Eppendorf Xplorer plus电动移液器, 单

农杆菌质粒DNA提取常规方法（不用试剂盒）

的200 µl Sol I (P1)溶液。 三、对培养一昼夜的的Falcon试管在3600 rpm速度下进行离心12 min，丢弃上清。 四、用200 µl 5 M NaCl重悬农杆菌细胞，利用涡旋将农杆菌细胞混匀。转移到eppendorf 管中。 五、加入20 µl 10% N-Lauroylsarcosine sodium溶液，上下倒置6-8次混匀（从不同方向倒置）。 六、最大速度（13000 × g ）下离心2 min，丢掉上清液。

类器官培养与应用——卵巢癌类器官

Y27632 - - 10μM -   DMSO - - - 10%     组织处理 1、将取样培养基中的组织转移到培养皿中，用 PBS 多次冲洗至液体变澄清。然后用无菌手术刀剔除脂肪及坏死组织。 2、将组织切割为 1–2 mm3 的小块，此步骤可以留存适量组织用于测序、免疫组化分析等。 3、将所有剩余的组织碎片收集到 30 ml 锥形管中，加入 8 ml 解离培养基，并在 37°C条件下解离 1-2h。每隔 20min，利用移液器机械吹打

PCR扩增DNA

，复性温度为37℃～55℃，延伸合成温度为72℃，DNA聚合酶为Taq酶（可耐受95℃左右的高温而不失活），反应循环数为30。 【实验材料】 1.实验器材 PCR扩增仪，台式高速离心机，移液器，经高压灭菌后的Eppendorf管，电泳仪。 2.实验 试剂 （1）模板DNA（0.1µg/µl）：用牙签挑取单菌落悬浮到50µl的裂解液中（裂解液1%TritonX-100，20mmol/l Tris