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文献和实验神容易送神难!从多肽样品中去除去垢剂颇具挑战性,也很关键,因为即使是极低浓度的去垢剂也会污染仪器,干扰柱结合、洗脱和多肽离子化。 HiPPR其实是High Protein and Peptide Recovery的缩写,意味着蛋白及多肽的高效回收。离心柱或96孔离心板所用的HiPPR去垢剂去除树脂可从25-200 µL样品中高效去除去垢剂,从而改善LC-MS/MS和MALDI-MS分析的结果。 HiPPR去垢剂去除树脂是为1-100 µg/mL的蛋白浓度而优化的,可去
人 iPS 细胞体外分化为气道上皮肺类器官用于呼吸系统疾病研究应用以及iPSC操作指南
台中,使用体积设置为 10 µL的无菌 20 µL 移液器吸头从 60 mm 培养皿中6个较完整的类器官,并将其转移到 96 孔 U 型底板的 1 个孔中。 6. 将 96 孔板从解剖台转移到组织培养超净台中。 注意:为避免 ECM基质胶过早凝胶化,我们建议一次制备不超过 3 个细胞培养小室。 1. 将 60 µL 冷的 100%的减生长因子(GFR) ECM基质胶加入步骤 5 中的 96 孔板的每个孔中。通过移液器轻轻混合几次,避免产生任何气泡。 总体积 = 每孔130 µL。
【原创】微板考马斯亮蓝蛋白定量法 ,大家共享!评论一下各位的心得
等7个浓度管,按上表操作。在试管中完成反应,随后移入酶标板,每孔200μl,测定波长490或595nm。测定完成后,以标准管的OD值为横坐标,对应的蛋白浓度为纵坐标制成标准曲线。 y = 5.0807x - 0.0057 R2 = 0.9997。(参考) 3. 样本蛋白测定:取待侧样品5μl加入400μl CBB液,其余操作同标准曲线制作,测定OD595值。所得OD值在标准曲线拟合公式上算出相应的蛋白含量。样品中的蛋白含量以mg/ml表示。 注意: 1. 所用器械不能有蛋白污染,须经泡酸
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