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T4 RNA 连接酶 2,截短型 K227Q促销

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  • ¥100 - 3680
  • 百奥莱博
  • 北京
  • SV1382
  • 2025年07月12日
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    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 规格

      10KU|2KU

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    T4 RNA 连接酶 2,截短型 K227Q促销由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于生化科学研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多T4 RNA 连接酶 2,截短型 K227Q等工具酶产品请联系我司咨询订购。


    名称:T4 RNA 连接酶 2,截短型 K227Q促销
    产地:国产|进口
    编号:SV1382
    规格:10KU|2KU
    特性:
    将预腺苷化的 DNA 或 RNA 序列标签连接到任何 RNA 3´ 末端
    将单链腺苷化引物连接至小 RNA 上,用于 cDNA 文库构建
    将单链腺苷化引物连接至 RNA 上,用于链特异性 cDNA 文库构建
    概述:
    T4 RNA 连接酶 2,截短型 KQ(T4 Rnl2tr KQ)能特异性将 5´ 末端预腺苷化的 DNA 或 RNA 连接到 RNA 的 3´ OH 末端。反应无需 ATP,但需预腺苷化接头。
    T4 Rnl2tr KQ 是 T4 RNA 连接酶 2,截短型(M0242)的双点突变体。K227 的突变降低了赖氨酰腺苷化。由于降低了 T4 Rnl2tr 从接头将腺苷基团转移到 RNA 5´ 磷酸基的活性,K227Q 可以减少 T4 Rnl2tr 非特异性的连接(串联体和环)。在 T4 Rnl2tr K227Q 中进一步突变 R55K,提高了酶的连接活性,使其与野生型 T4 Rnl2tr 连接活性水平一致。
    连接反应的背景被降为最低是因为:不再使用 ATP,而改用预腺苷化接头,同时降低赖氨酰腺苷化酶的活性。该酶已用于二代测序 small RNA 的文库构建中,优化了接头的连接过程。
    来源:
    重组 E. coli 菌株,携带有 MBP 融合表达的质粒,该质粒克隆有含编码 T4 RNA 连接酶 2 的前 249 个氨基酸编码。T4 Rnl2tr K227Q 将 227 位的赖氨酸突变为谷氨酸。T4 Rnl2tr KQ 分别在 55 和 227 位置进行了突变,精氨酸突变为赖氨酸、赖氨酸突变为谷氨酰胺。
    反应条件:
    1X T4 RNA 连接酶反应缓冲液
    [50 mM Tris-HCl (pH 7.5 @ 25℃),10 mM MgCl2,1 mM DTT],25℃ 温育。
    热失活:65℃ 20 分钟。
    随酶提供的试剂:
    10X T4 RNA 连接酶反应缓冲液
    50% PEG 8000
    质保声明:
    无单链和双链 DNA 核酸外切酶、核酸内切酶、RNase 以及磷酸酶的污染。
    单位定义:
    200 单位指 10 μl 反应体系中,25℃ 条件下,1 小时能将 80% 的 31-mer RNA 连接到预腺苷化 17-mer DNA 末端 [miRNA 通用克隆接头(S1315)] 所需的酶量。单位活性检测条件请联系我们咨询。
    浓度:
    200,000 units/ml。

    关于T4 RNA 连接酶 2,截短型 K227Q促销的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:

    ·低分子量 DNA Ladder
    编号:SV1290
    规格:500gel lanes|100gel lanes|50gel lanes
    特性:
    我公司为琼脂糖凝胶电泳提供一系列分子量从 25 bp 到 48.5 kb 的 DNA Ladder。
    室温稳定
    条带清晰均一
    易于识别的参照带
    提供一管凝胶上样染料,紫色(6X)
    样品粗略定量
    浓度:
    2-Log 和 50 bp 的 DNA Ladders 为 1,000 μg/ml。1kb、100 bp 和低分子量 DNA Ladder 为 500 μg/ml。 PCR Marker 为 300 μg/ml。Fast DNA Ladder 为 25 μg/ml。

    ·T4 多聚核苷酸激酶
    编号:SV1047
    英文名称:T4 poly nucleotide kinase
    规格:2500U|500U|250U
    特性:
    DNA 或 RNA 5´ 末端的磷酸化,以便进行连接反应。
    DNA 或 RNA 的末端标记,用作探针和进行 DNA 测序
    用 T4 多聚核苷酸激酶(M0201)除去 3´ 磷酸基团
    T4 多聚核苷酸激酶(缺失 3´ 磷酸酶活性)(M0236)将 3´ 端已经磷酸化的单核苷酸 5´ 磷酸化,制备pNp 底物,用于添加到 DNA 或 RNA的 3´ 端
    用 T4 多聚核苷酸激酶(缺失 3´ 磷酸酶活性)(M0236)对 3´ 端有磷酸基团的寡核苷酸的 5´ 端进行标记
    概述:
    T4 多聚核苷酸激酶能够催化 ATP 的 γ-位磷酸基团转移到寡核苷酸链(双链或单链 DNA 或 RNA)的 5´ -羟基末端以及 3´ -单磷酸核苷上。T4 多聚核苷酸激酶(M0201)还具有 3´ 磷酸酶活性,将 3´ -磷酸基团从寡核苷酸的 3´ 磷酸末端、脱氧 3´ -单磷酸核苷和脱氧 3´ -二磷酸核苷上水解掉。经修饰后的酶(M0236)具有所有激酶的活性,但是缺失了 3´ 磷酸酶活性。
    来源:
    重组 E. coli 菌株,克隆有 T4 多聚核苷酸激酶或修饰的 T4 多聚核苷酸激酶基因。
    反应条件:
    1X T4 多聚核苷酸激酶反应缓冲液
    [70 mM Tris-HCl(pH 7.6 @ 25℃),10 mM MgCl2,5 mM DTT],37℃ 温育。
    热失活:65℃ 加热 20 分钟。
    注意事项:
    达到最佳酶活力,需要新鲜缓冲液(在旧缓冲液中,由于氧化造成的 DTT 含量减少会降低酶活力)。
    放射性标记反应:
    50 μl 反应体系中,用 1X T4 多聚核苷酸激酶反应缓冲液、50 pmol 的 γ-[32P] ATP 和 20 单位的酶 37℃ 温育 30 分钟可催化 1-50 pmol 的 5´ 末端磷酸化。[33P] ATP 可代替 [32P] ATP 作标记反应。
    CTP、GTP、TTP、UTP、dATP 及 dTTP 均可替代 ATP 作为磷酸供体。
    DNA 或 RNA 磷酸化反应(放射性和非放射性)操作流程请联系我们咨询。
    要提高平齐末端或 5´ 凹陷末端的磷酸化效率,可在加入 T4 多聚核苷酸激酶前,先将 DNA 溶液于 70℃ 加热 5 分钟,然后冰上冷却,并加入 5%(W/V)的 PEG-8,000。
    T4 多聚核苷酸激酶需要 ATP 才能发挥活性,但是为了适用于高活力的放射性标记反应:,在随酶提供的反应缓冲液中不含 ATP。
    一般来说,进行激酶反应之后是连接反应。在这种情况下,T4 多聚核苷酸激酶反应在连接酶反应缓冲液中 37℃ 温育 30 分钟即可。反应后的产物可直接进行连接,无需改变缓冲液和进行热失活。如果连接时需要保持其它 DNA 片段的去磷酸化状态,则需要在连接反应前热失活 T4 多聚核苷酸激酶。
    质保声明:
    T4 多聚核苷酸激酶和 T4 多聚核苷酸激酶(3´ 磷酸酶活性缺失)经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。
    单位定义:
    1 单位即 1 个 Richardson 单位,指 37℃条件下,30 分钟内催化 1 nmol 酸不溶性 [32P] 掺入所需要的酶量(1)。
    浓度:
    10,000 units/ml。


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    ·pGLuc-Basic 2 载体
    编号:SV1661
    规格:20μg
    概述:
    所有 GLuc 载体和质粒包含一个人源化的 Gaussia 荧光素酶编码序列,可以在哺乳动物细胞中进行最佳表达。
    克隆载体:
    pGLuc-Basic 2 载体不含启动子;pGLuc Mini-TK 2 载体含有一小段启动子片段,来源:于单纯疱疹病毒(HSV)胸苷激酶,位于 Gaussia 荧光素酶编码序列上游。将启动子或增强子克隆进入两种载体的多克隆位点(MCS),便可进行启动子和增强子的活性测试。
    pTK-GLuc 载体含有单纯疱疹病毒(HSV)胸苷激酶启动子,用于组成型表达 GLuc。在该载体的 GLuc 终止密码子和多聚腺苷酸信号之间包含一段 MCS。被克隆进入 3´ UTR 的序列将成为 GLuc mRNA 的一部分。RNAi 或 miRNA 靶位点等序列可插入 GLuc 的 3´ 非翻译区,以评价 RNAi 或 miRNA的靶序列。
    另外,所有的载体(pSV40-GLuc 对照质粒除外)均携带有一个新霉素(Neomycin)抗性标记,用以产生稳定的转染细胞系。
    对照质粒:
    pCMV-GLuc 2 对照质粒携带有一个组成型的巨细胞病毒(CMV)启动子,可在许多类型的细胞中启动高水平的表达。pCMV-GLuc 2 可以在单独转染实验或与其它报告载体联合使用中作为阳性对照。
    pSV40-GLuc 对照质粒在猿猴病毒 40(SV40)启动子控制下组成型表达 GLuc。可以作为转染实验中的阳性对照。该质粒不携带选择标记。
    来源:
    GLuc 载体和对照质粒经过标准质粒纯化程序,分离自 E. coli 菌株 ER2272。
    浓度:
    500 μg/ml。


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    BTN130424 SP交换介质 SP Medium
    PY02-212 亚硫酸盐-多粘菌素-磺胺嘧啶琼脂基础 250克
    氯化胆固醇 TDZ 910-31-6
    BL0949 胶体金标记羊抗人IgG抗体
    ARB12979 小鼠纤连蛋白(FN)Elisa方法检测 Mouse fibronectin,fn ELISA KIT
    SJ0719 1×pbs
    BL1348 TMB单组分显色液
    ARB12318 大鼠低密度脂蛋白(LDL)elisa检测 Rat low density lipoprotein,ldl ELISA KIT
    10035-04-8 Calcium Chloride  氯化钙
    硫酸铝钾 PMBP 7784-24-9
    ARB11750 人嗜酸性白血球相关之RNA水解酵素家族成员3(EAR3)血清中含量检测 Human eosinophIL-associated ribonuclease a family member 3,ear3 ELISA KIT
    SJ0245 Doxycycline-HCL 盐酸强力霉素
    PY01-108 七号胆盐 25克
    PC4901 miRNA 荧光定量PCR检测试剂盒

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