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pMAL-c5x载体

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  • ZYbscience
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  • 2025年07月13日
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      三年

    • 英文名

      pMAL-c5x

    • 库存

      20

    • 供应商

      泽叶生物

    载体基本信息

    出品公司: ZYbscience
    载体名称: pMAL-c5x
    质粒类型: 大肠杆菌表达载体
    高拷贝/低拷贝: --
    启动子: --
    克隆方法: 多克隆位点,限制性内切酶
    载体大小: 5677bp
    5' 测序引物及序列: --
    3' 测序引物及序列: --
    载体标签: --
    载体抗性: Ampicillin
    筛选标记: --
    备注: --
    产品目录号: --
    稳定性: --
    组成型: --
    病毒/非病毒: --

    载体质粒图谱和多克隆位点信息

    pMAL-c5x载体图谱



    pMAL-c5x载体特征

    载体简介

    The vector pMAL-c5X is designed to produce maltose-binding protein (MBP) fusions, where the protein of interest can be cleaved from MBP with the specific protease Factor Xa (NEB #P8010). 
    MBP fusions made with this vector are expressed cytoplasmically. The MBP has been engineered for tighter binding to amylose resin. A gene or open reading frame is inserted into a restriction site of the vector polylinker, in the same translational reading frame as the malE gene (encoding maltose-binding protein). The fusion protein thus produced can be purified by amylose affinity chromatography. The sequence coding for the four amino acids Ile-Glu-Gly-Arg is present just upstream of the XmnI site. This allows the protein of interest to be cleaved from maltose-binding protein with the specific protease Factor Xa. Fragments inserted in the XmnI site (cleaves GAAGG↓ATTTC) will produce a fusion protein that, after Factor Xa cleavage, contains no vector-derived residues on the protein of interest.
    

    载体序列

    LOCUS       pMAL-c5X                5677 bp    DNA     circular     13-NOV-2008
    DEFINITION  Cloning vector pMAL-c5X, complete sequence.
    ACCESSION
    VERSION
    KEYWORDS    .
    SOURCE      Cloning vector pMAL-c5X
      ORGANISM  Cloning vector pMAL-c5X
                other sequences; artificial sequences; vectors.
    REFERENCE   1  (bases 1 to 5677)
      AUTHORS   Riggs,P.
      TITLE     Expression and purification of maltose-binding protein fusions
      JOURNAL   (in) Asubel,F.A., Brent,R., Kingston,R.E., Moore,D.D.,
                Seidman,J.G., Smith,J.A. and Struhl,K. (Eds.);
                CURRENT PROTOCOLS IN MOLECULAR BIOLOGY: 1-14;
                Greene Publishing and Wiley Interscience, New York, NY (1992)
    REFERENCE   2  (bases 1 to 5677)
      AUTHORS   Riggs,P.D.
      TITLE     Direct Submission
      JOURNAL   Submitted (13-NOV-2008) Research Department, New England Biolabs,
                240 County Road, Ipswich, MA 01938, USA
    FEATURES             Location/Qualifiers
         source          1..5677
                         /organism="Cloning vector pMAL-c5X"
                         /mol_type="other DNA"
         gene            15..1163
                         /gene="lacIq"
         -35_signal      15..19
                         /gene="lacIq"
                         /note="lacIq promoter (clockwise); TGGTG"
         -10_signal      40..46
                         /gene="lacIq"
                         /note="lacIq promoter (clockwise); CATGATA"
         CDS             81..1163
                         /gene="lacIq"
                         /codon_start=1
                         /transl_table=11
                         /product="lac repressor (LacI)"
                         /translation="MKPVTLYDVAEYAGVSYQTVSRVVNQASHVSAKTREKVEAAMAE
                         LNYIPNRVAQQLAGKQSLLIGVATSSLALHAPSQIVAAIKSRADQLGASVVVSMVERS
                         GVEACKAAVHNLLAQRVSGLIINYPLDDQDAIAVEAACTNVPALFLDVSDQTPINSII
                         FSHEDGTRLGVEHLVALGHQQIALLAGPLSSVSARLRLAGWHKYLTRNQIQPIAEREG
                         DWSAMSGFQQTMQMLNEGIVPTAMLVANDQMALGAMRAITESGLRVGADISVVGYDDT
                         EDSSCYIPPLTTIKQDFRLLGQTSVDRLLQLSQGQAVKGNQLLPVSLVKRKTTLAPNT
                         QTASPRALADSLMQLARQVSRLESGQ"
         gene            1406..2968
                         /gene="malE expression cassette"
         -35_signal      1406..1411
                         /gene="malE expression cassette"
                         /note="Ptac promoter (clockwise); TTGACA"
         -10_signal      1428..1433
                         /gene="malE expression cassette"
                         /note="Ptac promoter (clockwise); TATAAT"
         CDS             1528..2754
                         /gene="malE expression cassette"
                         /note="malE sequence 1528..2628; spacer and factor Xa site
                         2629..2687; multiple cloning site region 2688..2754"
                         /codon_start=1
                         /product="maltose binding protein (MBP) fusion"
                         /translation="MKIEEGKLVIWINGDKGYNGLAEVGKKFEKDTGIKVTVEHPDKL
                         EEKFPQVAATGDGPDIIFWAHDRFGGYAQSGLLAEITPDKAFQDKLYPFTWDAVRYNG
                         KLIAYPIAVEALSLIYNKDLLPNPPKTWEEIPALDKELKAKGKSALMFNLQEPYFTWP
                         LIAADGGYAFKYENGKYDIKDVGVDNAGAKAGLTFLVDLIKNKHMNADTDYSIAEAAF
                         NKGETAMTINGPWAWSNIDTSKVNYGVTVLPTFKGQPSKPFVGVLSAGINAASPNKEL
                         AKEFLENYLLTDEGLEAVNKDKPLGAVALKSYEEELVKDPRIAATMENAQKGEIMPNI
                         PQMSAFWYAVRTAVINAASGRQTVDEALKDAQTNSSSNNNNNNNNNNLGIEGRISHMS
                         MGGRDIVDGSEFPAGN"
         primer_bind     2587..2610
                         /note="malE primer sequence (NEB #S1237S)"
         misc_feature    2695..2747
                         /gene="malE expression cassette"
                         /note="multiple cloning site (NdeI-SbfI)"
         terminator      2766..2809
                         /gene="malE expression cassette"
                         /note="rrnB T1 transcription terminator"
         primer_bind     complement(2823..2846)
                         /note="MCS reverse primer sequence (NEB #SxxxxS)"
         terminator      2941..2968
                         /gene="malE expression cassette"
                         /note="rrnB T2 transcription terminator"
         gene            3017..3947
                         /gene="bla"
         -35_signal      3017..3022
                         /gene="bla"
                         /note="bla promoter (clockwise); TTCAAA"
         -10_signal      3040..3045
                         /gene="bla"
                         /note="bla promoter (clockwise); GACAAT"
         CDS             3087..3947
                         /gene="bla"
                         /note="ampR (confers resistance to ampicillin)"
                         /codon_start=1
                         /product="beta-lactamase"
                         /translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGY
                         IELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRVDAGQEQLGRRIHYSQNDLVE
                         YSPVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRL
                         DRWEPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPL
                         LRSALPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIA
                         EIGASLIKHW"
         rep_origin      4035..4623
                         /note="pMB1 origin of replication (clockwise) (RNAII -35
                         to RNA/DNA switch point)"
         gene            complement(4993..5184)
                         /gene="rop"
         CDS             complement(4993..5184)
                         /gene="rop"
                         /codon_start=1
                         /transl_table=11
                         /product="ROP protein"
                         /translation="MTKQEKTALNMARFIRSQTLTLLEKLNELDADEQADICESLHDH
                         ADELYRSCLARFGDDGENL"
    BASE COUNT     1418 a   1430 c   1523 g   1306 t

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