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- 保存条件:
负20度
- 保质期:
2年
- 英文名:
pCMV-Gag-pol
- 库存:
100
- 供应商:
kelei-bio
- 规格:
20μl
启动子: CMV
终止子: hGH poly(A) signal
质粒分类: 病毒系列,逆转录病毒包装载体
质粒大小: 11kb
质粒标签: gag-pol
原核抗性: Amp
克隆菌株: Stbl3
培养条件: 37℃,有氧 LB
表达宿主: 哺乳细胞
诱导方式: 无须诱导,瞬时表达
5'测序引物: CMV-F:CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG
3'测序引物: hGH-PA-R: CCAGCTTGGTTCCCAATAGA
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文献和实验基因编辑再次升级!领域大牛刘如谦 Cell 发文开发新工具,可安全高效进行体内基因编辑
选获得 v3.4 BE-eVLPs 系统。 最后,研究人员发现,不同包装质粒间的化学计量比也会影响 BE-eVLP 系统的编辑效果。为了调节这种化学计量学,他们改变了 gag-3xNES-ABE8e 与转染 VLP 的野生型 MMLV gag-pro-pol 质粒的比例。结果发现 gag-pro-pol 质粒与 gag-3XNES-ABE8e 质粒的摩尔比例为 1:3 时获得最佳的碱基编辑效率,并命名为第四代 BE-eVLPs 系统(v4 BE-eVLPs)。 随后的实验也证明,v
一、材料和试剂 1. Hairpin-pLKO.1vector(OpenBiosystems) 2. Packagingvectors:第二代包装质粒包含gag,pol,和rev基因(pCMV-dR8.91或pCMV-dR8.74psPAX2)和包被质粒(pMD2.G)(Addgene) 3. 脂质体2000(Invitrogen) 4.OptiMEM无血清培养基(Invitrogen) 5. 293T包装细胞(ATCC)
装进病毒、最终进到靶细胞那段。 pspAX2:包装质粒,表达 gag、pol、rev 等结构蛋白和酶(含整合酶)。pspAX2 是吉凯采用的辅助质粒之一。 pMD2.G:包膜质粒,表达 VSV-G 包膜糖蛋白。VSV-G 具有较广的适用范围,让病毒能感染几乎所有哺乳动物细胞,这也是慢病毒宿主范围宽的原因。 (第四质粒视系统而定,有时 rev 独立表达;部分方案把 rev 并入 pspAX2。) 这几个质粒按比例共转染进 293T 细胞后,gag/pol 负责组装衣壳、rev 负责把未剪接的病毒
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