| 出品公司: | ZYbscience |
|---|---|
| 载体名称: | pTK-hyg |
| 质粒类型: | 哺乳细胞表达；四环素调控载体 |
| 高拷贝/低拷贝: | -- |
| 启动子: | -- |
| 克隆方法: | 多克隆位点，限制性内切酶 |
| 载体大小: | 5.1kb |
| 5' 测序引物及序列: | -- |
| 3' 测序引物及序列: | -- |
| 载体标签: | -- |
| 载体抗性: | Amp |
| 筛选标记: | Hyg |
| 备注: | -- |
| 产品目录号: | ZY6153-1 |
| 稳定性: | -- |
| 组成型: | -- |
| 病毒/非病毒: | -- |
- ¥900
- ZYbscience
- 中国/美国
- ZY 6153-1
- 2025年07月06日
11 年钻石会员
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃低温保存
- 保质期：
三年
- 英文名：
pTK-hyg
- 库存：
20
- 供应商：
泽叶生物
载体基本信息
载体质粒图谱和多克隆位点信息
载体简介
载体序列
CTGGCGTAAT AGCGAAGAGG CCCGCACCGA TCCAGACATG ATAAGATACA TTGATGAGTT TGGACAAACC ACAACTAGAA TGCAGTGAAA AAAATGCTTT ATTTGTGAAA TTTGTGATGC TATTGCTTTA TTTGTAACCA TTATAAGCTG CAATAAACAA GTTAACAACA ACAATTGCAT TCATTTTATG TTTCAGGTTC AGGGGGAGGT GTGGGAGGTT TTTTAAAGCA AGTAAAACCT CTACAAATGT GGTATGGCTG ATTATGATCC CCAGGAAGCT CCTCTGTGTC CTCATAAACC CTAACCTCCT CTACTTGAGA GGACATTCCA ATCATAGGCT GCCCATCCAC CCTCTGTGTC CTCCTGTTAA TTAGGTCACT TAACAAAAAG GAAATTGGGT AGGGGTTTTT CACAGACCGC TTTCTAAGGG TAATTTTAAA ATATCTGGGA AGTCCCTTCC ACTGCTGTGT TCCAGAAGTG TTGGTAAACA GCCCACAAAT GTCAACAGCA GAAACATACA AGCTGTCAGC TTTGCACAAG GGCCCAACAC CCTGCTCATC AAGAAGCACT GTGGTTGCTG TGTTAGTAAT GTGCAAAACA GGAGGCACAT TTTCCCCACC TGTGTAGGTT CCAAAATATC TAGTGTTTTC ATTTTTACTT GGATCAGGAA CCCAGCACTC CACTGGATAA GCATTATCCT TATCCAAAAC AGCCTTGTGG TCAGTGTTCA TCTGCTGACT GTCAACTGTA GCATTTTTTG GGGTTACAGT TTGAGCAGGA TATTTGGTCC TGTAGTTTGC TAACACACCC TGCAGCTCCA AAGGTTCCCC ACCAACAGCA AAAAAATGAA AATTTGACCC TTGAATGGGT TTTCCAGCAC CATTTTCATG AGTTTTTTGT GTCCCTGAAT 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AGTGTATGCG GCGACCGAGT TGCTCTTGCC CGGCGTCAAC ACGGGATAAT ACCGCGCCAC ATAGCAGAAC TTTAAAAGTG CTCATCATTG GAAAACGTTC TTCGGGGCGA AAACTCTCAA GGATCTTACC GCTGTTGAGA TCCAGTTCGA TGTAACCCAC TCGTGCACCC AACTGATCTT CAGCATCTTT TACTTTCACC AGCGTTTCTG GGTGAGCAAA AACAGGAAGG CAAAATGCCG CAAAAAAGGG AATAAGGGCG ACACGGAAAT GTTGAATACT CATACTCTTC CTTTTTCAAT ATTATTGAAG CATTTATCAG GGTTATTGTC TCATGAGCGG ATACATATTT GAATGTATTT AGAAAAATAA ACAAATAGGG GTTCCGCGCA CATTTCCCCG AAAAGTGCCA CCTGACGTCT AAGAAACCAT TATTATCATG ACATTAACCT ATAAAAATAG GCGTATCACG AGGCCCTTTC GTCTTCAAGA ATTCTCATGT TTGACAGCTT ATCATC
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文献和实验相关实验
上应该是neo resistance）的载体，指载有降解新霉素的基因，新霉素作用于原核和真核细胞，对两者都有杀伤作用。用于转染后，稳定表达外源基因细胞的阳性筛选。标有amp（实际上应该是amp resistance）的载体，指载有降解氨苄青霉素的基因（β－内酰胺酶），作用于原核细胞，只对敏感菌有作用。用于克隆菌的筛选。除此之外，用于克隆菌的筛选的还可能有氯霉素（标有Cm），卡那霉素（标有kana）；用于阳性细胞筛选的还可能有潮霉素（标有Hyg），等等。。。所以不管是做细菌克隆，还是其后的做细胞
细胞，只对敏感菌有作用。用于克隆菌的筛选。 除此之外，用于克隆菌的筛选的还可能有氯霉素(标有Cm)，卡那霉素(标有kana); 用于阳性细胞筛选的还可能有潮霉素(标有Hyg)，等等。。。 所以不管是做细菌克隆，还是其后的做细胞表达都要根据载体的说明选择相应抗生素，不是可以随便用的。 做细胞表达时，如果只是要求短时表达(即所谓瞬时转染)，可不必用细胞抗生素。 mikke_2000认为： 应该是质粒转染细胞，筛选出稳定表达新基因的细胞
1双元载体的农杆菌转化 1.1农杆菌感受态细胞的制备 1.1.1. 取-70℃保存的EHA105于含50μg/ml链霉素平板划线，28℃培养。 1.1.2. 挑取单菌落接种于5ml YM液体培养基中，220rpm 28℃振荡培养12-16 hr。 1.1.3. 取2ml菌液转接于100ml YM液体培养基中，28℃220rpm振荡培养至OD600=0.5。 1.1.4. 转入无菌离心管，5000rpm离心5min,去上清液。 1.1.5. 加入10ml预冷的0.1M的CaCl2溶液
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