- ¥1000
- XYbscience
- 中国/美国
- XY1345
- 2025年07月15日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
常温
- 保质期：
三年
- 英文名：
pAO815
- 库存：
60
- 供应商：
信裕生物
- 规格：
5ug质粒
基本信息
| 质粒类型: | 酵母表达载体 |
|---|---|
| 表达水平: | 高拷贝 |
| 启动子: | AOX1 |
| 克隆方法: | 多克隆位点，限制性内切酶 |
| 载体大小: | 7709 bp (查看载体序列) |
| 5' 测序引物及序列: | 5´ AOX1:5´-GACTGGTTCCAATTGACAAGC-3´ |
| 3' 测序引物及序列: | 3´ AOX1:5´-GCAAATGGCATTCTGACATCC-3´ |
| 载体抗性: | Ampicillin (氨苄青霉素) |
| 筛选标记: | HIS4 |
| 备注: |
插入基因是必需包含起始密码子ATG
|
订购信息
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
|---|---|---|---|
| XY1345 | pAO815 | 5ug质粒 |
¥1000.00 |
质粒图谱
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文献和实验体质粒，所以一般用整合型载体作为外源基因的表达载体，目前常用的表达载体多是美国Invitrogen公司开发构建的。P.pastoris既有分泌表达型的，又有胞内表达型的。常用的表达载体主要有：pPIC9，pPIC9K，pHILS，pAO815，pHILD2和pPICz等，其中pPIC9，pPIC9K和pHILS为分泌型表达载体，而pAO815，pHILD2和pPICz为胞内型表达载体，不同载体除具有各自特殊的基因组件外，还具有一些共同的序列，如这些载体都包括一个表达盒（cassette）和一
1 )和转录终止子(3′AOX1 )构建成整合型表达载体。PAOX1 是一个极强的启动子，醇氧化酶的产量最高可占甲醇酵母中可溶性蛋白质的30%［2］ ，所以能使外源蛋白质在它的控制下高效产生。其次，在载体中加入酿酒酵母的分泌信号和前导肽序列(α因子)构建分泌型载体，一方面可以减轻宿主细胞的代谢负荷，另一方面可以减少宿主细胞蛋白水解酶对外源蛋白质的降解，pPIC9K、pMETαA、B、C均为此类载体。此外，使多拷贝目的基因整合入甲醇酵母染色体，形成多个表达单元，产生高产的菌株，此类载体有pAO815
。是已知最强的启动子，它可以使外源蛋白质的表达量达到宿主菌总蛋白的5％~40％。另外某些整合型载体还含有外分泌信号肽，表达产物可以被分泌到培养基中，利于纯化处理；对于C末端带多聚组氨酸(6×His)的整合型载体，可以用树脂纯化表达蛋白质。常见整合型载体如pPIC3KPIC9K、pPICZ、pAO815、pPICZ和 pGAPz。 构建好的巴斯德毕赤酵母表达载体被相应的内酶消化 变成线状，用电穿孔法、LiC1-PEG法或原生质体法将线性化载体转化到宿主菌中。线性化的置不同使载体有两种方式与宿主菌染色
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