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上海瑶韵生物
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文献和实验采用Ostro 96孔样品制备板轻松提高DBS萃取物的洁净程度
样品温度: 15 ℃ 强洗针液: 60:40 ACN:IPA+2% HCOOH 弱洗针液: 95/5 H2 O/MeOH 沃特世Xevo TQ-S MS运行条件,ESI + 毛细管电压: 3.0 V 脱溶剂温度: 550 ℃ 锥孔气流速: 150 L/Hr 脱溶剂气流速: 1000 L/Hr 碰撞池压力: 2.6×10(-3) mbar MRM通道监测,ESI+ 参见表
除>95%的蛋白提取和样品制备过程中所使用的去垢剂,而蛋白和多肽损失极少。此树脂适用于常用去垢剂的去除,如浓度在0.5-1%的SDS、Triton X-100、NP-40和CHAPS。目前有预装的离心柱和离心板形式,最多可处理100 µL样品。另外,您也可以购买HiPPR Detergent Removal Spin Column Kit,其中包含树脂浆和空的离心柱,便于您自己调整样品体积。 整个处理过程相当简单,仅需15分钟。首先是离心去除保存液,之后用缓冲液平衡树脂并离心,重复
药物的介质,而加药组加入不同浓度的药物。8.避免血清干扰。用含15%胎牛血清培养液培养细胞时,高的血清物质会影响试验孔的光吸收值。由于试验本底增加,会试验敏感性。因此,一般选小于10%胎牛血清的培养液进行。在呈色后,尽量吸净培养孔内残余培养液。实验步骤贴壁细胞:1.收集对数期细胞,调整细胞悬液浓度,每孔加入100ul,铺板使待测细胞调密度至1000-10000孔,(边缘孔用无菌PBS填充)。2.5%CO2,37℃孵育,至细胞单层铺满孔底(96孔平底板),加入浓度梯度的药物,原则上,细胞贴壁后即可
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