| 出品公司: | ZYbscience |
|---|---|
| 载体名称: | pAd-BLOCK-iT-DEST |
| 质粒类型: | RNAi载体；Gateway载体；腺病毒载体 |
| 高拷贝/低拷贝: | 低拷贝 |
| 启动子: | U6 |
| 克隆方法: | Gateway |
| 载体大小: | 34864bp |
| 5' 测序引物及序列: | 5′-GACTTTGACCGTTTACGTGGAGAC-3′ |
| 3' 测序引物及序列: | 5′-CCTTAAGCCACGCCCACACATTTC-3′ |
| RNAi类型: | shRNA |
| 载体抗性: | 氨苄青霉素 |
| 筛选标记: | -- |
| 克隆菌株: | ccdB阳性筛选 DB3.1 感受态细胞， 阴性筛选用 OmniMAX2-T1 感受态细胞 重组腺病毒载体的复制扩增则最好使用 Stbl3感受态细胞，使用DH5a则常常会发生质粒拷贝数降低、小提提不出质粒、质粒大小改变等现象。 |
| 备注: | 对应的入门载体是 pENTR/U6 腺病毒包装可以选用Invitrogen出品的293A包装细胞系，或者使用bj5183菌株。 |
| 产品目录号: | V492-20 |
| 稳定性: | 稳表达 |
| 组成型: | 组成型 |
| 病毒/非病毒: | 腺病毒 |
- ¥1800
- ZYbscience
- 中国/美国
- ZY
- 2025年07月16日
11 年钻石会员
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃低温保存
- 保质期：
三年
- 英文名：
pAd/BLOCK-iT-DEST
- 库存：
20
- 供应商：
泽叶生物
pAd-BLOCK-iT-DEST载体基本信息
pAd-BLOCK-iT-DEST载体质粒图谱和多克隆位点信息
pAd-BLOCK-iT-DEST载体简介
pAd/BLOCK-iT-DEST RNAi Gateway 载体
(pAd/BLOCK-iT-DEST RNAi Gateway Vector) 可用于在体内高效导入和瞬时表达来自腺病毒载体的短发夹 RNA (shRNA)。 新型克隆方法将约 50 bp DNA 寡核苷酸克隆到 BLOCK-iT-U6 入门载体中紧随 U6 polIII 启动子之后的位置。 将入门载体高效重组到 pAd/BLOCK-iT-DEST 载体后进行病毒制备和转导，随后 U6 启动子驱动的 shRNA 可在大多数分裂或非分裂哺乳动物细胞类型中瞬时表达。 生成的 shRNA 可避开宿主防御机制，将有效产生 RNAi 基因抑制反应。
pAd/BLOCK-iT-DEST 载体（图 1）提供：
• attR 位点环绕的无启动子区域，用于与侧翼序列为 attL 的包含RNAi 表达盒的 U6 Gateway入门载体或任何侧翼具有 attL 的启动子和基因序列进行高效重组
• 高效包装腺病毒和导入目的 shRNA 所需的所有组分。 使用这种载体，可对分裂和非分裂哺乳动物细胞以及动物模型中的基因抑制进行瞬时分析。
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文献和实验相关实验
用293FT细胞系和相关的ViraPower™ 试剂制备的高滴度的慢病毒储备液，进行有效的和可控制的导入。一旦制备好了慢病毒储备液，就可以转染细胞以观测RNAi反应（图9）。pLenti6/BLOCK-iT™-DEST 慢病毒 RNAi 载体（ pLenti6/BLOCK-iT™-DEST Lentiviral RNAi vector）提供能够长期观察稳定RNAi效应的能力。这个载体包含包装U6RNAi框到病毒所需的全部的元件，因而你能够转染shRNA到正在分裂、难于转染和不分裂的细胞中（图10
Blastocyst embryo transfer into pseudopregnant recipient female mouse（图）
and exhibit bad planes of anesthesia when heavy. This is also a very inexpensive mouse to use. As an alternate, another strain I have used with considerable success is B6D2F1. These mice are hardy and display hybrid vigor. The Equipment For surgery
polIII型启动子和终止子序列，RNAi靶序列克隆进入后将在哺乳动物细胞中形成shRNA。目的载体（destinationvector）Gateway®适合的目的载体（DEST）包含attR位点，可以与入门克隆进行重组，构建表达载体。BLOCK-iT™RNAi慢病毒和腺病毒DEST载体接受来自U6入门载体的RNAi框。此外，也有在原核、酵母、昆虫或者哺乳动物系统表达天然蛋白或者融合蛋白的DEST载体可供选择。LRClonase™便于attL和attR位点在LxRGateway®重组反应中进行重组的一种酶
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