| 出品公司: | ZYbscience |
|---|---|
| 载体名称: | pAAVMCS, pAAV-MCS, pAAV MCS |
| 质粒类型: | 腺病毒相关载体 |
| 表达水平: | 高 |
| 启动子: | CMV |
| 克隆方法: | 多克隆位点,限制性内切酶 |
| 载体大小: | 4650 bp |
| 5' 测序引物及序列: | CMV-F: 5'-CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG-3' |
| 3' 测序引物及序列: | hGH-PA-R: CCAGCTTGGTTCCCAATAGA |
| 载体标签: | -- |
| 载体抗性: | 氨苄 |
| 备注: | -- |
| 产品目录号:ZY | 410 |
| 稳定性: | / |
| 组成型: | -- |
| 病毒/非病毒: | 腺病毒 |
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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃低温保存
- 保质期:
三年
- 英文名:
pAAV-MCS
- 库存:
20
- 供应商:
泽叶生物
pAAVMCS载体基本信息
pAAVMCS载体质粒图谱和多克隆位点信息

pAAVMCS载体简介
pAAVMCS载体序列
LOCUS pAAV-MCS 4650 bp DNA circular SYN 13-Aug-2013
DEFINITION pAAV-MCS
ACCESSION
KEYWORDS
SOURCE
ORGANISM other sequences; artificial sequences; vectors.
COMMENT This file is created by Vector NTI
http://www.biofeng.com/
COMMENT VNTAUTHORNAME|biofeng.com|
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..4650
/organism="pAAV-MCS"
/mol_type="other DNA"
misc_feature 225..512
/label="CAG_enhancer"
misc_feature 678..698
/label="CMV_fwd_primer"
promoter 679..748
/label="CMV_promoter"
misc_feature 722..741
/label="pCEP_fwd_primer"
misc_feature 724..748
/label="LNCX_primer"
promoter 691..810
/label="CMV2_promoter"
misc_feature 820..1312
/label="bGlob_int"
terminator 1395..1873
/label="hGH_PA_terminator"
rep_origin 2145..2451
/label="f1_origin"
misc_feature 2719..2741
/label="pGEX_3_primer"
promoter 2900..2928
/label="AmpR_promoter"
CDS 2970..3830
/label="Ampicillin"
/gene="Ampicillin"
/note="ORF frame 3"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGY
IELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVE
YSPVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRL
DRWEPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPL
LRSALPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIA
EIGASLIKHW*"
gene 2970..3830
/label="Ampicillin"
/gene="Ampicillin"
rep_origin 3985..4604
/label="pBR322_origin"
ORIGIN
1 CCTGCAGGCA GCTGCGCGCT CGCTCGCTCA CTGAGGCCGC CCGGGCAAAG CCCGGGCGTC
61 GGGCGACCTT TGGTCGCCCG GCCTCAGTGA GCGAGCGAGC GCGCAGAGAG GGAGTGGCCA
121 ACTCCATCAC TAGGGGTTCC TGCGGCCGCA CGCGTGGAGC TAGTTATTAA TAGTAATCAA
181 TTACGGGGTC ATTAGTTCAT AGCCCATATA TGGAGTTCCG CGTTACATAA CTTACGGTAA
241 ATGGCCCGCC TGGCTGACCG CCCAACGACC CCCGCCCATT GACGTCAATA ATGACGTATG
301 TTCCCATAGT AACGTCAATA GGGACTTTCC ATTGACGTCA ATGGGTGGAG TATTTACGGT
361 AAACTGCCCA CTTGGCAGTA CATCAAGTGT ATCATATGCC AAGTACGCCC CCTATTGACG
421 TCAATGACGG TAAATGGCCC GCCTGGCATT ATGCCCAGTA CATGACCTTA TGGGACTTTC
481 CTACTTGGCA GTACATCTAC GTATTAGTCA TCGCTATTAC CATGGTGATG CGGTTTTGGC
541 AGTACATCAA TGGGCGTGGA TAGCGGTTTG ACTCACGGGG ATTTCCAAGT CTCCACCCCA
601 TTGACGTCAA TGGGAGTTTG TTTTGCACCA AAATCAACGG GACTTTCCAA AATGTCGTAA
661 CAACTCCGCC CCATTGACGC AAATGGGCGG TAGGCGTGTA CGGTGGGAGG TCTATATAAG
721 CAGAGCTCGT TTAGTGAACC GTCAGATCGC CTGGAGACGC CATCCACGCT GTTTTGACCT
781 CCATAGAAGA CACCGGGACC GATCCAGCCT CCGCGGATTC GAATCCCGGC CGGGAACGGT
841 GCATTGGAAC GCGGATTCCC CGTGCCAAGA GTGACGTAAG TACCGCCTAT AGAGTCTATA
901 GGCCCACAAA AAATGCTTTC TTCTTTTAAT ATACTTTTTT GTTTATCTTA TTTCTAATAC
961 TTTCCCTAAT CTCTTTCTTT CAGGGCAATA ATGATACAAT GTATCATGCC TCTTTGCACC
1021 ATTCTAAAGA ATAACAGTGA TAATTTCTGG GTTAAGGCAA TAGCAATATT TCTGCATATA
1081 AATATTTCTG CATATAAATT GTAACTGATG TAAGAGGTTT CATATTGCTA ATAGCAGCTA
1141 CAATCCAGCT ACCATTCTGC TTTTATTTTA TGGTTGGGAT AAGGCTGGAT TATTCTGAGT
1201 CCAAGCTAGG CCCTTTTGCT AATCATGTTC ATACCTCTTA TCTTCCTCCC ACAGCTCCTG
1261 GGCAACGTGC TGGTCTGTGT GCTGGCCCAT CACTTTGGCA AAGAATTGGG ATTCGAACAT
1321 CGATTGAATT CCCCGGGGAT CCTCTAGAGT CGACCTGCAG AAGCTTGCCT CGAGCAGCGC
1381 TGCTCGAGAG ATCTACGGGT GGCATCCCTG TGACCCCTCC CCAGTGCCTC TCCTGGCCCT
1441 GGAAGTTGCC ACTCCAGTGC CCACCAGCCT TGTCCTAATA AAATTAAGTT GCATCATTTT
1501 GTCTGACTAG GTGTCCTTCT ATAATATTAT GGGGTGGAGG GGGGTGGTAT GGAGCAAGGG
1561 GCAAGTTGGG AAGACAACCT GTAGGGCCTG CGGGGTCTAT TGGGAACCAA GCTGGAGTGC
1621 AGTGGCACAA TCTTGGCTCA CTGCAATCTC CGCCTCCTGG GTTCAAGCGA TTCTCCTGCC
1681 TCAGCCTCCC GAGTTGTTGG GATTCCAGGC ATGCATGACC AGGCTCAGCT AATTTTTGTT
1741 TTTTTGGTAG AGACGGGGTT TCACCATATT GGCCAGGCTG GTCTCCAACT CCTAATCTCA
1801 GGTGATCTAC CCACCTTGGC CTCCCAAATT GCTGGGATTA CAGGCGTGAA CCACTGCTCC
1861 CTTCCCTGTC CTTCTGATTT TGTAGGTAAC CACGTGCGGA CCGAGCGGCC GCAGGAACCC
1921 CTAGTGATGG AGTTGGCCAC TCCCTCTCTG CGCGCTCGCT CGCTCACTGA GGCCGGGCGA
1981 CCAAAGGTCG CCCGACGCCC GGGCTTTGCC CGGGCGGCCT CAGTGAGCGA GCGAGCGCGC
2041 AGCTGCCTGC AGGGGCGCCT GATGCGGTAT TTTCTCCTTA CGCATCTGTG CGGTATTTCA
2101 CACCGCATAC GTCAAAGCAA CCATAGTACG CGCCCTGTAG CGGCGCATTA AGCGCGGCGG
2161 GTGTGGTGGT TACGCGCAGC GTGACCGCTA CACTTGCCAG CGCCCTAGCG CCCGCTCCTT
2221 TCGCTTTCTT CCCTTCCTTT CTCGCCACGT TCGCCGGCTT TCCCCGTCAA GCTCTAAATC
2281 GGGGGCTCCC TTTAGGGTTC CGATTTAGTG CTTTACGGCA CCTCGACCCC AAAAAACTTG
2341 ATTTGGGTGA TGGTTCACGT AGTGGGCCAT CGCCCTGATA GACGGTTTTT CGCCCTTTGA
2401 CGTTGGAGTC CACGTTCTTT AATAGTGGAC TCTTGTTCCA AACTGGAACA ACACTCAACC
2461 CTATCTCGGG CTATTCTTTT GATTTATAAG GGATTTTGCC GATTTCGGCC TATTGGTTAA
2521 AAAATGAGCT GATTTAACAA AAATTTAACG CGAATTTTAA CAAAATATTA ACGTTTACAA
2581 TTTTATGGTG CACTCTCAGT ACAATCTGCT CTGATGCCGC ATAGTTAAGC CAGCCCCGAC
2641 ACCCGCCAAC ACCCGCTGAC GCGCCCTGAC GGGCTTGTCT GCTCCCGGCA TCCGCTTACA
2701 GACAAGCTGT GACCGTCTCC GGGAGCTGCA TGTGTCAGAG GTTTTCACCG TCATCACCGA
2761 AACGCGCGAG ACGAAAGGGC CTCGTGATAC GCCTATTTTT ATAGGTTAAT GTCATGATAA
2821 TAATGGTTTC TTAGACGTCA GGTGGCACTT TTCGGGGAAA TGTGCGCGGA ACCCCTATTT
2881 GTTTATTTTT CTAAATACAT TCAAATATGT ATCCGCTCAT GAGACAATAA CCCTGATAAA
2941 TGCTTCAATA ATATTGAAAA AGGAAGAGTA TGAGTATTCA ACATTTCCGT GTCGCCCTTA
3001 TTCCCTTTTT TGCGGCATTT TGCCTTCCTG TTTTTGCTCA CCCAGAAACG CTGGTGAAAG
3061 TAAAAGATGC TGAAGATCAG TTGGGTGCAC GAGTGGGTTA CATCGAACTG GATCTCAACA
3121 GCGGTAAGAT CCTTGAGAGT TTTCGCCCCG AAGAACGTTT TCCAATGATG AGCACTTTTA
3181 AAGTTCTGCT ATGTGGCGCG GTATTATCCC GTATTGACGC CGGGCAAGAG CAACTCGGTC
3241 GCCGCATACA CTATTCTCAG AATGACTTGG TTGAGTACTC ACCAGTCACA GAAAAGCATC
3301 TTACGGATGG CATGACAGTA AGAGAATTAT GCAGTGCTGC CATAACCATG AGTGATAACA
3361 CTGCGGCCAA CTTACTTCTG ACAACGATCG GAGGACCGAA GGAGCTAACC GCTTTTTTGC
3421 ACAACATGGG GGATCATGTA ACTCGCCTTG ATCGTTGGGA ACCGGAGCTG AATGAAGCCA
3481 TACCAAACGA CGAGCGTGAC ACCACGATGC CTGTAGCAAT GGCAACAACG TTGCGCAAAC
3541 TATTAACTGG CGAACTACTT ACTCTAGCTT CCCGGCAACA ATTAATAGAC TGGATGGAGG
3601 CGGATAAAGT TGCAGGACCA CTTCTGCGCT CGGCCCTTCC GGCTGGCTGG TTTATTGCTG
3661 ATAAATCTGG AGCCGGTGAG CGTGGGTCTC GCGGTATCAT TGCAGCACTG GGGCCAGATG
3721 GTAAGCCCTC CCGTATCGTA GTTATCTACA CGACGGGGAG TCAGGCAACT ATGGATGAAC
3781 GAAATAGACA GATCGCTGAG ATAGGTGCCT CACTGATTAA GCATTGGTAA CTGTCAGACC
3841 AAGTTTACTC ATATATACTT TAGATTGATT TAAAACTTCA TTTTTAATTT AAAAGGATCT
3901 AGGTGAAGAT CCTTTTTGAT AATCTCATGA CCAAAATCCC TTAACGTGAG TTTTCGTTCC
3961 ACTGAGCGTC AGACCCCGTA GAAAAGATCA AAGGATCTTC TTGAGATCCT TTTTTTCTGC
4021 GCGTAATCTG CTGCTTGCAA ACAAAAAAAC CACCGCTACC AGCGGTGGTT TGTTTGCCGG
4081 ATCAAGAGCT ACCAACTCTT TTTCCGAAGG TAACTGGCTT CAGCAGAGCG CAGATACCAA
4141 ATACTGTCCT TCTAGTGTAG CCGTAGTTAG GCCACCACTT CAAGAACTCT GTAGCACCGC
4201 CTACATACCT CGCTCTGCTA ATCCTGTTAC CAGTGGCTGC TGCCAGTGGC GATAAGTCGT
4261 GTCTTACCGG GTTGGACTCA AGACGATAGT TACCGGATAA GGCGCAGCGG TCGGGCTGAA
4321 CGGGGGGTTC GTGCACACAG CCCAGCTTGG AGCGAACGAC CTACACCGAA CTGAGATACC
4381 TACAGCGTGA GCTATGAGAA AGCGCCACGC TTCCCGAAGG GAGAAAGGCG GACAGGTATC
4441 CGGTAAGCGG CAGGGTCGGA ACAGGAGAGC GCACGAGGGA GCTTCCAGGG GGAAACGCCT
4501 GGTATCTTTA TAGTCCTGTC GGGTTTCGCC ACCTCTGACT TGAGCGTCGA TTTTTGTGAT
4561 GCTCGTCAGG GGGGCGGAGC CTATGGAAAA ACGCCAGCAA CGCGGCCTTT TTACGGTTCC
4621 TGGCCTTTTG CTGGCCTTTT GCTCACATGT
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文献和实验加、减、换一个载体 的MCS的位点 (给一个表达 载体加、减、换小表达标签,如His6, His10,strep II等,和MCS改造是一样的),其实技术 不是问题,问题在于位点的选择 ,因为载体设计 时应该设计者也考虑过mcs的问题,应该给使用者越多的选择越好,但为什么有的载体只给有限的几个位点呢,一可能是这个载体其他部位本身含有的限制性切点比较多,因而MCS位置的选择比较少,二就是设计者是自用的载体,没有考虑到我们的感受 。 因此如果你要加、减、换MCS,可以按一下几个步骤进行
―――按功能分成:(1)克隆载体 都有一个松弛的复制子,能带动外源基因,在宿主细胞中复制扩增。它是用来克隆和扩增 DNA 片段(基因)的载体。(所以有时实验时扩增效率低下,要注意是不是使用的严谨行载体) (2)表达载体 具有克隆载体的基本元件(ori,Ampr,Mcs 等)还具有转录/翻译所必需的 DNA 顺序的载体。 ―――按进入受体细胞类型分:(1)原核载体(2)真核载体(3)穿梭载体(sbuttle vector)指在两种宿主生物体内复制的载体分子,因而可以运载目的基因(穿梭往返两种
除了Ad共转染的需求。辅助质粒表达AAV的rep和cap基因和Ad E2A、VAI和E4基因。当辅助质粒在没有Ad感染的情况下共转染到人293细胞中,rAAV载体产量超过了pAAV/Ad包装质粒的80倍。另外,有复制能力的AAV在rAAV制备过程中少于0.00125%。此系统的主要优点是(1)无需感染性的腺病毒(2)只使用两个质粒就提高了转染效率和载体的产出。我们相信该双质粒转染系统因其简便性和高产出而使AAV载体系统能被更广泛地使用。该系统尤其将对多rAAV载体的临床前分析有用 1.简介 腺相关
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