BL21-AI大肠杆菌表达菌

基因型： F– ompT gal dcm lon hsdSB(rB- mB-) araB::T7RNAP-tetA 基本信息： 抗性：Tet 培养基：LB 菌株类别：大肠杆菌 培养条件：37℃，有氧，LB 质粒转化：42℃热激 保存方式：20%甘油，-20℃ 基本应用：用于蛋白表达 备注： 菌株简介： BL21-AI是一种大肠杆菌表达菌株，来源于BL21菌株，是大肠杆菌B/r型菌株（E.coli B/r）。在araBAD操纵子的araB位点含有T7 RNA聚合酶基因，T7 RNA聚合酶基因的表达可以通过L-阿拉伯糖或者葡萄糖来调节，但菌株不含有lon蛋白酶。BL21-AI菌株的最大蛋白表达量往往低于BL21(DE3)。BL21-AI是膜外蛋白酶ompT的缺陷型菌株，该酶的缺失能够有效防止表达的异源目的蛋白在细菌体内的降解。 Brian Caliendo (Voigt 实验室)报道过pCP20质粒比较难于转化到这个感受态细胞中，而pCP20转化到其他菌株中都很正常，但是菌体原因未知。 使用L-阿拉伯糖诱导araBAD启动子下游的蛋白表达。使用葡萄糖可以抑制araBAD启动子下游的蛋白表达。注意:即使不加葡萄糖，BL21-AI细胞的araBAD启动子下游的本底蛋白表达水平仍然很低，加入葡萄糖后能够进一步的降低本底蛋白的表达水平。 BL21-AI感受态细胞适用于任何以T7启动子为基础的表达载体，能够进行高水平的重组蛋白表达。 因为菌株体内的T7 RNA聚合酶水平能够进行有效调节，BL21-AI感受态细胞能够有效表达对其他BL21细胞有毒或生长抑制的蛋白。从BL21-AI菌株中获得目的重组蛋白产量，和其他BL21菌株产量相当。 建议选择该菌株进行蛋白表达的条件如下： 1、你在使用T7启动子载体（高拷贝或者低拷贝都可以）进行蛋白表达。 2、使用其他BL21进行蛋白表达时，你观察到明显的细菌生长的抑制作用。3、你在表达一个已知的毒性蛋白。