| 出品公司: | Qiagen |
|---|---|
| 别名: | pQE82L, pQE 82L |
| 质粒类型: | 大肠杆菌蛋白表达载体 |
| 表达水平: | 低拷贝 |
| 启动子: | T5 |
| 克隆方法: | 多克隆位点，限制性内切酶 |
| 载体大小: | 4752 bp |
| 5' 测序引物及序列: | pQE30-F: AGCGGATAACAATTTCACACAG |
| 3' 测序引物及序列: | pQE30-R: TTCTGAGGTCATTACTGGATC |
| 载体标签: | N-His |
| 载体抗性: | Ampicillin |
| 备注: |
QIAexpress pQE系列载体可以使用氨苄敏感的含有pREP4抑制子质粒或者含有lacIq基因的F因子决定簇的菌株中进行扩增和维持。同样的, pQE-80L系列载体编码有lacIq抑制因子, 可以使用任何大肠杆菌菌株进行扩增. pQE系列载体的配套表达菌株为M15[pREP4].
|
| 产品目录号: | ZY32923 |
| 稳定性: | 瞬时表达 Transient |
| 组成型: | 组成型 Constitutive |
| 病毒/非病毒: | 非病毒 |
- ¥800
- ZYbscience
- 中国/美国
- ZY32923
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃低温保存
- 保质期：
三年
- 英文名：
pQE-82L
- 库存：
20
- 供应商：
泽叶生物
pQE82L载体基本信息
pQE82L载体质粒图谱和多克隆位点信息
pQE82L载体简介
pQE82L载体序列
LOCUS pQE-82L 4752 bp DNA circular SYN
DEFINITION pQE-82L
ACCESSION
KEYWORDS
SOURCE
ORGANISM other sequences; artificial sequences; vectors.
COMMENT This file is created by Vector NTI
http://www.biofeng.com/
COMMENT ORIGDB|GenBank
COMMENT VNTAUTHORNAME|biofeng.com|
COMMENT VNTOAUTHORAD1|Novagen Inc.|
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..4752
/organism="pQE-82L"
/mol_type="other DNA"
gene 347..1006
/label="CAT/CamR"
/gene="CAT/CamR"
CDS 347..1006
/label="ORF frame 2"
terminator 1074..1117
/label="rrnB_T1_terminator"
misc_feature complement(1250..2341)
/label="lacI"
CDS complement(1250..2209)
/label="ORF frame 3"
misc_feature complement(2494..2516)
/label="pGEX_3_primer"
gene complement(3687..4547)
/label="Ampicillin"
/gene="Ampicillin"
CDS complement(3687..4547)
/label="ORF frame 2"
promoter complement(4589..4617)
/label="AmpR_promoter"
ORIGIN
1 CTCGAGAAAT CATAAAAAAT TTATTTGCTT TGTGAGCGGA TAACAATTAT AATAGATTCA
61 ATTGTGAGCG GATAACAATT TCACACAGAA TTCATTAAAG AGGAGAAATT AACTATGAGA
121 GGATCTCACC ATCACCATCA CCATGGGATC CGCATGCGAG CTCGGTACCC CGGGTCGACC
181 TGCAGCCAAG CTTAATTAGC TGAGCTTGGA CTCCTGTTGA TAGATCCAGT AATGACCTCA
241 GAACTCCATC TGGATTTGTT CAGAACGCTC GGTTGCCGCC GGGCGTTTTT TATTGGTGAG
301 AATCCAAGCT AGCTTGGCGA GATTTTCAGG AGCTAAGGAA GCTAAAATGG AGAAAAAAAT
361 CACTGGATAT ACCACCGTTG ATATATCCCA ATGGCATCGT AAAGAACATT TTGAGGCATT
421 TCAGTCAGTT GCTCAATGTA CCTATAACCA GACCGTTCAG CTGGATATTA CGGCCTTTTT
481 AAAGACCGTA AAGAAAAATA AGCACAAGTT TTATCCGGCC TTTATTCACA TTCTTGCCCG
541 CCTGATGAAT GCTCATCCGG AATTTCGTAT GGCAATGAAA GACGGTGAGC TGGTGATATG
601 GGATAGTGTT CACCCTTGTT ACACCGTTTT CCATGAGCAA ACTGAAACGT TTTCATCGCT
661 CTGGAGTGAA TACCACGACG ATTTCCGGCA GTTTCTACAC ATATATTCGC AAGATGTGGC
721 GTGTTACGGT GAAAACCTGG CCTATTTCCC TAAAGGGTTT ATTGAGAATA TGTTTTTCGT
781 CTCAGCCAAT CCCTGGGTGA GTTTCACCAG TTTTGATTTA AACGTGGCCA ATATGGACAA
841 CTTCTTCGCC CCCGTTTTCA CCATGGGCAA ATATTATACG CAAGGCGACA AGGTGCTGAT
901 GCCGCTGGCG ATTCAGGTTC ATCATGCCGT TTGTGATGGC TTCCATGTCG GCAGAATGCT
961 TAATGAATTA CAACAGTACT GCGATGAGTG GCAGGGCGGG GCGTAATTTT TTTAAGGCAG
1021 TTATTGGTGC CCTTAAACGC CTGGGGTAAT GACTCTCTAG CTTGAGGCAT CAAATAAAAC
1081 GAAAGGCTCA GTCGAAAGAC TGGGCCTTTC GTTTTATCTG TTGTTTGTCG GTGAACGCTC
1141 TCCTGAGTAG GACAAATCCG CCCTCTAGAT TACGTGCAGT CGATGATAAG CTGTCAAACA
1201 TGAGAATTGT GCCTAATGAG TGAGCTAACT TACATTAATT GCGTTGCGCT CACTGCCCGC
1261 TTTCCAGTCG GGAAACCTGT CGTGCCAGCT GCATTAATGA ATCGGCCAAC GCGCGGGGAG
1321 AGGCGGTTTG CGTATTGGGC GCCAGGGTGG TTTTTCTTTT CACCAGTGAG ACGGGCAACA
1381 GCTGATTGCC CTTCACCGCC TGGCCCTGAG AGAGTTGCAG CAAGCGGTCC ACGCTGGTTT
1441 GCCCCAGCAG GCGAAAATCC TGTTTGATGG TGGTTAACGG CGGGATATAA CATGAGCTGT
1501 CTTCGGTATC GTCGTATCCC ACTACCGAGA TATCCGCACC AACGCGCAGC CCGGACTCGG
1561 TAATGGCGCG CATTGCGCCC AGCGCCATCT GATCGTTGGC AACCAGCATC GCAGTGGGAA
1621 CGATGCCCTC ATTCAGCATT TGCATGGTTT GTTGAAAACC GGACATGGCA CTCCAGTCGC
1681 CTTCCCGTTC CGCTATCGGC TGAATTTGAT TGCGAGTGAG ATATTTATGC CAGCCAGCCA
1741 GACGCAGACG CGCCGAGACA GAACTTAATG GGCCCGCTAA CAGCGCGATT TGCTGGTGAC
1801 CCAATGCGAC CAGATGCTCC ACGCCCAGTC GCGTACCGTC TTCATGGGAG AAAATAATAC
1861 TGTTGATGGG TGTCTGGTCA GAGACATCAA GAAATAACGC CGGAACATTA GTGCAGGCAG
1921 CTTCCACAGC AATGGCATCC TGGTCATCCA GCGGATAGTT AATGATCAGC CCACTGACGC
1981 GTTGCGCGAG AAGATTGTGC ACCGCCGCTT TACAGGCTTC GACGCCGCTT CGTTCTACCA
2041 TCGACACCAC CACGCTGGCA CCCAGTTGAT CGGCGCGAGA TTTAATCGCC GCGACAATTT
2101 GCGACGGCGC GTGCAGGGCC AGACTGGAGG TGGCAACGCC AATCAGCAAC GACTGTTTGC
2161 CCGCCAGTTG TTGTGCCACG CGGTTGGGAA TGTAATTCAG CTCCGCCATC GCCGCTTCCA
2221 CTTTTTCCCG CGTTTTCGCA GAAACGTGGC TGGCCTGGTT CACCACGCGG GAAACGGTCT
2281 GATAAGAGAC ACCGGCATAC TCTGCGACAT CGTATAACGT TACTGGTTTC ACATTCACCA
2341 CCCTGAATTG ACTCTCTTCC GGGCGCTATC ATGCCATACC GCGAAAGGTT TTGCACCATT
2401 CGATGGTGTC GGAATTTCGG GCAGCGTTGG GTCCTGGCCA CGGGTGCGCA TGATCTAGAG
2461 CTGCCTCGCG CGTTTCGGTG ATGACGGTGA AAACCTCTGA CACATGCAGC TCCCGGAGAC
2521 GGTCACAGCT TGTCTGTAAG CGGATGCCGG GAGCAGACAA GCCCGTCAGG GCGCGTCAGC
2581 GGGTGTTGGC GGGTGTCGGG GCGCAGCCAT GACCCAGTCA CGTAGCGATA GCGGAGTGTA
2641 TACTGGCTTA ACTATGCGGC ATCAGAGCAG ATTGTACTGA GAGTGCACCA TATGCGGTGT
2701 GAAATACCGC ACAGATGCGT AAGGAGAAAA TACCGCATCA GGCGCTCTTC CGCTTCCTCG
2761 CTCACTGACT CGCTGCGCTC GGTCGTTCGG CTGCGGCGAG CGGTATCAGC TCACTCAAAG
2821 GCGGTAATAC GGTTATCCAC AGAATCAGGG GATAACGCAG GAAAGAACAT GTGAGCAAAA
2881 GGCCAGCAAA AGGCCAGGAA CCGTAAAAAG GCCGCGTTGC TGGCGTTTTT CCATAGGCTC
2941 CGCCCCCCTG ACGAGCATCA CAAAAATCGA CGCTCAAGTC AGAGGTGGCG AAACCCGACA
3001 GGACTATAAA GATACCAGGC GTTTCCCCCT GGAAGCTCCC TCGTGCGCTC TCCTGTTCCG
3061 ACCCTGCCGC TTACCGGATA CCTGTCCGCC TTTCTCCCTT CGGGAAGCGT GGCGCTTTCT
3121 CATAGCTCAC GCTGTAGGTA TCTCAGTTCG GTGTAGGTCG TTCGCTCCAA GCTGGGCTGT
3181 GTGCACGAAC CCCCCGTTCA GCCCGACCGC TGCGCCTTAT CCGGTAACTA TCGTCTTGAG
3241 TCCAACCCGG TAAGACACGA CTTATCGCCA CTGGCAGCAG CCACTGGTAA CAGGATTAGC
3301 AGAGCGAGGT ATGTAGGCGG TGCTACAGAG TTCTTGAAGT GGTGGCCTAA CTACGGCTAC
3361 ACTAGAAGGA CAGTATTTGG TATCTGCGCT CTGCTGAAGC CAGTTACCTT CGGAAAAAGA
3421 GTTGGTAGCT CTTGATCCGG CAAACAAACC ACCGCTGGTA GCGGTGGTTT TTTTGTTTGC
3481 AAGCAGCAGA TTACGCGCAG AAAAAAAGGA TCTCAAGAAG ATCCTTTGAT CTTTTCTACG
3541 GGGTCTGACG CTCAGTGGAA CGAAAACTCA CGTTAAGGGA TTTTGGTCAT GAGATTATCA
3601 AAAAGGATCT TCACCTAGAT CCTTTTAAAT TAAAAATGAA GTTTTAAATC AATCTAAAGT
3661 ATATATGAGT AAACTTGGTC TGACAGTTAC CAATGCTTAA TCAGTGAGGC ACCTATCTCA
3721 GCGATCTGTC TATTTCGTTC ATCCATAGTT GCCTGACTCC CCGTCGTGTA GATAACTACG
3781 ATACGGGAGG GCTTACCATC TGGCCCCAGT GCTGCAATGA TACCGCGAGA CCCACGCTCA
3841 CCGGCTCCAG ATTTATCAGC AATAAACCAG CCAGCCGGAA GGGCCGAGCG CAGAAGTGGT
3901 CCTGCAACTT TATCCGCCTC CATCCAGTCT ATTAATTGTT GCCGGGAAGC TAGAGTAAGT
3961 AGTTCGCCAG TTAATAGTTT GCGCAACGTT GTTGCCATTG CTACAGGCAT CGTGGTGTCA
4021 CGCTCGTCGT TTGGTATGGC TTCATTCAGC TCCGGTTCCC AACGATCAAG GCGAGTTACA
4081 TGATCCCCCA TGTTGTGCAA AAAAGCGGTT AGCTCCTTCG GTCCTCCGAT CGTTGTCAGA
4141 AGTAAGTTGG CCGCAGTGTT ATCACTCATG GTTATGGCAG CACTGCATAA TTCTCTTACT
4201 GTCATGCCAT CCGTAAGATG CTTTTCTGTG ACTGGTGAGT ACTCAACCAA GTCATTCTGA
4261 GAATAGTGTA TGCGGCGACC GAGTTGCTCT TGCCCGGCGT CAATACGGGA TAATACCGCG
4321 CCACATAGCA GAACTTTAAA AGTGCTCATC ATTGGAAAAC GTTCTTCGGG GCGAAAACTC
4381 TCAAGGATCT TACCGCTGTT GAGATCCAGT TCGATGTAAC CCACTCGTGC ACCCAACTGA
4441 TCTTCAGCAT CTTTTACTTT CACCAGCGTT TCTGGGTGAG CAAAAACAGG AAGGCAAAAT
4501 GCCGCAAAAA AGGGAATAAG GGCGACACGG AAATGTTGAA TACTCATACT CTTCCTTTTT
4561 CAATATTATT GAAGCATTTA TCAGGGTTAT TGTCTCATGA GCGGATACAT ATTTGAATGT
4621 ATTTAGAAAA ATAAACAAAT AGGGGTTCCG CGCACATTTC CCCGAAAAGT GCCACCTGAC
4681 GTCTAAGAAA CCATTATTAT CATGACATTA ACCTATAAAA ATAGGCGTAT CACGAGGCCC
4741 TTTCGTCTTC AC
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文献和实验相关实验
蛋白为44KD，融合后应为73KD，但是没有见到表达. 综合分析会是什么原因？该蛋白国外已在pQE30载体上表达成功，应该不会是稀有密码的原因造成表达终止吧？第1号和3号克隆已测序，表达框没有移码，基因全长正确。测序结果如下，请参考： AAATCGGATCTGGTTCCGCGTGGATCCCCGGAATTCCCGGGTCGACATGATACAAGTACTGATGGCTGCTGCAAGCTTTG
蛋白是相当重要的；同时可以纯化出那些完整表达的蛋白，一些在翻译过程中容易造成“暂停”现象的蛋白就不用怕纯化产物里含有不完整的产物。融合了6×组氨酸标签的有pQE-60和pQE-70，融合了6×His-DHFR的有pQE-16。 顺式抑制载体 pQE系列的表达载体一般情况下需要在M15菌株中进行表达的，但是设计的pQE80L系列就没有这种约束，它可以在任意大肠杆菌株中进行表达。这与一般的pQE载体利用M15中质粒pREP4的反式lacI抑制子调控不同，它是利用顺式lacIq调控产生大量lac抑制
8.0） PCI （25:24:1） RNase A （1 mg/mL） 1% agarose gel 方法步骤： 1） 由前一天转形所得的转形株中，挑选12~24 个单一菌落，在LB/Amp plate上划数道短的横线或斜线，同时也须要接种带有载体pQE31 的菌株，于37℃培养过夜或直至菌体长出。 2） 以接种环将菌体刮下，悬浊在30 μL 1×NET 中，震荡混合均匀。 ◆ 不要忘了pQE31/JM109! 3） 加入30 μL PCI,剧烈震荡。 4） 以12,000 rpm 离心
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