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- Retrovirus-001
- 2026年01月24日
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髓系：K562 U937 THP-1 L1210 HL-60 ……
淋系： A3 Supb15 Reh Jurkat ……
NK系：NK92
原代：造血干(LSK) 原代T ， B， NK, PBMC
你还在苦逼的转这些细胞吗？
汉恒高滴度逆转录病毒轻松搞定！！！
逆转录病毒是一类RNA病毒。在逆转录酶的作用下，以病毒RNA为模板合成cDNA,再通过DNA复制、转录、翻译等过程形成病毒颗粒。
逆转录病毒来源于可感染人和小鼠细胞的 Moloney鼠白血病病毒（Mo-MLV）。
逆转录病毒载体的最显著的优势在于它们能将单链RNA （ssRNA）基因组转换为dsDNA分子，以便稳定地整合到宿主基因组中。
逆转录病毒表达系统是一种新的重组蛋白高效表达系统，由逆转录表达载体、辅助载体（表达病毒包装需要的蛋白质）和包装细胞系组成。由于逆转录病毒载体具有基因组结构简单，便于基因操作、转染效率高、宿主范围广、易于分离等优点，因此在外源基因表达、基因沉默、基因治疗、生物制药等方面得到了广泛应用。
逆转录病毒载体只能感染分裂细胞，对非分裂细胞没有感染作用。汉恒生物可为您提供高纯度、高滴度的逆转录病毒。
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| retrovirus质粒 |
辅助包膜质粒 |
感染范围 | 包装细胞 |
| PMSCV，PLXSN， |
pcl-Eco |
mouse和rat细胞，mouse高效感染，human细胞不可感染 |
293T，plat-E |
| pcl-10A1 |
基本所有哺乳动物细胞（包括仓鼠） |
293T |
|
| VSV-G/Gag-pol |
基本所有哺乳动物细胞（包括仓鼠） |
293T |
注意：客户需要提供质粒模板或者提供插入片段信息：如序列信息、基因名、NCBI登陆号等；
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文献和实验hetingcopy 大家好，我现在正在做慢病毒包装，用的是CLONTECK的包装系统，第一次感染293T细胞后，荧光很亮，48H后收集病毒上清，离心后冻于-80度，一天后感染靶细胞，什么都没有？请问大家是怎末做的？谢谢。 大鹏鸟 看到荧光并不代表包装成功,它代表的只是你的质粒转进去了。做慢病毒包装时必须要搭配好几个质粒的比例。转染之后要能看到细胞形态的病变。收集上清的时候要注意尽快分装保存。有可能的话最好把细胞也裂解一下
就可以，不需要等很久。这个方法的不足之处是实验的规模受到限制，虽然一次体外转录合成能提供足够做数百次转染的siRNAs，但是反应规模和量始终有一定的限制。而且和化学合成相比，还是需要占用研究人员相当的时间——毕竟，化学合成只需要定购就可以了。值得一提的是体外转录得到的siRNAs只要较低的浓度就可以达到化学合成siRNAs较高浓度得到的效果（0.5-20 nM vs. 50-100 nM per transfection）最适用于：筛选siRNAs，特别是需要制备多种siRNAs，化学合成的价格成为障碍时
tydyhan：我一直做细菌这块，对病毒操作不是很懂，请教大家：建立表达某基因的重组逆转录病毒载体的B16细胞系含某基因的重组逆转录病毒载体已获得，需转染PA 317包装细胞，通过G418筛选获得表达某基因的重组逆转录病毒。Polybrene进行转染B16细胞，筛选阳性转化克隆，获得稳定表达的B16细胞株。这里怎么具体进行操作??丁香园网友adychen认为：１、首先最好选择的是带ＥＧＦＰ逆转录病毒载体，方便以后的转染率和感染率的观察．２、重组载体；３、得出载体抗性基因的抗生素最佳细胞筛浓度
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