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- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
长期
- 英文名:
C-YFP plasmid(with CMV promoter)
- 库存:
342
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
1μg
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博供应的C端YFP标签融合蛋白质粒(黄色荧光蛋白)特价促销用于生化科研试验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多C端YFP标签融合蛋白质粒(黄色荧光蛋白)等克隆与表达产品请联系我司咨询订购。
名称:C端YFP标签融合蛋白质粒(黄色荧光蛋白)特价促销
规格:1μg
编号:YT468
英文名:C-YFP plasmid(with CMV promoter)
品牌:百奥莱博
本质粒是哺乳动物细胞表达质粒,用于表达C端含YFP(Yellow Fluorescent Protein, 黄色荧光蛋白)标签的融合蛋白。该质粒含有CMV启动子,可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达。在多克隆位点的后面有一个YFP的完整编码序列,因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达C端含有YFP标签的融合蛋白。利用YFP的荧光特性可以比较容易地观察融合蛋白表达水平和细胞内定位,也可以利用YFP抗体来检测或免疫沉淀融合蛋白。YFP与GFP高度相似,可尝试用GFP抗体检测YFP。该质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后,可以使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
本质粒的主要信息如下:
| Feature Nucleotide | Position |
| CMV promoter | 1-602 |
| T3 promoter and T3 primer binding site | 620-639 |
| Multiple cloning site | 651-740 |
| YFP | 741-1460 |
| T7 promoter and T7 primer binding site | 1510-1531 |
| SV40 polyAsignal | 1543-1926 |
| f1 origin of ss-DNA replication | 2064-2370 |
| bla promoter | 2395-2519 |
| SV40 promoter | 2539-2877 |
| Neomycin/kanamycin resistance ORF | 2912-3703 |
| HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal | 3704-4162 |
| pUC origin | 4291-4958 |
本质粒(5010bp)的图谱如下:
使用说明:
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. 本质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因,需注意插入基因片段和tag之间的读码框要一致,即需要避免发生移码突变。构建的质粒可以用常规方法转染细胞。
储存条件:-20℃。
欲咨询购买C端YFP标签融合蛋白质粒(黄色荧光蛋白)特价促销,请致电北京百奥莱博科技有限公司,为您提供最全面周到的产品服务,除此之外,我公司正在促销以下产品:
·YT™免疫染色一抗稀释液
编号:YT887
英文名称:YT™ Primary Antibody Dilution Buffer for Immunol Staining
规格:100ml
本品是最新一代的高效一抗稀释液,总体效果显著优于传统的基于BSA(牛血清白蛋白)、血清等的一抗稀释液,可以用于免疫荧光(Immunofluorescence, IF)、免疫组化(Immunohistochemistry, IHC)和免疫细胞化学(Immunocytochemistry, IC)等免疫染色时一抗的稀释和配制。
YT™免疫染色一抗稀释液可以有效节约一抗。本产品稀释和配制的一抗可以在4℃保存和使用不少于6个月,并且可以反复多次用于免疫染色,利于节约一抗。
YT™免疫染色一抗稀释液稀释的一抗孵育后背景极低。本封闭液不含血清和白蛋白,确保极高的信噪比。
YT™ 免疫染色一抗稀释液兼容性好。后续兼容辣根过氧化物酶(Horseradish peroxidase,HRP)、碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase, AP)和生物素标记的二抗。本产品不含生物素,不会干扰基于生物素的检测。
YT™ 免疫染色一抗稀释液使用便捷。本产品无需添加任何额外的试剂,可以直接用于一抗的稀释。
图1. YT™免疫染色一抗稀释液用于免疫荧光(IF)和免疫细胞化学(IC)的检测效果图。上图为HeLa细胞用一抗α-Tubulin Rabbit Polyclonal Antibody,和二抗Cy3标记的山羊抗兔IgG(H+L)进行荧光染色(左图)或二抗辣根过氧化物酶标记山羊抗兔IgG(H+L)并用DAB显色(右图)的检测效果图。左图中可见非常清晰的红色荧光的微管形态,右图中可见非常清晰的棕色微管形态。实际实验结果会因样品、抗体、实验条件等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。
按照每次一抗稀释需要5-10ml一抗稀释液计算,一个包装的YT™免疫染色一抗稀释液可以稀释10-20次一抗。
注意事项:
1. 为进一步提高信噪比,推荐同时使用YT™免疫染色封闭液(YT886)、YT™免疫荧光染色二抗稀释液(YT888)和YT™免疫组化染色二抗稀释液(YT889)用于封闭及二抗的稀释。
2. 为了能使稀释的一抗可以反复多次使用,一抗孵育结束后稀释的一抗应立即存放在4℃,以便于后续重复使用。
储存条件:4℃,有效期一年。
C端YFP标签融合蛋白质粒(黄色荧光蛋白)特价促销关键词:YT468,C-YFP plasmid(with CMV promoter),黄色荧光蛋白,C端YFP标签融合蛋白质粒(黄色荧光蛋白)
18883-66-4 链脲佐菌素 Streptozocin (STZ)
ARB13164 小鼠热休克因子1(HSF1)血清中含量检测 Mouse heat shock factor 1,hsf1 ELISA KIT
2,2-二羟基联苯 Carboxymethyl Chitosan 1806-29-7
ARB13818 豚鼠特异性免疫球蛋白E(sIgE)代做ELISA实验 Guinea pig specific immunoglobulin e,slge ELISA KIT
胰蛋白酶(牛胰) Snailagglutinin 9002-07-7
丫啶黄素 Potassium gluconate 8048-52-0
58-63-9 Inosine,Free Base 肌苷
PY02-278 月桂基硫酸盐胰蛋白胨MUG肉汤 100克
ARB10877 人抗胶原蛋白抗体(CLA)检测服务 Human collagen autoantibody,cla ELISA KIT
ARB12530 大鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)免费代测 Rat oxidized lowdensity lipoprotein,oxldl ELISA KIT
邻乙氧基苯甲酸 Ammonium pentaborate 134-11-2
田菁胶 γ-Cyclodextrin
BTN130661 RecA蛋白 RecA
PY02-025 亚硒*(代"酸")盐增菌培养基(SF) 250克
ARB13633 兔子胰岛素样生长因子1(IGF-1)检测服务 Rabbit insulin-like growth factor 1,igf-1 ELISA KIT
谷氨酸脱氢酶 Starch soluble 9029-12-3
F030404 胶体金标记小鼠抗猴IgG抗体 Monoclonal Mouse Anti-Monkey IgG*GOLD
BTN130917 dCTP溶液,100mM dCTP Solution
ARB11244 人柯萨奇病毒IgG(Cox V-IgG)免费代测 Human coxsackie virus igg,cox v-igG ELISA KIT
C端YFP标签融合蛋白质粒(黄色荧光蛋白)特价促销关键词:YT468,C-YFP plasmid(with CMV promoter),黄色荧光蛋白,C端YFP标签融合蛋白质粒(黄色荧光蛋白)
·Calpain 1 Large Subunit抗体
编号:YT652
英文名称:anti-Calpain 1 Large Subunit antibody
规格:>20次
本抗体是用人工合成的人Calpain 1 large subunit一段多肽进行适当修饰后免疫rabbit,然后用protein A和抗原多肽亲和柱经过两步纯化得到的高纯度抗体。
本Calpain 1 large subunit抗体可以检测内源性calpain 1 large subunit,也可以检测calpain 1 large subunit在Leu28位剪切产生的片段(calpain 1 large subunit autoproteolytically cleaved at Leu28)。
Calpains是一类定位在细胞浆中,高度保守的,并且在哺乳动物组织中广泛存在的Ca2+依赖的半胱氨酸蛋白酶。有功能活性的calpain是由一个30kDa的调节亚基和一个80kDa左右的催化亚基组成的异源二聚体。Calpain 1和calpain 2的30kDa小亚基是相同的,但80kDa的大亚基则不同。在体外,calpain 1的激活需要微摩尔(μM)浓度的钙离子,calpain 2的激活则需要毫摩尔(mM)浓度的钙离子,因此calpain 1也被称为mu-calpain或μ-calpain,而calpain 2也被称为m-calpain。目前已有大量的关于calpain的活性调节的研究,表明其蛋白酶活性主要为转录后调节,机制主要有钙离子浓度调控、异源二聚体的亚细胞定位、通过EGFR-Erk信号通路诱导的磷酸化、内源性抑制剂(calpastatin)和自身剪切。Calpastatin可以抑制calpain在Gly27和Leu28之间的自身剪切。Calpains剪切的蛋白底物包括生长因子受体或激素受体、蛋白激酶、磷酸酯酶和细胞骨架蛋白等。Calpain可以影响细胞粘附和细胞骨架重排。Calpain可以通过激活Rac1和RhoA,影响focal adhesion形成,影响细胞的铺展和迁移。Calpain活性的控制受到药品开发研究的关注,calpain活性的抑制可以减缓肿瘤侵袭或改善慢性炎症。目前还发现calpain和2型糖尿病、神经退行性疾病、肌肉萎缩症、脑缺血和脑损伤有关。
组份:
Calpain 1 Large Subunit抗体————20μl
Western一抗稀释液————20ml
交叉反应性:人,小鼠,大鼠
宿主:兔
免疫原物种:人
免疫原:人工合成的人Calpain 1 large subunit一段多肽
抗体识别位点:Calpain 1 large subunit
分子量:75/80kD
应用:WB,IF
推荐稀释比例:WB(1:1000), IF(1:100)
注意事项:
1. 在Western实验后,请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体,包括已经使用过的稀释抗体,4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体,使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象,可以10000g离心1-3分钟,取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况,则可以考虑废弃该抗体。
3. 对于本抗体,Western检测时一抗要4℃缓慢摇动过夜,如果仅短时间与一抗孵育检测效果较差。
储存条件:-20℃,有效期一年。
北京百莱博科技有限公司专业生产供应销售生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购C端YFP标签融合蛋白质粒(黄色荧光蛋白)特价促销。
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文献和实验时效率最高 [2,3] 。在设计钙变色子时,用 GFP 突变体作为两个伙伴荧光团:蓝绿色荧光蛋白作为给体,而黄色荧光蛋白作为受体(见图4.1 ; 参考文献 [4])。如果两个荧光团融合于不同的作用伙伴,分子间 FRET 可以用来探测蛋白质-蛋白质相互作用,而如果两个荧光团都融合到同一个蛋白质,分子内 FRET 可用来探测蛋白质剪切和构象变化 [3] 。 4.1.2 钙变色子的一般设计 使用分子内 FRET 的概念,钙变色子由夹在 CFP 和 YFP 之间的,前后融合的 CaM 的 N
就行了。 如果荧光蛋白是在目的蛋白的C端,目的基因不能有终止密码子。 zhangyuxianggx 谢谢!但是我不明白我的目的基因在pGEM-gene这个质粒上,为什么还要给我pcDNA3-mCherry这个载体 本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴 师兄微信号:shixiongcoming
. coli/mammals pECFP-C1 pECFPN1 表达 青色 荧光蛋白和目的基因的融合蛋白,目的基因位于N端 kan/neo 4.7kb E. coli/mammals pEYFP-C1 pEYFPC1 表达 黄色 荧光蛋白和目的基因的融合蛋白,目的基因位于C端 kan/neo 4.7kb E. coli/mammals 4)、哺乳动物/真核荧光素酶载体(研究启动子专用)来自荧火虫的化学发光剂,加入底物后发光,不适合追踪单个细胞。 PGL3-basic PGL
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