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6-12months
- 英文名:
Recombinant Serum Amyloid P Component (SAP)
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大量
- 供应商:
泽叶生物
- 规格:
50ug/100ug/1mg
上海泽叶生物科技有限公司是一家集研发、生产和销售于一体的生命科学实验室产品创新性高科技企业。主要从事免疫学,重组蛋白,细胞因子,抗原/多肽/蛋白等产品主要包括免疫调节蛋白、白细胞介素、CSFs、生长因子、干扰素、Chemokines 、Adipokines 、TGFß / BMP Proteins、神经因子、FGFs和TNF配体/受体防御因子等。并代理销售Amresco,qiagen Millipore,eBioscience,Sigma,SANTA,Sciencell,R&D、GBD、ATCC、HYCLONE, CELLutions Biosystems INC , Neuromics , Chemicon, Equitech-bio, Biovision, Promega, Kamiya, Prospec, Cytoskeleton, Novagen, SurModics, Cytelligen LONZA等二十多家国外知名品牌,致力于为广大高校、科研院所和企事业单位提供一流的科研试剂和完善的技术服务。
经甲醛固定的部分组织细胞,因固定过程中可能会形成醛键或羧甲基而封闭部分抗原决定簇,使免疫组化标记敏感性明显降低,因此在染色前,有些抗原需进行修复或暴露。
抗原修复方法可分为化学方法和物理方法。化学方法是以酶消化方法,常用胰蛋白酶及胃蛋白酶,配制浓度与消化时间要适度。常用的物理方法有单纯加热、微波处理和高压加热。在选用这三种方法时,浸泡切片的缓冲液的离子强度和pH、加热的温度和时间均影响着抗原修复效果。
1、pH的应用范围及选择
抗原修复液的pH非常重要,有效的抗原修复pH要比修复液的化学成分更重要,同样的修复液随着pH的升高染色的强度逐渐增强,但最佳pH范围为6.0-10.0。目前大家公认的最好的抗原修复液是pH6.0的柠檬酸盐缓冲液和pH8.0的EDTA缓冲液。作为通用修复液碱性pH的修复液要比酸性的有效,而对固定很长时间旧的存档组织,酸性pH的修复液则优于碱性的修复液。
2、抗原修复时应选择最佳温度
70-90℃的温度对未经固定的蛋白质可发生变性,但经福尔马林固定的蛋白质,温度必须达到92℃以上方能使其变性。研究结果显示,温度为92-98℃是合适的,95℃效果最好。
3、抗原修复液必须遵循自然降温规律,否则效果不好或达不到抗原修复的目的
抗原修复持续时间过后,取出放于室温中让其慢慢地降温,绝对不能为了争取时间,强行用冰块或冷水使其降温。这是因为当高温中的抗原蛋白分子链脱离了其他的束缚或联结,要有一个自然环境让其自然放松下来,随着温度的降低,它们会慢慢地恢复原来的形态和构型。
4、尽量使用足量的抗原修复液
应用于抗原修复的液体,一定要充足,防止切片干涸。应用大量的抗原修复液时,由于它的量较大,可延缓液体的沸腾时间,增加切片受微波辐射的量,对抗原修复将达到彻底。
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文献和实验上海西唐生物科技有限公司 021-55229872, 65333639 www.westang.com 人血清淀粉样蛋白P (SAP)ELISA 试剂盒 ( 用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内 ) 原理 本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA 法。用抗人 SAP 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 SAP与单抗结合,加入生物素化的抗人 SAP ,形成免疫复合
(acutephaseprotein),在人和小鼠中分别以C反应蛋白(CRP)及血清淀粉样P成分(SAP)为代表。这些分子在炎症信号及IL-6的激发下由肝脏产生。 (2)长分子家族以PTX3为代表,与短分子家族不同点是该家族成员带有一个长的N端结构域。PTX3在炎症信号激发下由单核/巨噬细胞、DC、成纤维细胞和内皮细胞产生。PTX3基因缺陷小鼠易于罹患真菌和细菌感染,表明这是一种重要的抗菌蛋白。 五聚体蛋白识别PAMP成分中的磷酸胆碱,并可结合多种分子如Clq、纤维母细胞生长因子2(FGF2)、胞外基质蛋白(TSC
、可识别一种或多种PAMP的受体分子。PRR与BCR或TCR不同,缺乏足够的多样性,非克隆性地表达于多种固有免疫效应细胞(尤其是Mφ等专职ATT;)表面。PRR一旦识别PAMP,效应细胞即立刻被激活而介导快速的生物学反应。 有人将PRR分为体液PRR和细胞PRR。前者属PAMP识别分子,如五聚体蛋白(pentraxin)家族,短分子家族如C反应蛋白(CRP)和血清淀粉样P蛋白(SAP),长分子家族如PTX3、甘露糖结合凝集素(MBL)、脂多糖结合蛋白(LBP)等(见第七
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