- ￥260 - 3332
- 翌圣生物（Yeasen）
- 上海
- 12601ES
- 2025年11月04日
企业认证
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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
4℃
- 保质期：
有效期1年
- 英文名：
Hieff NGSTM DNA Selection Beads(Superior AMPure XP Alternative)
- 库存：
大量
- 供应商：
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 规格：
1ml (CAT#12601ES03)/5mL(CAT#12601ES08)/60mL(CAT#12601ES56)
| 规格： | 1ml (CAT#12601ES03) | 产品价格： | ￥260.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 5mL(CAT#12601ES08) | 产品价格： | ￥595.0 |
| 规格： | 60mL(CAT#12601ES56) | 产品价格： | ￥3332.0 |
产品描述
Hieff NGS® DNA Selection Beads基于SPRI (Solid Phase Reverse Immobilization)原理，配合精心优化过的缓冲体系，可用于二代测序文库构建过程中的DNA片段分选、纯化。本产品可适用于各品牌的DNA、RNA建库试剂盒，和目前广泛使用的AMPure XP Beads使用方式相同，片段回收效率和文库大小分布均与AMPure XP Beads高度吻合。
运输与保存方法
冰袋运输。2-8℃保存，效期一年。避免冷冻！
注意事项
1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2）磁珠使用前须在室温平衡至少30 min。
3）80%乙醇需现用现配，否则将影响回收效率。
4）进行长度分选时，初始样品体积需≥100μL，不足时请用超纯水补齐。样品体积太小，将导致移液误差增大，进而影响分选的准确性。
5) 本产品仅用作科研用途！
使用方法
1. 准备工作
将磁珠由冰箱中取出，室温平衡至少30 min。配制80%乙醇。
2. 长度分选（双轮法）
长度分选操作流程如图1所示，具体操作如下。
图1双轮分选操作流程
1）请涡旋振荡或充分颠倒磁珠以保证混匀。
2）根据要求，参考表1向DNA溶液中加入第一轮分选磁珠，涡旋混匀或移液器吹打10次混匀。
3）室温孵育5 min。
4）将离心管短暂离心并置于磁力架中，待溶液澄清后（约5 min），小心转移上清到干净的离心管中。
注意：转移上清时，请残留2 μL液体于管底，切勿全部吸出上清，避免吸到磁珠并影响分选效果。
举例：当初始体积为100 μL，第一轮使用0.8×比例，即加入80 μL磁珠，推荐吸出178 μL的上清。
5）参考表1向上清中加入第二轮分选磁珠。
6）涡旋混匀或移液器吹打10次混匀，室温静置5 min。
7）将离心管短暂离心并置于磁力架中，待溶液澄清后（约5 min），小心移除上清。
8）保持离心管始终处于磁力架中，加入200 μL新鲜配制的80%乙醇漂洗磁珠，室温孵育30 s，小心移除上清。
9）重复步骤8。
10）保持离心管始终处于磁力架中，开盖干燥磁珠至刚刚出现龟裂（约5 min）。
注意：切记磁珠不要干燥时间太久，磁珠干燥过度将影响纯化效果。
11）将离心管从磁力架中取出，加入适量ddH2O（≥20 μL），涡旋振荡或使用移液器轻轻吹打充分混匀，室温孵育5 min。
12）将离心管短暂离心并置于磁力架中分离磁珠和液体。待溶液澄清后（约5 min），小心吸取上清至干净的管中，即完成分选。
3. DNA片段分选参考条件
通过超声法将小牛胸腺DNA进行片段化，制备100-1000 bp的Smear片段，根据表1进行双轮分选。结果使用Agilent 2100 Bioanalyzer进行分析（图2）。
表1磁珠文库分选推荐比例
| DNA片段大小 | 250-350 bp | 320-420 bp | 450-550 bp | 550-700 bp | 700-900 bp | 800-1000 bp |
| 第一轮体积比（Beads:DNA） | 0.80× | 0.70× | 0.60× | 0.55× | 0.50× | 0.45× |
| 第二轮体积比（Beads:DNA） | 0.20× | 0.20× | 0.20× | 0.15× | 0.15× | 0.15× |
注：表中“×”表示样品DNA体积。如文库插入片段长度为250 bp，样品DNA体积为100mL，则第一轮分选磁珠使用体积为0.80×100 mL=80 mL；第二轮分选磁珠使用体积为0.20×100 mL=20 mL。
图2 Agilent 2100 high sensitivity DNA chip electopherogram
Smear fragments溶于ddH2O，使用0.80×/0.20×至0.45×/0.15×磁珠进行片段分选
Q：12601可以用来纯化DNA吗？
A：可以纯化150bp以上的DNA片段，如果纯化的DNA中含有较多的150bp以下的建议用货号12600的产品，可以纯化50bp以上的DNA。
Q：12601可以分选1Kb或以上的DNA片段吗？
A：需要自行摸索体系，目前筛选的片段范围确定的体系为说明中的体系，其它片段分选的可以参考说明书中的分选体系调整。
Q： 不小心将磁珠放到-20℃，但未结冰，是否可以继续使用？
A：长时间冻住不建议使用，因为低温会破坏磁珠的结构，短时间冻融一次NGS文库分选和纯化性能影响不大，但实际以具体测试结果为准。
Q：磁珠未开封的时候 4℃保存，开封后一直室温保存使用，是否会影响磁珠的回收性能？
A：室温放置对磁珠的回收性能会有一定影响，不建议室温放置太久，使用完后建议 4℃ 保存。PEG 分离效果易受 pH、温度等影响。
Q：磁珠纯化原理
A：DNA 分选纯化磁珠是基于一种固相载体可逆化固定（SPRI）的技术，磁珠buffer中一般包含：磁珠、DNA、PEG、盐离子（主要是 Na+）等。DNA分子在PEG和NaCl作用下，会脱水缩合导致DNA构象改变并发生聚集沉淀，带负电荷的，当使用无酶水或TE等低盐和低PEG含量的缓冲液时可以洗脱结合的DNA分子。
Q：磁珠分选的原理
A：不同PEG和盐离子浓度下，不同长度DNA的构象不同，且长片段DNA带有更多负电荷，因此磁珠一般会优先吸附大片段DNA。分选一般需要加两轮磁珠，第一轮磁珠结合分子量较大的DNA，通过丢弃磁珠去除这部分产物，此时目的大小DNA在上清中；第二轮磁珠结合剩余产物中分子量较大的DNA，通过丢弃上清去除分子量较小的DNA，此时目的大小DNA在磁珠上，通过两轮磁珠达到分选的目的。
Q：12601可以纯化或回收150bp以下的片段吗？
A：不建议使用12601，建议使用12600，最低可回收100bp左右的片段，50bp以上的回收率可能会有影响。
Q：是否可以纯化单链DNA，该使用多少磁珠？
A：磁珠可以吸附双链DNA和单链DNA，但不能区分单链或双链DNA。磁珠纯化单链DNA的倍数可以参考双链的说明书。
Q：是否是选择性吸附DNA，可以去除样本中的RNA吗？
A：12601ES是非特异性吸附磁珠，也会吸附RNA，如果要去除RNA,需要用RNase A处理。
Q：可以用于RNA纯化和分选吗？
不建议使用，虽然磁珠也可以吸附RNA片段，但磁珠Buffer是根据DNA特性设计的，不利于RNA结构的稳定，RNA纯化建议使用RNA纯化磁珠（货号12602ES)。
Q：磁珠回收率低可能的原因是什么？
A：1）磁珠与DNA 混匀不充分，未能充分吸附。建议反应体系充分混匀；
2）磁珠比例不对，建议按照说明书进行选择合适的比例；
3）孵育时间不足，保证孵育时间至少 5 min；
4）磁珠分选时，二轮磁珠吸附的时候吸到磁珠。可在 200μL枪头前串联 10μL枪头用于移液，可防止吸到磁珠；
5）磁珠洗涤时的乙醇非现配，导致乙醇浓度过低，建议乙醇浓度不低于 70%，小片段不低于80%；
6）干燥过度：磁珠长时间干燥导致表面龟裂，DNA 难以洗脱，得率降低；建议干燥时间不宜过长，表面刚出现龟裂即可；
7）洗脱液体积不足：最终洗脱液应完全覆盖管内磁珠。
8）样本原因：样本纯度低，有杂质，样本中含有较多杂质时，可能会导致磁珠聚团板结，导致洗脱不充分，可以用枪头尽量吹散磁珠，延长洗脱时间，增加产物回收率；样本中含有较多大片段，大片段会导致磁珠聚团，洗脱时可以延长时间，必要时可以37度孵育，提升得率。
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文献和实验[1]He J, Liu T, Wang W, Wu X, Wang J, Yan W. Comprehensive improvement of soil quality and rice yield by flooding-midseason drying-flooding. Appl Microbiol Biotechnol. 2022;106(21):7347-7359. doi:10.1007/s00253-022-12184-7(IF:5.560)
[2]Wang X, Yuan Q, Zhang W, et al. Sequence specific integration by the family 1 casposase from Candidatus Nitrosopumilus koreensis AR1. Nucleic Acids Res. 2021;49(17):9938-9952. doi:10.1093/nar/gkab725(IF:19.160)
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Targeted Exon Sequencing by In‐Solution Hybrid Selection
for cleaning DNA with AMPure beads (see protocol 1 ), agarose gel electrophoresis (unit 2.7 ), and DNA quantitation ( appendix 3D ) Basic Protocol 3: Hybrid
RAMPAGE: Promoter Activity Profiling by Paired‐End Sequencing of 5′‐Complete cDNAs
) 10 M NaOH (Sigma‐Aldrich, cat. no. 72068‐100ML) Agencourt AMPure XP kit (Beckman Coulter, cat. no. A63881)
易行。”细胞增殖检测方法基于EdU与Apollo®荧光染料的完美结合准确检测新合成的DNA，简单，快速，准确。这种检测方法非常快速，且只需简单的几个步骤，因此也适用于高通量筛选试验，如在药物筛选中检测加药后细胞的活力。 EdU可以检测新合成的DNA，而EU则可以检测新合成的RNA。EU是一种尿嘧啶核苷类似物，能够在RNA转录时期代替尿嘧啶( U )渗入正在合成的RNA分子，基于EU与Apollo®荧光染料的特异性反应进行RNA检测。EU能够在体内和体外水平检测时间和空间上RNA合成的变化，能够更
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