一般发生在模板浓度比较高、单链扩增
大于 109 计数/分/μl。六、杂交Southern 杂交一般采取的是液-固杂交方式,即探针为液相,被杂交 DNA 为固相。杂交发生于一定条件的溶液(杂交液)中并需要一定的温度,可以用杂交瓶或杂交袋并使液体不断的在膜上流动。杂交液可以自制或从公司购买,不同的杂交液配方相差较大,杂交温度也不同。下面给出的为一杂交液配方:PEG 6000 10%;SDS 0.5%;6×SSC;50% 甲酰胺。 该杂交液的杂交温度为 42 ℃。1.预杂交NC 膜浸入 2× SSC 中 5 min,在杂交瓶中加入杂交
【资源】核酸杂交(Southern blot和Nouthern blot)疑惑解析-------送给新手们的礼物
性的两条(探针和待测核苷酸序列)单链在适宜的温度及离子强度条件下,可按碱基互补配对原则特异性地复性形成双链。核酸分子杂交可在DNA与DNA、RNA与RNA或RNA与DNA的二条单链之间进行。 分类:核酸分子杂交按作用环境不同分为固相核酸分子杂交和液相核酸分子杂交。 一、固相核酸分子杂交 原理:将参加反应的一条核酸链先固定在固体支持物上,另一条游离在溶液中。固体支持物有硝酸纤维素滤膜、尼龙膜、乳胶颗粒、磁珠和微孔板等。固相杂交时,未杂交的游离片段很容易漂洗除去,膜上的杂交物容易检测并能防止靶DNA










