产品描述 Hieff NGS® DNA Fragmentation Reagent是针对二代测序高通量测序平台设计的新一代酶切法建库试剂。本品采用高质量的片段化酶,摆脱了繁琐的超声过程,同时简化了操作流程,将片段化模块与末端修复/加A模块合二为一,极大的降低了建库的时间和成本。可应用于50 ng-1 μg常规动植物基因组、微生物基因组等样本,在单管内实现DNA的片段化、末端修复和A尾添加反应。反应产物无需纯化,即可使用Hieff NGS® Rapid DNA Ligation Module for Kit(Cat#13580)进行文库构建中接头连接反应。
适用50 ng-1 μg的基因组DNA
高质量片段化酶,可随机切割双链DNA,酶切片段无偏好性
片段化、末端修复/加A一步完成
严格的批次性能与稳定性质控
产品组分
组分编号
组分名称
24 T
96 T
10000 T
13507-A
Smearase® Buffer
240 μL
960 μL
100 mL
13507-B
Smearase® Enzyme
120 μL
480 μL
50 mL
运输与保存方法 干冰运输。-20℃保存,有效期18个月。 注意事项 1. 本试剂盒兼容范围为50 ng – 1 μg Input DNA。应尽可能使用A260/A280 = 1.8-2.0的高质量Input DNA。 2. 若Input DNA中引入高浓度金属离子螯合剂或其他盐,可能会影响后续实验,建议将DNA稀释在TE(10 mM Tris-HCl ,1 mM EDTA,pH 8.0)中进行片段化。 3. 对于常规的高质量基因组DNA,酶切时间参考表1。本试剂盒片段化偏好低,耐受各种GC含量的模板。 表1 常规基因组DNA片段化时间推荐表
【注】:*DNA片段化过程为有效控制片段化效果,避免过度酶切,反应程序可预先设置4℃,待模块温度降至4℃时,将PCR管放入PCR仪即可。**对于完整的基因组DNA,酶切时间参考表1。 5. 产物如需纯化,可使用Hieff NGS® DNA Selection Beads(Cat#12601)或AMPure XP Beads(Cat#A63880)或其他等效产品。也可以直接驳接Hieff NGS® Rapid DNA Ligation Module for Kit(Cat#13580)试剂盒,进行接头连接。详细说明请见后者的说明书。 参考实例 使用本试剂盒对200 ng Human gDNA (NA12878) 样本进行酶切检测,片段化结果见下图。 HB221228