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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温
- 保质期:
三年
- 英文名:
pET-42b(+)
- 库存:
60
- 供应商:
信裕生物
- 规格:
5ug质粒
基本信息
| 别名: | pET42b, pet 42b, pET-42b(+) |
|---|---|
| 质粒类型: | 大肠杆菌表达载体 |
| 表达水平: | 高 |
| 克隆方法: | 多克隆位点,限制性内切酶 |
| 载体大小: | 5929bp (查看载体序列) |
| 5' 测序引物: | T7 |
| 5' 测序引物序列: | 5'-TAATACGACTCACTATAGGG-3' |
| 载体标签: | N-GST, N-His, C-His |
| 载体抗性: | Kanamycin (卡那霉素) |
| 备注: |
含有GST融合蛋白;N端Thrombin蛋白酶切位点; 含有N端Factor Xa蛋白酶切位点 ; pET 42 a,b,c 的差异仅在多克隆位点区域。
|
订购信息
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
|---|---|---|---|
| XY1228 | pET-42b(+) | 5ug质粒 |
¥1000.00 |
质粒图谱
载体描述
The pET-42 series is designed for cloning and high-level expression of peptide sequencesfused with the 220 aa GST•Tag™ protein. Unique sites are shown on the circle map. Note that thesequence is numbered by the pBR322 convention, so the T7 expression region is reversed on thecircle map. The cloning/expression region of the coding strand transcribed by T7 RNA polymeraseis shown below. The f1 origin is oriented so that infection with helper phage will produce virionscontaining single stranded DNA that corresponds to the coding strand. Therefore, single strandedsequencing should be performed using the T7 terminator primer (cat. no. 69337-3). Vector encodedsequence can be completely removed when cloning into the PshAI site (as shown below) and thencleaving the GST fusion protein with Factor Xa.
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文献和实验加热灭活酶。通过凝胶提取试剂盒纯化消化的pET-32α(+)载体骨架和从pMD18-T载体切下的基因片段。用T4 DNA连接酶在23℃下用pET-32α(+)载体骨架连接基因片段1小时,载体末端和插入末端的比例为1:3(fmol)。将10μl连接反应与100μl感受态大肠杆菌 BL21(DE3)在冰上混合10分钟,并将混合物在42℃下孵育90秒。加入800μlLB并在37°C下孵育40分钟。涂在含有100μg/ ml氨苄青霉素的LB平板上。在37°C孵育过夜。通过菌落PCR筛选插入物的存在或制备
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