| 出品公司: | ZYbscience |
|---|---|
| 载体名称: | pgRNA-bacteria |
| 质粒类型: | CRISPR/Cas9载体；细菌基因敲除载体 |
| 高拷贝/低拷贝: | 高拷贝 |
| 插入位点: | 限制性内切酶，多克隆位点 |
| 启动子: | J23119(SpeI) |
| 载体大小: | 2584 bp |
| 5' 测序引物及序列: | -- |
| 3' 测序引物及序列: | -- |
| 载体标签: | mRFP (N-ter） |
| 载体抗性: | Ampicillin |
| 克隆菌株: | Top10 |
| 宿主细胞（系）: | 细菌，如大肠杆菌 |
| 备注: | |
| 产品目录号: | #44251 |
| 稳定性: | 稳表达 |
| 组成型/诱导型: | 组成型 |
| 病毒/非病毒: | 非病毒 |
- ¥1000
- ZYbscience
- 中国/美国
- ZY
- 2025年07月13日
11 年钻石会员
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃低温保存
- 保质期：
三年
- 英文名：
pgRNA-bacteria
- 库存：
20
- 供应商：
泽叶生物
载体基本信息
载体质粒图谱和多克隆位点信息
载体简介
载体序列
LOCUS pgRNA-bacteria 2584 bp DNA SYN
DEFINITION pgRNA-bacteria
ACCESSION
KEYWORDS
SOURCE
ORGANISM other sequences; artificial sequences; vectors.
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..2584
/organism="pgRNA-bacteria"
/mol_type="other DNA"
misc_feature complement(285..302)
/label="pTrcHis_rev_primer"
misc_feature complement(285..302)
/label="pBAD_rev_primer"
terminator 335..492
/label="rrnB_terminator"
terminator 458..501
/label="rrnB_T1_terminator"
gene complement(1484..2344)
/label="Ampicillin"
/gene="Ampicillin"
CDS complement(1484..2344)
/label="ORF frame 1"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGY
IELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVE
YSPVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRL
DRWEPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPL
LRSALPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIA
EIGASLIKHW*"
promoter complement(2386..2414)
/label="AmpR_promoter"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGY
IELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVE
YSPVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRL
DRWEPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPL
LRSALPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIA
EIGASLIKHW*"
ORIGIN
1 gAATTCTAAA GATCTTTGAC AGCTAGCTCA GTCCTAGGTA TAATACTAGT AACTTTCAGT
61 TTAGCGGTCT GTTTTAGAGC TAGAAATAGC AAGTTAAAAT AAGGCTAGTC CGTTATCAAC
121 TTGAAAAAGT GGCACCGAGT CGGTGCTTTT TTTGAAGCTT GGGCCCGAAC AAAAACTCat
181 ctcagaagag gatctgaata gcgccgtcga ccatcatcat catcatcatt gagtttaaac
241 ggtctccagc ttggctgttt tggcggatga gagaagattt tcagcctgat acagattaaa
301 tcagaacgca gaagcggtct gataaaacag aatttgcctg gcggcagtag cgcggtggtc
361 ccacctgacc ccatgccgaa ctcagaagtg aaacgccgta gcgccgatgg tagtgtgggg
421 tctccccatg cgagagtagg gaactgccag gcatcaaata aaacgaaagg ctcagtcgaa
481 agactGGGCC TTTCGTTTTA TCTGTTGTTT GTCGGTGAAC TGGATCCTTA CTCGAGTCTA
541 GACTGCAGgc ttcctcgctc actgactcgc tgcgctcggt cgttcggctg cggcgagcgg
601 tatcagctca ctcaaaggcg gtaatacggt tatccacaga atcaggggat aacgcaggaa
661 agaacatgtg agcaaaaggc cagcaaaagg ccaggaaccg taaaaaggcc gcgttgctgg
721 cgtttttcca Caggctccgc ccccctgacg agcatcacaa aaatcgacgc tcaagtcaga
781 ggtggcgaaa cccgacagga ctataaagat accaggcgtt tccccctgga agctccctcg
841 tgcgctctcc tgttccgacc ctgccgctta ccggatacct gtccgccttt ctcccttcgg
901 gaagcgtggc gctttctcat agctcacgct gtaggtatct cagttcggtg taggtcgttc
961 gctccaagct gggctgtgtg cacgaacccc ccgttcagcc cgaccgctgc gccttatccg
1021 gtaactatcg tcttgagtcc aacccggtaa gacacgactt atcgccactg gcagcagcca
1081 ctggtaacag gattagcaga gcgaggtatg taggcggtgc tacagagttc ttgaagtggt
1141 ggcctaacta cggctacact agaaggacag tatttggtat ctgcgctctg ctgaagccag
1201 ttaccttcgg aaaaagagtt ggtagctctt gatccggcaa acaaaccacc gctggtagcg
1261 gtggtttttt tgtttgcaag cagcagatta cgcgcagaaa aaaaggatct caagaagatc
1321 ctttgatctt ttctacgggg tctgacgctc agtggaacga aaactcacgt taagggattt
1381 tggtcatgag attatcaaaa aggatcttca cctagatcct tttaaattaa aaatgaagtt
1441 ttaaatcaat ctaaagtata tatgagtaaa cttggtctga cagttaccaa tgcttaatca
1501 gtgaggcacc tatctcagcg atctgtctat ttcgttcatc catagttgcc tgactccccg
1561 tcgtgtagat aactacgata cgggagggct taccatctgg ccccagtgct gcaatgatac
1621 cgcgagaccc acgctcaccg gctccagatt tatcagcaat aaaccagcca gccggaaggg
1681 ccgagcgcag aagtggtcct gcaactttat ccgcctccat ccagtctatt aattgttgcc
1741 gggaagctag agtaagtagt tcgccagtta atagtttgcg caacgttgtt gccattgcta
1801 caggcatcgt ggtgtcacgc tcgtcgtttg gtatggcttc attcagctcc ggttcccaac
1861 gatcaaggcg agttacatga tcccccatgt tgtgcaaaaa agcggttagc tccttcggtc
1921 ctccgatcgt tgtcagaagt aagttggccg cagtgttatc actcatggtt atggcagcac
1981 tgcataattc tcttactgtc atgccatccg taagatgctt ttctgtgact ggtgagtact
2041 caaccaagtc attctgagaa tagtgtatgc ggcgaccgag ttgctcttgc ccggcgtcaa
2101 tacgggataa taccgcgcca catagcagaa ctttaaaagt gctcatcatt ggaaaacgtt
2161 cttcggggcg aaaactctca aggatcttac cgctgttgag atccagttcg atgtaaccca
2221 ctcgtgcacc caactgatct tcagcatctt ttactttcac cagcgtttct gggtgagcaa
2281 aaacaggaag gcaaaatgcc gcaaaaaagg gaataagggc gacacggaaa tgttgaatac
2341 tcatactctt cctttttcaa tattattgaa gcatttatca gggttattgt ctcatgagcg
2401 gatacatatt tgaatgtatt tagaaaaata aacaaatagg ggttccgcgc acatttcccc
2461 gaaaagtgcc acctgacgtc taagaaacca ttattatcat gacattaacc tataaaaata
2521 ggcgtatcac gaggcagaat ttcagataaa aaaaatcctt agctttcgct aaggatgatt
2581 tctg
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文献和实验相关实验
我在两处看到GST-融合蛋白表达的方法有些困惑（主要集中在前几步）希望大家讨论。 1、 1）将带外源DNA的pGEX载体转化入感受态，LB/Amp生长12-15hr。 2）挑克隆于2mlLB/Amp中3-5hr 3）加入100mmol/L IPTG至终浓度0.1mmol/L诱导表达，继续3-5hr 4）。。。 5）。。。 2、1）On the first day, transform E. coli strain DH5α with the pGEX2TK–ER fusion
三句话读懂一篇 CNS：新冠病毒或导致男性过度免疫反应；间歇性禁食能够延寿并降低多种疾病风险
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这一方法简单, 省钱, 不用酚/氯仿, 可用于酶切鉴定和转染细胞测试表达情况(尤其是直接观察表达情况的荧光表达载体). 具体操作步骤如下: Miniprep Plasmid Extraction 1. Grow bacteria O/N at 37°C with vigorous aeration in 3 ml LB or 2xYT with appropriate antibiotic. 2. Harvest by micro-centrifugation at maximum
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