- ¥1000
- XYbscience
- 中国/美国
- XY1609
- 2025年07月09日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
常温
- 保质期：
三年
- 英文名：
pTK-Hyg
- 库存：
60
- 供应商：
信裕生物
- 规格：
5ug质粒
基本信息
| 质粒类型: | 四环素调控系统 |
|---|---|
| 克隆方法: | 多克隆位点，限制性内切酶 |
| 载体大小: | 5066 bp (查看载体序列) |
| 载体抗性: | Ampicillin (氨苄青霉素) |
| 筛选标记: | Hyg |
订购信息
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
|---|---|---|---|
| XY1609 | pTK-Hyg | 5ug质粒 |
¥1000.00 |
质粒图谱
载体描述
pTK-Hyg is a selection vector that confers hygromycin resistance in mammalian cells for the selection of stably transformed cells. pTK-Hyg is especially useful for selection of double-stable cell lines using the Tet-On® or Tet-Off® Gene Expression Systems because the absence of an enhancer element on pTK-Hyg prevents the unwanted activation of pTRE- and pBI-derived plasmids upon cointegration into the host cell's genome.
载体应用
pTK-Hyg can be cotransfected into the host cell line with an expression plasmid that contains a gene of interest using any standard transfection technique. Most mammalian cell lines require 200 μg/ml of Hygromycin to select for stably transformed cells.
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文献和实验上应该是neo resistance）的载体，指载有降解新霉素的基因，新霉素作用于原核和真核细胞，对两者都有杀伤作用。用于转染后，稳定表达外源基因细胞的阳性筛选。标有amp（实际上应该是amp resistance）的载体，指载有降解氨苄青霉素的基因（β－内酰胺酶），作用于原核细胞，只对敏感菌有作用。用于克隆菌的筛选。除此之外，用于克隆菌的筛选的还可能有氯霉素（标有Cm），卡那霉素（标有kana）；用于阳性细胞筛选的还可能有潮霉素（标有Hyg），等等。。。所以不管是做细菌克隆，还是其后的做细胞
细胞，只对敏感菌有作用。用于克隆菌的筛选。 除此之外，用于克隆菌的筛选的还可能有氯霉素(标有Cm)，卡那霉素(标有kana); 用于阳性细胞筛选的还可能有潮霉素(标有Hyg)，等等。。。 所以不管是做细菌克隆，还是其后的做细胞表达都要根据载体的说明选择相应抗生素，不是可以随便用的。 做细胞表达时，如果只是要求短时表达(即所谓瞬时转染)，可不必用细胞抗生素。 mikke_2000认为： 应该是质粒转染细胞，筛选出稳定表达新基因的细胞
1双元载体的农杆菌转化 1.1农杆菌感受态细胞的制备 1.1.1. 取-70℃保存的EHA105于含50μg/ml链霉素平板划线，28℃培养。 1.1.2. 挑取单菌落接种于5ml YM液体培养基中，220rpm 28℃振荡培养12-16 hr。 1.1.3. 取2ml菌液转接于100ml YM液体培养基中，28℃220rpm振荡培养至OD600=0.5。 1.1.4. 转入无菌离心管，5000rpm离心5min,去上清液。 1.1.5. 加入10ml预冷的0.1M的CaCl2溶液
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