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文献和实验PCR purification kit) purify DNA through Qiaquick column elute DNA into 50 µl H2 O use 0.5 - 1 µl per 25 µl PCR reaction: 1 x 95 °C, 2 min 21 x 95 °C, 30 sec; 60 °C, 30 sec; 72 °C, 1 min 1 x 72
(72 °C, 5 min.) store PCR reactions at -20 °C until the gelrun IV. denaturing gel prepare 6 % denaturing polyacrylamide gel (7 M urea, 1 x TBE), prerun for 30 min at 60 W mix 3.5 µl of the PCR reaction with 2 µl
Yeast Colony PCR Akada et al., Biotechniques 28:668-674 (April 2000) MATERIALS 0.25% SDS 10X Colony PCR Buffer: 0.125 M Tris-HCl pH 8.5 0.5625 M KCl 25 mM MgCl2 10 mM dNTP's 20% Triton X-100 Taq
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