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- YLKBIO
- YLK-ZL0112
- 国产
- 2025年07月13日
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- 技术资料
- 库存：
100
- 英文名：
pBluescript II-SK(+)
- 保质期：
90天
- 供应商：
优利科（上海）生命科学有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
质粒干粉
产品名称：pBluescript II-SK(+)质粒
产品规格：质粒干粉
有效期：90天，请尽快转化。
保存温度：一般在-20℃，置于-80℃保存时间更长。
运输方式：常温运输，1周内。
应用领域：科研
生长条件：LB+氨苄青霉素，37℃（克隆菌株DH5α，2961bp）
注意事项：转化前请准确查找该质粒相应的抗性、感受态和培养温度。（请向客服QQ索要质粒信息目录）
1.溶解： 收到质粒干粉后，请加入 20μl 无菌水至管底，溶解质粒，室温静置 1min；
2.混合（吸附质粒）： 200μl 感受态细胞 + 质粒 DNA 5~10μl 混匀，冰上放置 30min；
3.热激导入： 42℃静置 90s；
4.收缩膜孔： 冰浴 2min；
5.修复培养： 毎管加 800μl LB 液体培养基，37 ℃培养 1h 150 r/min；
6.筛选培养： 将适当体积（100 μl）的复苏细胞，涂布在相应抗性的 LB 平板上，正置平皿 30min（琼脂面务必干燥后）， 倒置培养 12-16h，出现菌落。
7.提取： 挑取单克隆菌落至相应抗性 LB 液体培养基中，震荡培养 12-16h，根据试验需要提取质粒。
pBluescript II-SK(+)质粒培养基：LB+50mcg/ml氨苄青霉素：酵母膏 5.0g，蛋白胨 10.0g，NaCl 10.0g，蒸馏水 1.0L，pH 7.0。121℃，15min灭菌。灭菌结束后，培养基冷却至40-50℃时加入氨苄青霉素，浓度50mcg/ml。
| pUC19-CCR5人源基因质粒 |
| pMD18-SNAI2人源基因质粒 |
| pMD18-TGFBR2人源基因质粒 |
| pHaMDRwt人源基因质粒 |
| pUC18-hCD40LG人源基因质粒 |
| SCN7A人源基因质粒 |
| pUC57-IGF1(145-354)人源基因质粒 |
| GSK3B人源基因质粒 |
| TRAF6-S12F人源基因质粒 |
| Smad3人源基因质粒 |
| DACH1人源基因质粒 |
| PCSK9人源基因质粒 |
| pCMV-SPORT6-C1QBP人源基因质粒 |
| pCMV-SPORT6-SNF8人源基因质粒 |
| pCMV-SPORT6-CDK9（1同义突变）人源基因质粒 |
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文献和实验cDNA文库组标准流程八:pBlueScript cDNA库扩增
1 ．试剂及配方： 2 x LB （1升）： 20g 氯化钠 20g 蛋白提取物 10g 酵母提取物 加入蒸馏水至1升，用NaOH调pH值至7.0，高压灭菌 2 x LB－甘油（12.5%）（200ml） 175ml 2 x LB液体 25ml 甘油（100％） 加入蒸馏水至200ml，压灭菌，置于4℃备用
Site-Directed Mutagenesis with LA-PCR Technology
) (pBluescript� II SK(�), KS (�)) and pGEM� vectors (Promega, Madison, WI) (pGEM�-3Zf,4Z) by adding the advantage of LA-PCR technology™ (TaKaRa Shuzo Co., Kyoto, Japan). The protocol uses a combination of a primer designed for introducing a mutation at the target
被有效裂解。解决方法：可用经典碱裂解法抽提质粒 DNA 方法中的 II 液替代 Solution II 使用。 3.出现严重的 RNA 污染？ （1）未在 Solution I 中事先加入 RNase A1。解决方法：补加 RNase A1。 （2）加入 RNase A 1的 Solution I 长期保存于室温，导致 RNase A1 活性下降。 （3）细菌过量, RNase A1 不能有效降解 RNA。解决方法：将细菌用量减半或增加 RNase A1 在 Solution I 中
