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上海瑶韵生物
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文献和实验10kDa 干扰素γ诱导蛋白(IP10)在牛生物样本中的精确检测实验
预期应用本试剂盒运用双抗体夹心 ELISA 法定量测定人血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液和其他生物液体中 IP10 含量。需自备的设备及试剂1.450±10nm 滤光片的酶标仪 (建议仪器使用前提前预热)2.单道或多道微量加液器及吸头3.稀释样品的 EP 管4.蒸馏水或去离子水5.吸水纸6.盛放洗液的容器标本的采集与保存1. 血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置 2 小时或 4oC 过夜,然后 1000×g 离心 20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20oC 或-80
分钟,倾去上清液,再以同样方法离心一次,用移液器尖头将残留的PEG溶液吸净。此时应能看到管底有芝麻大小的噬菌体颗粒沉淀。 (6)将沉淀物溶解于400ml TE缓冲液(10mmol/L Tris-HCl pH8.0,1mmol/L EDTA)。 (7)加等体积氯仿/异戊醇(24:1)混合液,强烈振荡1分钟,再以12000g离心5分钟。 (8)将水相转入一干净eppendorf管(不要触动原管中两相交界面),加等体积酚/氯仿(1:1)混合液,强烈振荡1分钟,12000g离心5分钟
新配新用。(4)10×TBE缓冲液(1 mol/L Tris,0.83mol/L 硼酸,10mmol/L EDTA): 121.1g Tris,51.35g硼酸,3.72g Na2 EDTA ・2H2O,溶于双蒸水中定容至1升,置于4℃下可贮存2周,其pH约为8.3。(5)TBE电极缓冲液:10×TBE 缓冲液稀释至1×TBE备用。(6)TEMED(7)固定/停止溶液:10%冰醋酸(V/V)配制2升备用。(8)染色溶液:硝酸银2克,甲醛3ml,溶于2升超纯水中备用。(9)显影溶液:60克碳酸
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