| 出品公司: | ZYbscience |
|---|---|
| 载体名称: | pTRE-Tight |
| 质粒类型: | 哺乳细胞表达;四环素调控载体 |
| 高拷贝/低拷贝: | -- |
| 启动子: | -- |
| 克隆方法: | 多克隆位点,限制性内切酶 |
| 载体大小: | 2605bp |
| 5' 测序引物及序列: | -- |
| 3' 测序引物及序列: | -- |
| 载体标签: | -- |
| 载体抗性: | 氨苄青霉素(Ampicillin) |
| 筛选标记: | -- |
| 备注: | -- |
| 产品目录号: | ZY631059 |
| 稳定性: | -- |
| 组成型: | 诱导型 |
| 病毒/非病毒: | -- |
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃低温保存
- 保质期:
三年
- 英文名:
pTRE-Tight
- 库存:
20
- 供应商:
泽叶生物
载体基本信息
载体质粒图谱和多克隆位点信息
载体简介
载体序列
LOCUS pTRE-tight 2605 bp DNA SYN
DEFINITION pTRE-tight
ACCESSION
KEYWORDS
SOURCE
ORGANISM other sequences; artificial sequences; vectors.
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..2605
/organism="pTRE-tight"
/mol_type="other DNA"
misc_feature 289..308
/label="pCEP_fwd_primer"
misc_feature 291..315
/label="LNCX_primer"
rep_origin complement(767..1386)
/label="pBR322_origin"
gene complement(1541..2401)
/label="Ampicillin"
/gene="Ampicillin"
CDS complement(1541..2401)
/label="ORF frame 1"
promoter complement(2443..2471)
/label="AmpR_promoter"
ORIGIN
1 CTCGAGTTTA CTCCCTATCA GTGATAGAGA ACGTATGTCG AGTTTACTCC CTATCAGTGA
61 TAGAGAACGA TGTCGAGTTT ACTCCCTATC AGTGATAGAG AACGTATGTC GAGTTTACTC
121 CCTATCAGTG ATAGAGAACG TATGTCGAGT TTACTCCCTA TCAGTGATAG AGAACGTATG
181 TCGAGTTTAT CCCTATCAGT GATAGAGAAC GTATGTCGAG TTTACTCCCT ATCAGTGATA
241 GAGAACGTAT GTCGAGGTAG GCGTGTACGG TGGGAGGCCT ATATAAGCAG AGCTCGTTTA
301 GTGAACCGTC AGATCGCCTG GAGAATTCGA GCTCGGTACC CGGGGATCCT CTAGTCAGCT
361 GACGCGTGCT AGCGCGGCCG CATCGATAAG CTTGTCGACG ATATCTCTAG AGGATCATAA
421 TCAGCCATAC CACATTTGTA GAGGTTTTAC TTGCTTTAAA AAACCTCCCA CACCTCCCCC
481 TGAACCTGAA ACATAAAATG AATGCAATTG TTGTTGTTAA CTTGTTTATT GCAGCTTATA
541 ATGGTTACAA ATAAAGCAAT AGCATCACAA ATTTCACAAA TAAAGCATTT TTTTCACTGC
601 CTCGAGCTTC CTCGCTCACT GACTCGCTGC GCTCGGTCGT TCGGCTGCGG CGAGCGGTAT
661 CAGCTCACTC AAAGGCGGTA ATACGGTTAT CCACAGAATC AGGGGATAAC GCAGGAAAGA
721 ACATGTGAGC AAAAGGCCAG CAAAAGGCCA GGAACCGTAA AAAGGCCGCG TTGCTGGCGT
781 TTTTCCATAG GCTCCGCCCC CCTGACGAGC ATCACAAAAA TCGACGCTCA AGTCAGAGGT
841 GGCGAAACCC GACAGGACTA TAAAGATACC AGGCGTTTCC CCCTGGAAGC TCCCTCGTGC
901 GCTCTCCTGT TCCGACCCTG CCGCTTACCG GATACCTGTC CGCCTTTCTC CCTTCGGGAA
961 GCGTGGCGCT TTCTCAATGC TCACGCTGTA GGTATCTCAG TTCGGTGTAG GTCGTTCGCT
1021 CCAAGCTGGG CTGTGTGCAC GAACCCCCCG TTCAGCCCGA CCGCTGCGCC TTATCCGGTA
1081 ACTATCGTCT TGAGTCCAAC CCGGTAAGAC ACGACTTATC GCCACTGGCA GCAGCCACTG
1141 GTAACAGGAT TAGCAGAGCG AGGTATGTAG GCGGTGCTAC AGAGTTCTTG AAGTGGTGGC
1201 CTAACTACGG CTACACTAGA AGGACAGTAT TTGGTATCTG CGCTCTGCTG AAGCCAGTTA
1261 CCTTCGGAAA AAGAGTTGGT AGCTCTTGAT CCGGCAAACA AACCACCGCT GGTAGCGGTG
1321 GTTTTTTTGT TTGCAAGCAG CAGATTACGC GCAGAAAAAA AGGATCTCAA GAAGATCCTT
1381 TGATCTTTTC TACGGGGTCT GACGCTCAGT GGAACGAAAA CTCACGTTAA GGGATTTTGG
1441 TCATGAGATT ATCAAAAAGG ATCTTCACCT AGATCCTTTT AAATTAAAAA TGAAGTTTTA
1501 AATCAATCTA AAGTATATAT GAGTAAACTT GGTCTGACAG TTACCAATGC TTAATCAGTG
1561 AGGCACCTAT CTCAGCGATC TGTCTATTTC GTTCATCCAT AGTTGCCTGA CTCCCCGTCG
1621 TGTAGATAAC TACGATACGG GAGGGCTTAC CATCTGGCCC CAGTGCTGCA ATGATACCGC
1681 GAGACCCACG CTCACCGGCT CCAGATTTAT CAGCAATAAA CCAGCCAGCC GGAAGGGCCG
1741 AGCGCAGAAG TGGTCCTGCA ACTTTATCCG CCTCCATCCA GTCTATTAAT TGTTGCCGGG
1801 AAGCTAGAGT AAGTAGTTCG CCAGTTAATA GTTTGCGCAA CGTTGTTGCC ATTGCTACAG
1861 GCATCGTGGT GTCACGCTCG TCGTTTGGTA TGGCTTCATT CAGCTCCGGT TCCCAACGAT
1921 CAAGGCGAGT TACATGATCC CCCATGTTGT GCAAAAAAGC GGTTAGCTCC TTCGGTCCTC
1981 CGATCGTTGT CAGAAGTAAG TTGGCCGCAG TGTTATCACT CATGGTTATG GCAGCACTGC
2041 ATAATTCTCT TACTGTCATG CCATCCGTAA GATGCTTTTC TGTGACTGGT GAGTACTCAA
2101 CCAAGTCATT CTGAGAATAG TGTATGCGGC GACCGAGTTG CTCTTGCCCG GCGTCAATAC
2161 GGGATAATAC CGCGCCACAT AGCAGAACTT TAAAAGTGCT CATCATTGGA AAACGTTCTT
2221 CGGGGCGAAA ACTCTCAAGG ATCTTACCGC TGTTGAGATC CAGTTCGATG TAACCCACTC
2281 GTGCACCCAA CTGATCTTCA GCATCTTTTA CTTTCACCAG CGTTTCTGGG TGAGCAAAAA
2341 CAGGAAGGCA AAATGCCGCA AAAAAGGGAA TAAGGGCGAC ACGGAAATGT TGAATACTCA
2401 TACTCTTCCT TTTTCAATAT TATTGAAGCA TTTATCAGGG TTATTGTCTC ATGAGCGGAT
2461 ACATATTTGA ATGTATTTAG AAAAATAAAC AAATAGGGGT TCCGCGCACA TTTCCCCGAA
2521 AAGTGCCACC TGACGTCTAA GAAACCATTA TTATCATGAC ATTAACCTAT AAAAATAGGC
2581 GTATCACGAG GCCCTTTCGT CTTCA
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文献和实验内切酶,为了考虑后期实验的方便性,通常会选择一个酶切效率高的酶比如说BamH1 EcoR1,另一个效率相对较低的,比如说Not 1, Kpn1。这四种我都用过,如果buffer不一样的,可以先切效率低的再切效率高的,中间切胶纯化。当然酶切效率跟载体本身结构也有关系,我用过的载体有pGBKT7,pGADT7,pEF4VH,pSeqTaq,Prolabel,pAcGFP,pTRE。其中pTRE没有成功过。2 插入片段的处理 使用高保真的酶扩增插入片段,我用过TaKaRa的primesSTAR GXL DNA
RNA, dsRNA)是一种有互补链的RNA,与细胞中发现的DNA相似,dsRNA构成了一些病毒(双链RNA病毒)的基因组。像病毒RNA或siRNA之类的双链RNA能够促发真核细胞中的RNA干扰,引起脊椎动物中的干扰素反应。 3、 shRNA:小发卡或短发卡RNA(a small hairpin RNA or short hairpin RNA, shRNA)是一段具有紧密发卡环(tight hairpin turn)的RNA序列,常被用于RNA干扰沉默靶基因的表达。利用载体
揭示miRNA、dsRNA、shRNA以及siRNA之间的不同点
干扰,引起脊椎动物中的干扰素反应。 3、 shRNA:小发卡或短发卡RNA(a small hairpin RNA or short hairpin RNA, shRNA)是一段具有紧密发卡环(tight hairpin turn)的RNA序列,常被用于RNA干扰沉默靶基因的表达。利用载体 把shRNA导入细胞,载体中的U6 启动子确保shRNA总是表达;这种装载了shRNA载体可被传递到子代细胞中去,从而使基因的沉默可被遗传。shRNA的发卡结构可被细胞机制切割成 siRNA
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