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文献和实验的突变。 通过 PCR 进行基因分型也是对癌症和遗传病中的 突变进行遗传分析的一个基本方式。 3.分子克隆 PCR 被广泛应用于目标 DNA 片段的克隆，该技术被称为 PCR 克隆。在直接 PCR 克隆中，DNA（如，gDNA、cDNA、质粒 DNA）的目标区域被扩增并插入到特殊设计的兼容载体中。 图 4.PCR 克隆：通过 PCR 制备的插入片段被克隆到兼容载体中。（A） 直接 PCR 克隆技术包括 TA 和平端克隆。（B）间接 PCR 克隆，扩增子可在插入到兼容载体之前被修饰，如进行限制
一、 目的 学习几种小规模制备质粒DNA的技术，比较这几种方法所制备的几种质粒DNA的效果。 二、 原理 在介绍的载体中，有PUC系列、PBS与PBR322均属拷贝数较高的质粒，只要用小规模制备一次的质粒DNA，就有足够的量用于常规的基因工程操作。小规模制备质粒DNA的特点是可以一次制备多种质粒DNA(12—24个不同的质粒DNA样品)，速度快，时间省，步骤简化，DNA纯度好，可以用于酶切、连接，甚至多纯化
扩增，以反应阳性的最大稀释度 作为病毒水平，缺点是不能给出病毒的绝对拷贝数.后有作者用含有已知量的HIV序列的质粒DNA作为模板进行系列PCR反应，然后以扩增产物量对初始模板量得出标准曲线;待测标本用相同体系扩增后从标准曲线中求得所加标本量，从而推算出样品中HIV的感染水平.但在反应过程中既使严格控制实验条件和操作步骤，同一份标本在不同的试管内也存在着扩增的差异，即所谓的“试管效应”，因此，为了使PCR定量客观标准化，又引入了内参照来消除这种差异，如利用HLADQα基因与HIV感染标本
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