| 出品公司: | |
|---|---|
| 别名: | pQE70, pQE 70 |
| 质粒类型: | 大肠杆菌蛋白表达载体 |
| 表达水平: | 低拷贝 |
| 启动子: | T5 |
| 克隆方法: | 多克隆位点，限制性内切酶 |
| 载体大小: | 3426 bp |
| 5' 测序引物及序列: | pQE30-F: AGCGGATAACAATTTCACACAG |
| 3' 测序引物及序列: | pQE30-R: TTCTGAGGTCATTACTGGATC |
| 载体标签: | C-His |
| 载体抗性: | Ampicillin |
| 备注: |
pQE vectors and constructs can be maintained in any E. coli strain that is ampicillin-sensitive and carries the pREP4 repressor plasmid, or harbors the lacIq gene on the F-factor episome. 配套表达菌株为M15[pREP4].
|
| 产品目录号: | ZY32903 |
| 稳定性: | 瞬时表达 Transient |
| 组成型: | 组成型 Constitutive |
| 病毒/非病毒: | 非病毒 |
- ¥1100
- ZYbscience
- 中国/美国
- ZY32903
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃低温保存
- 保质期：
三年
- 英文名：
pQE-70
- 库存：
20
- 供应商：
泽叶生物
pQE70载体基本信息
pQE70载体质粒图谱和多克隆位点信息
pQE70载体简介
pQE70载体序列
LOCUS pQE-70 3426 bp circular DNA SYN
DEFINITION pQE-70
ACCESSION
KEYWORDS
SOURCE
ORGANISM other sequences; artificial sequences; vectors.
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..3426
/organism="pQE-70"
/mol_type="other DNA"
gene 311..970
/label="CAT/CamR"
/gene="CAT/CamR"
CDS 311..970
/label="ORF frame 2"
terminator 1038..1081
/label="rrnB_T1_terminator"
misc_feature complement(1168..1190)
/label="pGEX_3_primer"
gene complement(2361..3221)
/label="Ampicillin"
/gene="Ampicillin"
CDS complement(2361..3221)
/label="ORF frame 2"
promoter complement(3263..3291)
/label="AmpR_promoter"
ORIGIN
1 CTCGAGAAAT CATAAAAAAT TTATTTGCTT TGTGAGCGGA TAACAATTAT AATAGATTCA
61 ATTGTGAGCG GATAACAATT TCACACAGAA TTCATTAAAG AGGAGAAATT AAGCATGCGA
121 GGATCCAGAT CTCATCACCA TCACCATCAC TAAGCTTAAT TAGCTGAGCT TGGACTCCTG
181 TTGATAGATC CAGTAATGAC CTCAGAACTC CATCTGGATT TGTTCAGAAC GCTCGGTTGC
241 CGCCGGGCGT TTTTTATTGG TGAGAATCCA AGCTAGCTTG GCGAGATTTT CAGGAGCTAA
301 GGAAGCTAAA ATGGAGAAAA AAATCACTGG ATATACCACC GTTGATATAT CCCAATGGCA
361 TCGTAAAGAA CATTTTGAGG CATTTCAGTC AGTTGCTCAA TGTACCTATA ACCAGACCGT
421 TCAGCTGGAT ATTACGGCCT TTTTAAAGAC CGTAAAGAAA AATAAGCACA AGTTTTATCC
481 GGCCTTTATT CACATTCTTG CCCGCCTGAT GAATGCTCAT CCGGAATTTC GTATGGCAAT
541 GAAAGACGGT GAGCTGGTGA TATGGGATAG TGTTCACCCT TGTTACACCG TTTTCCATGA
601 GCAAACTGAA ACGTTTTCAT CGCTCTGGAG TGAATACCAC GACGATTTCC GGCAGTTTCT
661 ACACATATAT TCGCAAGATG TGGCGTGTTA CGGTGAAAAC CTGGCCTATT TCCCTAAAGG
721 GTTTATTGAG AATATGTTTT TCGTCTCAGC CAATCCCTGG GTGAGTTTCA CCAGTTTTGA
781 TTTAAACGTG GCCAATATGG ACAACTTCTT CGCCCCCGTT TTCACCATGG GCAAATATTA
841 TACGCAAGGC GACAAGGTGC TGATGCCGCT GGCGATTCAG GTTCATCATG CCGTTTGTGA
901 TGGCTTCCAT GTCGGCAGAA TGCTTAATGA ATTACAACAG TACTGCGATG AGTGGCAGGG
961 CGGGGCGTAA TTTTTTTAAG GCAGTTATTG GTGCCCTTAA ACGCCTGGGG TAATGACTCT
1021 CTAGCTTGAG GCATCAAATA AAACGAAAGG CTCAGTCGAA AGACTGGGCC TTTCGTTTTA
1081 TCTGTTGTTT GTCGGTGAAC GCTCTCCTGA GTAGGACAAA TCCGCCCTCT AGAGCTGCCT
1141 CGCGCGTTTC GGTGATGACG GTGAAAACCT CTGACACATG CAGCTCCCGG AGACGGTCAC
1201 AGCTTGTCTG TAAGCGGATG CCGGGAGCAG ACAAGCCCGT CAGGGCGCGT CAGCGGGTGT
1261 TGGCGGGTGT CGGGGCGCAG CCATGACCCA GTCACGTAGC GATAGCGGAG TGTATACTGG
1321 CTTAACTATG CGGCATCAGA GCAGATTGTA CTGAGAGTGC ACCATATGCG GTGTGAAATA
1381 CCGCACAGAT GCGTAAGGAG AAAATACCGC ATCAGGCGCT CTTCCGCTTC CTCGCTCACT
1441 GACTCGCTGC GCTCGGTCGT TCGGCTGCGG CGAGCGGTAT CAGCTCACTC AAAGGCGGTA
1501 ATACGGTTAT CCACAGAATC AGGGGATAAC GCAGGAAAGA ACATGTGAGC AAAAGGCCAG
1561 CAAAAGGCCA GGAACCGTAA AAAGGCCGCG TTGCTGGCGT TTTTCCATAG GCTCCGCCCC
1621 CCTGACGAGC ATCACAAAAA TCGACGCTCA AGTCAGAGGT GGCGAAACCC GACAGGACTA
1681 TAAAGATACC AGGCGTTTCC CCCTGGAAGC TCCCTCGTGC GCTCTCCTGT TCCGACCCTG
1741 CCGCTTACCG GATACCTGTC CGCCTTTCTC CCTTCGGGAA GCGTGGCGCT TTCTCATAGC
1801 TCACGCTGTA GGTATCTCAG TTCGGTGTAG GTCGTTCGCT CCAAGCTGGG CTGTGTGCAC
1861 GAACCCCCCG TTCAGCCCGA CCGCTGCGCC TTATCCGGTA ACTATCGTCT TGAGTCCAAC
1921 CCGGTAAGAC ACGACTTATC GCCACTGGCA GCAGCCACTG GTAACAGGAT TAGCAGAGCG
1981 AGGTATGTAG GCGGTGCTAC AGAGTTCTTG AAGTGGTGGC CTAACTACGG CTACACTAGA
2041 AGGACAGTAT TTGGTATCTG CGCTCTGCTG AAGCCAGTTA CCTTCGGAAA AAGAGTTGGT
2101 AGCTCTTGAT CCGGCAAACA AACCACCGCT GGTAGCGGTG GTTTTTTTGT TTGCAAGCAG
2161 CAGATTACGC GCAGAAAAAA AGGATCTCAA GAAGATCCTT TGATCTTTTC TACGGGGTCT
2221 GACGCTCAGT GGAACGAAAA CTCACGTTAA GGGATTTTGG TCATGAGATT ATCAAAAAGG
2281 ATCTTCACCT AGATCCTTTT AAATTAAAAA TGAAGTTTTA AATCAATCTA AAGTATATAT
2341 GAGTAAACTT GGTCTGACAG TTACCAATGC TTAATCAGTG AGGCACCTAT CTCAGCGATC
2401 TGTCTATTTC GTTCATCCAT AGTTGCCTGA CTCCCCGTCG TGTAGATAAC TACGATACGG
2461 GAGGGCTTAC CATCTGGCCC CAGTGCTGCA ATGATACCGC GAGACCCACG CTCACCGGCT
2521 CCAGATTTAT CAGCAATAAA CCAGCCAGCC GGAAGGGCCG AGCGCAGAAG TGGTCCTGCA
2581 ACTTTATCCG CCTCCATCCA GTCTATTAAT TGTTGCCGGG AAGCTAGAGT AAGTAGTTCG
2641 CCAGTTAATA GTTTGCGCAA CGTTGTTGCC ATTGCTACAG GCATCGTGGT GTCACGCTCG
2701 TCGTTTGGTA TGGCTTCATT CAGCTCCGGT TCCCAACGAT CAAGGCGAGT TACATGATCC
2761 CCCATGTTGT GCAAAAAAGC GGTTAGCTCC TTCGGTCCTC CGATCGTTGT CAGAAGTAAG
2821 TTGGCCGCAG TGTTATCACT CATGGTTATG GCAGCACTGC ATAATTCTCT TACTGTCATG
2881 CCATCCGTAA GATGCTTTTC TGTGACTGGT GAGTACTCAA CCAAGTCATT CTGAGAATAG
2941 TGTATGCGGC GACCGAGTTG CTCTTGCCCG GCGTCAATAC GGGATAATAC CGCGCCACAT
3001 AGCAGAACTT TAAAAGTGCT CATCATTGGA AAACGTTCTT CGGGGCGAAA ACTCTCAAGG
3061 ATCTTACCGC TGTTGAGATC CAGTTCGATG TAACCCACTC GTGCACCCAA CTGATCTTCA
3121 GCATCTTTTA CTTTCACCAG CGTTTCTGGG TGAGCAAAAA CAGGAAGGCA AAATGCCGCA
3181 AAAAAGGGAA TAAGGGCGAC ACGGAAATGT TGAATACTCA TACTCTTCCT TTTTCAATAT
3241 TATTGAAGCA TTTATCAGGG TTATTGTCTC ATGAGCGGAT ACATATTTGA ATGTATTTAG
3301 AAAAATAAAC AAATAGGGGT TCCGCGCACA TTTCCCCGAA AAGTGCCACC TGACGTCTAA
3361 GAAACCATTA TTATCATGAC ATTAACCTAT AAAAATAGGC GTATCACGAG GCCCTTTCGT
3421 CTTCAC
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文献和实验相关实验
蛋白为44KD，融合后应为73KD，但是没有见到表达. 综合分析会是什么原因？该蛋白国外已在pQE30载体上表达成功，应该不会是稀有密码的原因造成表达终止吧？第1号和3号克隆已测序，表达框没有移码，基因全长正确。测序结果如下，请参考： AAATCGGATCTGGTTCCGCGTGGATCCCCGGAATTCCCGGGTCGACATGATACAAGTACTGATGGCTGCTGCAAGCTTTG
蛋白是相当重要的；同时可以纯化出那些完整表达的蛋白，一些在翻译过程中容易造成“暂停”现象的蛋白就不用怕纯化产物里含有不完整的产物。融合了6×组氨酸标签的有pQE-60和pQE-70，融合了6×His-DHFR的有pQE-16。 顺式抑制载体 pQE系列的表达载体一般情况下需要在M15菌株中进行表达的，但是设计的pQE80L系列就没有这种约束，它可以在任意大肠杆菌株中进行表达。这与一般的pQE载体利用M15中质粒pREP4的反式lacI抑制子调控不同，它是利用顺式lacIq调控产生大量lac抑制
反应过夜。 3. 反应完毕后取5mL pQE-31质粒的酶切液做电泳分析，检验酶切是否完全。酶切完全，进行下一步。 4. 将酶切处理的后pQE-31和pUC18-CAT 质粒，分别上样跑琼脂糖凝胶电泳（注意加DNA分子量标准）。电泳结束后用DNA琼脂糖胶纯化试剂盒按照试剂盒说明书的方法回收DNA片段。前者回收的片段为3.5kb，后者为650bp。 5. 将回收的pQE-31载体质粒均分为两份，其中一份与酶切后回收的CAT片段混合，做连接；另一份不加CAT片段，做对照。操作如下：
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pQE-70载体
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