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pPIC3.5载体

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  • ZYbscience
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  • ZY1710-01
  • 2025年07月15日
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      三年

    • 英文名

      pPIC3.5

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      20

    • 供应商

      泽叶生物

    载体基本信息

    出品公司: ZYbscience
    载体名称: pPIC3.5, pPIC 3.5
    质粒类型: 毕赤酵母蛋白表达载体
    表达水平: 高拷贝
    启动子: AOX1
    克隆方法: 多克隆位点,限制性内切酶
    载体大小: 7751 bp
    5' 测序引物及序列: 5´ AOX1:5´-GACTGGTTCCAATTGACAAGC-3´
    3' 测序引物及序列: 3´ AOX1:5´-GCAAATGGCATTCTGACATCC-3´
    载体标签: /
    载体抗性: Ampicillin
    筛选标记: HIS4
    备注:
    插入基因是必需包含起始密码子ATG。
    产品目录号: ZY1710-01
    稳定性: 稳定 Stable
    组成型: 组成型 Constitutive
    病毒/非病毒: 非病毒

    载体质粒图谱和多克隆位点信息

    pPIC3.5载体图谱


    pPIC3.5多克隆位点

    载体简介

    pPIC3.5酵母表达载体详细信息如下:

    1. 载体大小为7,751 bp,是非融合蛋白表达载体。

    2. 单一限制性内切酶位点有BamH I, SnaB I, EcoR I, Avr II 和Not I.

    3. 胞内基因表达载体,不是分泌性蛋白表达载体。

    4. 载体构建时,需要包含一个ATG启动子,同时需要加入Kozak序列。 (Cavener and Stuart, 1991; Kozak, 1987; Kozak, 1990)

    5. 毕赤酵母中使用HIS4基因筛选。

    6. 将基因插入GS115和KM71的AOX1中,需要使用Sac I线性化质粒(GS115产生的基因型为His+ Mut+,KM71酵母产生的基因型为His+ MutS)。

    7. 将基因插入GS115和KM71的HIS4中,需要使用Sal I或 Stu I线性化质粒(GS115产生的基因型为His+ Mut+,KM71酵母产生的基因型为His+ MutS)。

    8. 将基因插入GS115的AOX1基因中,也可以使用Bgl II 限制酶线性化质粒,产生的酵母基因型为His+ MutS。

    载体序列

    LOCUS pPIC3.5 7751 bp ds-DNA circular SYN 05-二月-2013
    DEFINITION Pichia pastoris HIS4 vector for methanol-inducible intracellular
    expression of a protein.
    ACCESSION .
    VERSION .
    KEYWORDS pPIC3.5
    COMMENT This file is created by Vector NTI
    http://www.biofeng.com/
    COMMENT VNTAUTHORNAME|biofeng.com|
    FEATURES Location/Qualifiers
    source 1..7751
    /organism="synthetic DNA construct"
    /lab_host="Pichia pastoris"
    /mol_type="other DNA"
    promoter 2..937
    /gene="Pichia pastoris AOX1"
    /note="AOX1 promoter"
    /note="inducible promoter, regulated by methanol"
    /note="color: #ffffff; direction: RIGHT"
    misc_feature 938..969
    /note="MCS"
    /note="multiple cloning site"
    /note="color: #99ccff"
    terminator 1049..1295
    /gene="Pichia pastoris AOX1"
    /note="AOX1 terminator"
    /note="transcription terminator for AOX1"
    /note="color: #ffffff"
    CDS complement(1708..4242)
    /codon_start=1
    /gene="Pichia pastoris HIS4"
    /locus_tag="
    "
    /product="multifunctional enzyme, required for histidine
    biosynthesis"
    /note="PpHIS4"
    /note="auxotrophic marker for Pichia pastoris"
    /note="color: #ff7f50"
    /protein_id="
    "
    /translation="MTFPLLPAYASVAEFDNSLSLVGKAVFPYAADQLHNLIKFTQSTE
    LQVNVQVESSVTEDQFEELIDNLLKLYNNGINEVILDLDLAERVVQRMIPGARVIYRTL
    VDKVASLPANASIAVPFSSPLGDLKSFTNGGSRTVYAFSETAKLVDVTSTVASGIIPII
    DARQLTTEYELSEDVKKFPVSEILLASLTTDRPDGLFTTLVADSSNYSLGLVYSSKKSI
    PEAIRTQTGVYQSRRHGLWYKGATSGATQKLLGIELDCDGDCLKFVVEQTGVGFCHLER
    TSCFGQSKGLRAMEATLWDRKSNAPEGSYTKRLFDDEVLLNAKIREEADELAEAKSKED
    IAWECADLFYFALVRCAKYGVTLDEVERNLDMKSLKVTRRKGDAKPGYTKEQPKEESKP
    KEVPSEGRIELCKIDVSKASSQEIEDALRRPIQKTEQIMELVKPIVDNVRQNGDKALLE
    LTAKFDGVALKTPVLEAPFPEELMQLPDNVKRAIDLSIDNVRKFHEAQLTETLQVETCP
    GVVCSRFARPIEKVGLYIPGGTAILPSTSLMLGVPAKVAGCKEIVFASPPKKDGTLTPE
    VIYVAHKVGAKCIVLAGGAQAVAAMAYGTETVPKCDKIFGPGNQFVTAAKMMVQNDTSA
    LCSIDMPAGPSEVLVIADKYADPDFVASDLLSQAEHGIDSQVILLAVDMTDKELARIED
    AVHNQAVQLPRVEIVRKCIAHSTTLSVATYEQALEMSNQYAPEHLILQIENASSYVDQV
    QHAGSVFVGAYSPESCGDYSSGTNHTLPTYGYARQYSGVNTATFQKFITSQDVTPEGLK
    HIGQAVMDLAAVEGLDAHRNAVKVRMEKLGLI"
    misc_feature 4597..5353
    /note="AOX1 3' fragment"
    /note="region downstream of Pichia pastoris AOX1 gene"
    /note="color: #ffffff"
    rep_origin complement(5822..6410)
    /direction=LEFT
    /note="ori"
    /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
    replication"
    /note="color: #ffff00"
    CDS complement(6581..7441)
    /codon_start=1
    /gene="bla"
    /product="beta-lactamase"
    /note="AmpR"
    /note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
    related antibiotics"
    /note="This feature has 2 segments:
    ???1:?6581?..?7372?/?#ccffcc
    ???2:?7373?..?7441?/?#ccffcc?/?signal?sequence
    Cleavage site after base 7372"
    /translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
    ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRVDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
    PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
    EPELNEAIPNDERDTTMPAAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
    LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
    LIKHW"
    promoter complement(7442..7546)
    /gene="bla"
    /note="AmpR promoter"
    /note="color: #ffffff; direction: LEFT"
    ORIGIN
    1 agatctaaca tccaaagacg aaaggttgaa tgaaaccttt ttgccatccg acatccacag
    61 gtccattctc acacataagt gccaaacgca acaggagggg atacactagc agcagaccgt
    121 tgcaaacgca ggacctccac tcctcttctc ctcaacaccc acttttgcca tcgaaaaacc
    181 agcccagtta ttgggcttga ttggagctcg ctcattccaa ttccttctat taggctacta
    241 acaccatgac tttattagcc tgtctatcct ggcccccctg gcgaggttca tgtttgttta
    301 tttccgaatg caacaagctc cgcattacac ccgaacatca ctccagatga gggctttctg
    361 agtgtggggt caaatagttt catgttcccc aaatggccca aaactgacag tttaaacgct
    421 gtcttggaac ctaatatgac aaaagcgtga tctcatccaa gatgaactaa gtttggttcg
    481 ttgaaatgct aacggccagt tggtcaaaaa gaaacttcca aaagtcgcca taccgtttgt
    541 cttgtttggt attgattgac gaatgctcaa aaataatctc attaatgctt agcgcagtct
    601 ctctatcgct tctgaacccc ggtgcacctg tgccgaaacg caaatgggga aacacccgct
    661 ttttggatga ttatgcattg tctccacatt gtatgcttcc aagattctgg tgggaatact
    721 gctgatagcc taacgttcat gatcaaaatt taactgttct aacccctact tgacagcaat
    781 atataaacag aaggaagctg ccctgtctta aacctttttt tttatcatca ttattagctt
    841 actttcataa ttgcgactgg ttccaattga caagcttttg attttaacga cttttaacga
    901 caacttgaga agatcaaaaa acaactaatt attcgaagga tcctacgtag aattccctag
    961 ggcggccgcg aattaattcg ccttagacat gactgttcct cagttcaagt tgggcactta
    1021 cgagaagacc ggtcttgcta gattctaatc aagaggatgt cagaatgcca tttgcctgag
    1081 agatgcaggc ttcatttttg atactttttt atttgtaacc tatatagtat aggatttttt
    1141 ttgtcatttt gtttcttctc gtacgagctt gctcctgatc agcctatctc gcagctgatg
    1201 aatatcttgt ggtaggggtt tgggaaaatc attcgagttt gatgtttttc ttggtatttc
    1261 ccactcctct tcagagtaca gaagattaag tgagaagttc gtttgtgcaa gcttatcgat
    1321 aagctttaat gcggtagttt atcacagtta aattgctaac gcagtcaggc accgtgtatg
    1381 aaatctaaca atgcgctcat cgtcatcctc ggcaccgtca ccctggatgc tgtaggcata
    1441 ggcttggtta tgccggtact gccgggcctc ttgcgggata tcgtccattc cgacagcatc
    1501 gccagtcact atggcgtgct gctagcgcta tatgcgttga tgcaatttct atgcgcaccc
    1561 gttctcggag cactgtccga ccgctttggc cgccgcccag tcctgctcgc ttcgctactt
    1621 ggagccacta tcgactacgc gatcatggcg accacacccg tcctgtggat ctatcgaatc
    1681 taaatgtaag ttaaaatctc taaataatta aataagtccc agtttctcca tacgaacctt
    1741 aacagcattg cggtgagcat ctagaccttc aacagcagcc agatccatca ctgcttggcc
    1801 aatatgtttc agtccctcag gagttacgtc ttgtgaagtg atgaacttct ggaaggttgc
    1861 agtgttaact ccgctgtatt gacgggcata tccgtacgtt ggcaaagtgt ggttggtacc
    1921 ggaggagtaa tctccacaac tctctggaga gtaggcacca acaaacacag atccagcgtg
    1981 ttgtacttga tcaacataag aagaagcatt ctcgatttgc aggatcaagt gttcaggagc
    2041 gtactgattg gacatttcca aagcctgctc gtaggttgca accgataggg ttgtagagtg
    2101 tgcaatacac ttgcgtacaa tttcaaccct tggcaactgc acagcttggt tgtgaacagc
    2161 atcttcaatt ctggcaagct ccttgtctgt catatcgaca gccaacagaa tcacctggga
    2221 atcaatacca tgttcagctt gagacagaag gtctgaggca acgaaatctg gatcagcgta
    2281 tttatcagca ataactagaa cttcagaagg cccagcaggc atgtcaatac tacacagggc
    2341 tgatgtgtca ttttgaacca tcatcttggc agcagtaacg aactggtttc ctggaccaaa
    2401 tattttgtca cacttaggaa cagtttctgt tccgtaagcc atagcagcta ctgcctgggc
    2461 gcctcctgct agcacgatac acttagcacc aaccttgtgg gcaacgtaga tgacttctgg
    2521 ggtaagggta ccatccttct taggtggaga tgcaaaaaca atttctttgc aaccagcaac
    2581 tttggcagga acacccagca tcagggaagt ggaaggcaga attgcggttc caccaggaat
    2641 atagaggcca actttctcaa taggtcttgc aaaacgagag cagactacac cagggcaagt
    2701 ctcaacttgc aacgtctccg ttagttgagc ttcatggaat ttcctgacgt tatctataga
    2761 gagatcaatg gctctcttaa cgttatctgg caattgcata agttcctctg ggaaaggagc
    2821 ttctaacaca ggtgtcttca aagcgactcc atcaaacttg gcagttagtt ctaaaagggc
    2881 tttgtcacca ttttgacgaa cattgtcgac aattggtttg actaattcca taatctgttc
    2941 cgttttctgg ataggacgac gaagggcatc ttcaatttct tgtgaggagg ccttagaaac
    3001 gtcaattttg cacaattcaa tacgaccttc agaagggact tctttaggtt tggattcttc
    3061 tttaggttgt tccttggtgt atcctggctt ggcatctcct ttccttctag tgacctttag
    3121 ggacttcata tccaggtttc tctccacctc gtccaacgtc acaccgtact tggcacatct
    3181 aactaatgca aaataaaata agtcagcaca ttcccaggct atatcttcct tggatttagc
    3241 ttctgcaagt tcatcagctt cctccctaat tttagcgttc aacaaaactt cgtcgtcaaa
    3301 taaccgtttg gtataagaac cttctggagc attgctctta cgatcccaca aggtggcttc
    3361 catggctcta agaccctttg attggccaaa acaggaagtg cgttccaagt gacagaaacc
    3421 aacacctgtt tgttcaacca caaatttcaa gcagtctcca tcacaatcca attcgatacc
    3481 cagcaacttt tgagttgctc cagatgtagc acctttatac cacaaaccgt gacgacgaga
    3541 ttggtagact ccagtttgtg tccttatagc ctccggaata gactttttgg acgagtacac
    3601 caggcccaac gagtaattag aagagtcagc caccaaagta gtgaatagac catcggggcg
    3661 gtcagtagtc aaagacgcca acaaaatttc actgacaggg aactttttga catcttcaga
    3721 aagttcgtat tcagtagtca attgccgagc atcaataatg gggattatac cagaagcaac
    3781 agtggaagtc acatctacca actttgcggt ctcagaaaaa gcataaacag ttctactacc
    3841 gccattagtg aaacttttca aatcgcccag tggagaagaa aaaggcacag cgatactagc
    3901 attagcgggc aaggatgcaa ctttatcaac cagggtccta tagataaccc tagcgcctgg
    3961 gatcatcctt tggacaactc tttctgccaa atctaggtcc aaaatcactt cattgatacc
    4021 attattgtac aacttgagca agttgtcgat cagctcctca aattggtcct ctgtaacgga
    4081 tgactcaact tgcacattaa cttgaagctc agtcgattga gtgaacttga tcaggttgtg
    4141 cagctggtca gcagcatagg gaaacacggc ttttcctacc aaactcaagg aattatcaaa
    4201 ctctgcaaca cttgcgtatg caggtagcaa gggaaatgtc atacttgaag tcggacagtg
    4261 agtgtagtct tgagaaattc tgaagccgta tttttattat cagtgagtca gtcatcagga
    4321 gatcctctac gccggacgca tcgtggccgg catcaccggc gccacaggtg cggttgctgg
    4381 cgcctatatc gccgacatca ccgatgggga agatcgggct cgccacttcg ggctcatgag
    4441 cgcttgtttc ggcgtgggta tggtggcagg ccccgtggcc gggggactgt tgggcgccat
    4501 ctccttgcat gcaccattcc ttgcggcggc ggtgctcaac ggcctcaacc tactactggg
    4561 ctgcttccta atgcaggagt cgcataaggg agagcgtcga gtatctatga ttggaagtat
    4621 gggaatggtg atacccgcat tcttcagtgt cttgaggtct cctatcagat tatgcccaac
    4681 taaagcaacc ggaggaggag atttcatggt aaatttctct gacttttggt catcagtaga
    4741 ctcgaactgt gagactatct cggttatgac agcagaaatg tccttcttgg agacagtaaa
    4801 tgaagtccca ccaataaaga aatccttgtt atcaggaaca aacttcttgt ttcgaacttt
    4861 ttcggtgcct tgaactataa aatgtagagt ggatatgtcg ggtaggaatg gagcgggcaa
    4921 atgcttacct tctggacctt caagaggtat gtagggtttg tagatactga tgccaacttc
    4981 agtgacaacg ttgctatttc gttcaaacca ttccgaatcc agagaaatca aagttgtttg
    5041 tctactattg atccaagcca gtgcggtctt gaaactgaca atagtgtgct cgtgttttga
    5101 ggtcatcttt gtatgaataa atctagtctt tgatctaaat aatcttgacg agccaaggcg
    5161 ataaataccc aaatctaaaa ctcttttaaa acgttaaaag gacaagtatg tctgcctgta
    5221 ttaaacccca aatcagctcg tagtctgatc ctcatcaact tgaggggcac tatcttgttt
    5281 tagagaaatt tgcggagatg cgatatcgag aaaaaggtac gctgatttta aacgtgaaat
    5341 ttatctcaag atctctgcct cgcgcgtttc ggtgatgacg gtgaaaacct ctgacacatg
    5401 cagctcccgg agacggtcac agcttgtctg taagcggatg ccgggagcag acaagcccgt
    5461 cagggcgcgt cagcgggtgt tggcgggtgt cggggcgcag ccatgaccca gtcacgtagc
    5521 gatagcggag tgtatactgg cttaactatg cggcatcaga gcagattgta ctgagagtgc
    5581 accatatgcg gtgtgaaata ccgcacagat gcgtaaggag aaaataccgc atcaggcgct
    5641 cttccgcttc ctcgctcact gactcgctgc gctcggtcgt tcggctgcgg cgagcggtat
    5701 cagctcactc aaaggcggta atacggttat ccacagaatc aggggataac gcaggaaaga
    5761 acatgtgagc aaaaggccag caaaaggcca ggaaccgtaa aaaggccgcg ttgctggcgt
    5821 ttttccatag gctccgcccc cctgacgagc atcacaaaaa tcgacgctca agtcagaggt
    5881 ggcgaaaccc gacaggacta taaagatacc aggcgtttcc ccctggaagc tccctcgtgc
    5941 gctctcctgt tccgaccctg ccgcttaccg gatacctgtc cgcctttctc ccttcgggaa
    6001 gcgtggcgct ttctcaatgc tcacgctgta ggtatctcag ttcggtgtag gtcgttcgct
    6061 ccaagctggg ctgtgtgcac gaaccccccg ttcagcccga ccgctgcgcc ttatccggta
    6121 actatcgtct tgagtccaac ccggtaagac acgacttatc gccactggca gcagccactg
    6181 gtaacaggat tagcagagcg aggtatgtag gcggtgctac agagttcttg aagtggtggc
    6241 ctaactacgg ctacactaga aggacagtat ttggtatctg cgctctgctg aagccagtta
    6301 ccttcggaaa aagagttggt agctcttgat ccggcaaaca aaccaccgct ggtagcggtg
    6361 gtttttttgt ttgcaagcag cagattacgc gcagaaaaaa aggatctcaa gaagatcctt
    6421 tgatcttttc tacggggtct gacgctcagt ggaacgaaaa ctcacgttaa gggattttgg
    6481 tcatgagatt atcaaaaagg atcttcacct agatcctttt aaattaaaaa tgaagtttta
    6541 aatcaatcta aagtatatat gagtaaactt ggtctgacag ttaccaatgc ttaatcagtg
    6601 aggcacctat ctcagcgatc tgtctatttc gttcatccat agttgcctga ctccccgtcg
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    6721 gagacccacg ctcaccggct ccagatttat cagcaataaa ccagccagcc ggaagggccg
    6781 agcgcagaag tggtcctgca actttatccg cctccatcca gtctattaat tgttgccggg
    6841 aagctagagt aagtagttcg ccagttaata gtttgcgcaa cgttgttgcc attgctgcag
    6901 gcatcgtggt gtcacgctcg tcgtttggta tggcttcatt cagctccggt tcccaacgat
    6961 caaggcgagt tacatgatcc cccatgttgt gcaaaaaagc ggttagctcc ttcggtcctc
    7021 cgatcgttgt cagaagtaag ttggccgcag tgttatcact catggttatg gcagcactgc
    7081 ataattctct tactgtcatg ccatccgtaa gatgcttttc tgtgactggt gagtactcaa
    7141 ccaagtcatt ctgagaatag tgtatgcggc gaccgagttg ctcttgcccg gcgtcaacac
    7201 gggataatac cgcgccacat agcagaactt taaaagtgct catcattgga aaacgttctt
    7261 cggggcgaaa actctcaagg atcttaccgc tgttgagatc cagttcgatg taacccactc
    7321 gtgcacccaa ctgatcttca gcatctttta ctttcaccag cgtttctggg tgagcaaaaa
    7381 caggaaggca aaatgccgca aaaaagggaa taagggcgac acggaaatgt tgaatactca
    7441 tactcttcct ttttcaatat tattgaagca tttatcaggg ttattgtctc atgagcggat
    7501 acatatttga atgtatttag aaaaataaac aaataggggt tccgcgcaca tttccccgaa
    7561 aagtgccacc tgacgtctaa gaaaccatta ttatcatgac attaacctat aaaaataggc
    7621 gtatcacgag gccctttcgt cttcaagaat taattctcat gtttgacagc ttatcatcga
    7681 taagctgact catgttggta ttgtgaaata gacgcagatc gggaacactg aaaaataaca
    7741 gttattattc g

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    上海泽叶生物科技有限公司
    2025年06月07日询价
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    上海信裕生物科技有限公司
    2025年06月23日询价
    pPIC3.5载体
    ¥800